【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及生理磷酸鹽檢測鑒別，具體為基于碳點-金屬離子對的多通道陣列傳感器用于生理磷酸鹽的檢測和鑒別方法。
技術(shù)介紹
1、三磷酸腺苷（atp）是細(xì)胞內(nèi)的能量分子，參與體內(nèi)脂肪、蛋白、核酸及糖的代謝過程，在各種生命活動中發(fā)揮著重要作用。atp由一分子腺苷和三分子磷酸基團(tuán)組成，當(dāng)機(jī)體代謝過程需要消耗能量時，在相關(guān)酶的催化作用下，遠(yuǎn)離腺苷的高能磷酸鍵很容易發(fā)生水解，被水解為二磷酸腺苷（adp）和磷酸根，adp在酶催化作用下可進(jìn)一步水解為單磷酸腺苷（amp）和磷酸根，水解過程釋放能量，以供細(xì)胞進(jìn)行正常生理活動。與atp水解過程相關(guān)的各種形式生理磷酸鹽在人體生命健康活動中發(fā)揮關(guān)鍵作用，通過atp的水解與合成，細(xì)胞可以根據(jù)需求調(diào)節(jié)能量的儲存和釋放，從而維持正常生命活動；然而，當(dāng)atp水解發(fā)生失衡，會導(dǎo)致體內(nèi)生理磷酸鹽水平的異常波動，擾亂機(jī)體正常代謝過程，從而誘導(dǎo)一系列疾病發(fā)生，例如：腎功能衰竭、低血糖、帕金森病、佝僂病等，因此，對體內(nèi)atp相關(guān)生理磷酸鹽水平的監(jiān)測對于預(yù)防疾病發(fā)生發(fā)展非常重要。
2、atp水解過程涉及多種生理磷酸鹽存在，傳統(tǒng)檢測生理磷酸鹽的方法，如高效液相色譜、電化學(xué)法、熒光法和比色法等通常只能針對一種特定生理磷酸鹽進(jìn)行檢測，這不利于在多種相似結(jié)構(gòu)生理磷酸鹽混合物中實現(xiàn)檢測和鑒別。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、（一）解決的技術(shù)問題
2、針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，本專利技術(shù)提供了基于碳點-金屬離子對的多通道陣列傳感器用于生理磷酸鹽的檢測和鑒別方法，解決了上述
技術(shù)介紹
提
3、（二）技術(shù)方案
4、為實現(xiàn)以上目的，本專利技術(shù)通過以下技術(shù)方案予以實現(xiàn)：基于碳點-金屬離子對的多通道陣列傳感器用于生理磷酸鹽的檢測和鑒別方法，具體包括以下步驟：
5、（1）、碳點的合成，其中，包括藍(lán)光碳點的合成、綠光碳點的合成以及紅光碳點的合成；
6、（2）、陣列傳感器的構(gòu)建：使用naac-hac緩沖液，將（1）中的三種碳點溶液均進(jìn)行稀釋，隨后加入相應(yīng)濃度的金屬離子，混合均勻后，即形成多通道熒光陣列傳感器；
7、（3）、加入生理磷酸鹽，觀察碳點的熒光變化。
8、優(yōu)選的，所述藍(lán)光碳點的合成方法為：首先，移取40ml的超純水加入40mg的葉酸中，并使其完全溶解后，將溶液置于50ml的高壓反應(yīng)釜中，并在180℃下反應(yīng)6h，待反應(yīng)冷卻至室溫后得到黃棕色的碳點溶液，再將碳點溶液用0.22μm的濾膜過濾處理，并經(jīng)透析處理得到黃褐色水溶液，再經(jīng)過干燥，得到黃色固體粉末。
9、優(yōu)選的，所述綠光碳點的合成方法為：首先，將2g的檸檬酸和4g的尿素與20ml的dmf混合，之后轉(zhuǎn)移至25ml的高壓反應(yīng)釜中，并將反應(yīng)釜置于160℃的烘箱中反應(yīng)4h，得到深棕色碳點溶液，并對其進(jìn)行透析處理，再經(jīng)過干燥，得到黑色固體粉末。
10、優(yōu)選的，所述紅光碳點的合成方法為：首先，將2g的檸檬酸和4g的尿素與20ml的甲酸混合，在25ml的高壓反應(yīng)釜中于160℃下反應(yīng)4h，得到暗紅棕色的溶液，用乙醇洗滌三次，再經(jīng)過干燥，得到黑色固體粉末。
11、優(yōu)選的，所述（2）中的金屬離子包括nd3+、ag+以及fe3+。
12、優(yōu)選的，所述（3）中，具體操作方法為：在96孔板中，每孔加入碳點-金屬離子溶液150μl，隨后向其中加入10μl的生理磷酸鹽溶液和40μl的naac-hac緩沖液，使每孔總體積為200μl，最后，使用酶標(biāo)儀采集不同發(fā)射通道的熒光強(qiáng)度。
13、優(yōu)選的，所述naac-hac緩沖液物質(zhì)的量濃度為10mmol/l，ph為5。
14、（三）有益效果
15、本專利技術(shù)提供了基于碳點-金屬離子對的多通道陣列傳感器用于生理磷酸鹽的檢測和鑒別方法。與現(xiàn)有技術(shù)相比，具備以下有益效果：該基于碳點-金屬離子對的多通道陣列傳感器用于生理磷酸鹽的檢測和鑒別方法，基于陣列傳感器的檢測方法具有多個交叉反應(yīng)傳感單元，根據(jù)結(jié)構(gòu)相似分析物之間的理化性質(zhì)差異，可同時讀出多種分析物的信號，借助模式識別可以實現(xiàn)對分析物的分類和定量，可以用于復(fù)雜樣本中多種生理磷酸鹽的檢測與鑒別；所構(gòu)建的陣列傳感器不僅能夠?qū)崿F(xiàn)對不同生理磷酸鹽的準(zhǔn)確檢測和區(qū)分，在定量檢測方面也表現(xiàn)出優(yōu)異的檢測性能，此外，該陣列傳感器的抗干擾能力強(qiáng)，檢測靈敏度高，在血清樣品也具備突出的傳感性能。
