本發明專利技術公開了一種防治小麥禾谷孢囊線蟲的生防菌株S07，所述防治小麥禾谷孢囊線蟲的生防菌株S07為環狀鏈霉菌（Streptomycesanulatus），保藏號為CGMCCNO：8630。本發明專利技術是專門針對小麥孢囊線蟲病開發的生防菌劑，由于是生物制劑，完全沒有因化學農藥的使用所帶來的一系列問題，因而有利于小麥作物的無公害生產，農民可以不用或者少用其他化學農藥的用量，這樣不僅可以為農民節省開支，而且有利于提升糧食品質。室內和田間防治試驗驗證了S07菌劑對小麥孢囊線蟲病具有較好的防治效果。同時，該菌劑還有增產功能，可以為農民增加收入。
【技術實現步驟摘要】
【專利摘要】本專利技術公開了一種防治小麥禾谷孢囊線蟲的生防菌株S07，所述防治小麥禾谷孢囊線蟲的生防菌株S07為環狀鏈霉菌（Streptomycesanulatus），保藏號為CGMCCNO：8630。本專利技術是專門針對小麥孢囊線蟲病開發的生防菌劑，由于是生物制劑，完全沒有因化學農藥的使用所帶來的一系列問題，因而有利于小麥作物的無公害生產，農民可以不用或者少用其他化學農藥的用量，這樣不僅可以為農民節省開支，而且有利于提升糧食品質。室內和田間防治試驗驗證了S07菌劑對小麥孢囊線蟲病具有較好的防治效果。同時，該菌劑還有增產功能，可以為農民增加收入。【專利說明】防治小麥禾谷抱囊線蟲病的生防囷株S07、制備生防囷劑的方法及其應用
本專利技術屬于植物保護領域，公開了一種防治小麥禾谷孢囊線蟲的生防菌株S07及其應用。
技術介紹
禾谷孢囊線蟲(Cereal cyst nematode, CCN)屬線蟲綱,墊刃線蟲目，異皮線蟲科，異皮線蟲屬，為害小麥、大麥、燕麥、黑麥等禾谷類作物和牧草，目前在我國小麥上已發現燕麥孢囊線蟲(Heterodera avenae)和菲利普孢囊線蟲(Heteradera filipjevi)兩種病原物，嚴重威脅著我國糧食安全生產。由于目前生產上缺乏抗(耐)病品種和高效低毒的化學農藥，植物寄生線蟲的生物防治受到人們的極大關注。人們在對植物寄生線蟲的生防因子進行分離時發現放線菌的分離頻率較高而且對蔬菜、煙草根結線蟲和孢囊線蟲都具有很強的寄生作用和致死作用。放線菌是產生抗生素和其他生物活性物質的重要微生物，從除蟲鏈霉菌(Streptomyces avermitilis)的代謝物中分離到的一種大環內酯化合物-阿維菌素(Avermectin)，已被證明具有高效廣譜的殺線蟲活性并在各國開發成商品制劑。除此之外，放線菌產生的南昌霉素(Nanchangmycin)、莫比霉素(Milbemycin)、戒臺霉素(Jietaicin)等也都具有很高的殺線蟲活性。因此,放線菌作為植物寄生線蟲的生防因子具有巨大的潛力。
技術實現思路
本專利技術的目的是針對現有技術中沒有對小麥禾谷孢囊線蟲病有較高防效的生防制劑的現狀，提供開發一種防治小麥禾谷孢囊線蟲病的單一生防菌株及其菌劑，該菌劑對小麥禾谷孢囊線蟲的室內防治效果達到60%以上，田間防治效果達到45%以上。一種防治小麥禾谷孢囊線蟲的生防菌株S07,分類命名:環狀鏈霉菌,拉丁文學名:Streptomycesanulatus。保藏單位:中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏單位簡稱:CGMCC，保藏單位地址:北京市朝陽區北辰西路I號院3號，保藏日期:2013年12月23日，保藏號為 CGMCC N0.8630。本專利技術的技術方案是:所述的防治小麥禾谷孢囊線蟲的生防菌株S07制備生防菌劑的方法，S07在PDA培養液中28°C，160rpm震蕩培養48-50小時，作為種子液培養基，然后取2ml種子液培養基加入250g麥粒砂培養基中，隔天搖瓶，25°C培養8_10天，得到生防菌劑。所述的生防菌劑在防治小麥孢囊線蟲病中的應用。所述的生防菌劑在小麥增產中的應用。所述PDA培養液為馬鈴薯200g / L，葡萄糖20g / L，瓊脂粉18g / L。所述生防菌劑在防治小麥禾谷孢囊線蟲病方面的應用方法為:將S07生防菌劑按照20-25g / m-2進行溝施。本專利技術的有益效果是:本專利技術是專門針對小麥孢囊線蟲病開發的生防菌劑，由于是生物制劑，完全沒有因化學農藥的使用所帶來的一系列問題，因而有利于小麥作物的無公害生產，農民可以不用或者少用其他化學農藥的用量，這樣不僅可以為農民節省開支，而且有利于提升糧食品質。室內和田間防治試驗驗證了 S07菌劑對小麥孢囊線蟲病具有較好的防治效果。同時，該菌劑還有增產功能，可以為農民增加收入。【專利附圖】【附圖說明】圖1為S07生防菌劑在田間試驗中對小麥鮮重的影響；圖2為S07生防菌劑在田間試驗中對小麥產量的影響；圖3為S07菌株的正面菌落特；圖4為S07菌株的背面菌落特；圖5為S07孢子及孢子鏈；圖6為生防菌株S07基于16s_rRNA序列同源性的系統發育樹。【具體實施方式】一種防治小麥禾谷孢囊線蟲的生防菌株S07，分類命名:環狀鏈霉菌，拉丁文學名:Streptomyces anulatus。保藏單位:中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏單位簡稱:CGMCC，保藏單位地址:北京市朝陽區北辰西路I號院3號，保藏日期:2013年12月23日，保藏號為CGMCC N0.8630。所述的防治小麥禾谷孢囊線蟲的生防菌株S07制備生防菌劑的方法，S07在PDA培養液中28°C，160rpm震蕩培養48-50小時，作為種子液培養基，然后取2ml種子液培養基加入250g麥粒砂培養基中，所述麥粒砂培養基為煮熟麥粒與細砂的質量之比為3: 1，121°C高壓滅菌lh，隔天搖瓶，25°C培養8-10天，得到生防菌劑。所述的生防菌劑在防治小麥孢囊線蟲病中的應用。所述的生防菌劑在小麥增產中的應用。所述PDA培養液