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1.基于碳點-金屬離子對的多通道陣列傳感器用于生理磷酸鹽的檢測和鑒別方法，其特征在于，具體包括以下步驟：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于碳點-金屬離子對的多通道陣列傳感器用于生理磷酸鹽的檢測和鑒別方法，其特征在于：所述藍(lán)光碳點的合成方法為：首先，移取40mL的超純水加入40mg的葉酸中，并使其完全溶解后，將溶液置于50mL的高壓反應(yīng)釜中，并在180℃下反應(yīng)6h，待反應(yīng)冷卻至室溫后得到黃棕色的碳點溶液，再將碳點溶液用0.22μm的濾膜過濾處理，并經(jīng)透析處理得到黃褐色水溶液，再經(jīng)過干燥，得到黃色固體粉末。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于碳點-金屬離子對的多通道陣列傳感器用于生理磷酸鹽的檢測和鑒別方法，其特征在于：所述綠光碳點的合成方法為：首先，將2g的檸檬酸和4g的尿素與20mL的DMF混合，之后轉(zhuǎn)移至25mL的高壓反應(yīng)釜中，并將反應(yīng)釜置于160℃的烘箱中反應(yīng)4h，得到深棕色碳點溶液，并對其進(jìn)行透析處理，再經(jīng)過干燥，得到黑色固體粉末。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于碳點-金屬離子對的多通道陣列傳感器用于生理磷酸鹽的檢測和鑒別方法，其特征在于：所述紅光碳點
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于碳點-金屬離子對的多通道陣列傳感器用于生理磷酸鹽的檢測和鑒別方法，其特征在于：所述（2）中的金屬離子包括Nd3+、Ag+以及Fe3+。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于碳點-金屬離子對的多通道陣列傳感器用于生理磷酸鹽的檢測和鑒別方法，其特征在于：所述（3）中，具體操作方法為：在96孔板中，每孔加入碳點-金屬離子溶液150μL，隨后向其中加入10μL的生理磷酸鹽溶液和40μL的NaAc-HAc緩沖液，使每孔總體積為200μL，最后，使用酶標(biāo)儀采集不同發(fā)射通道的熒光強(qiáng)度。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于碳點-金屬離子對的多通道陣列傳感器用于生理磷酸鹽的檢測和鑒別方法，其特征在于：所述NaAc-HAc緩沖液物質(zhì)的量濃度為10mmol/L，pH為5。
...【技術(shù)特征摘要】
1.基于碳點-金屬離子對的多通道陣列傳感器用于生理磷酸鹽的檢測和鑒別方法，其特征在于，具體包括以下步驟：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于碳點-金屬離子對的多通道陣列傳感器用于生理磷酸鹽的檢測和鑒別方法，其特征在于：所述藍(lán)光碳點的合成方法為：首先，移取40ml的超純水加入40mg的葉酸中，并使其完全溶解后，將溶液置于50ml的高壓反應(yīng)釜中，并在180℃下反應(yīng)6h，待反應(yīng)冷卻至室溫后得到黃棕色的碳點溶液，再將碳點溶液用0.22μm的濾膜過濾處理，并經(jīng)透析處理得到黃褐色水溶液，再經(jīng)過干燥，得到黃色固體粉末。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于碳點-金屬離子對的多通道陣列傳感器用于生理磷酸鹽的檢測和鑒別方法，其特征在于：所述綠光碳點的合成方法為：首先，將2g的檸檬酸和4g的尿素與20ml的dmf混合，之后轉(zhuǎn)移至25ml的高壓反應(yīng)釜中，并將反應(yīng)釜置于160℃的烘箱中反應(yīng)4h，得到深棕色碳點溶液，并對其進(jìn)行透析處理，再經(jīng)過干燥，得到黑色固體粉末。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于碳點-金屬離子對的多通道陣列傳感器用于...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：黃麗，
申請(專利權(quán))人：湖南省人民醫(yī)院湖南師范大學(xué)附屬第一醫(yī)院，
類型：發(fā)明
國別省市：
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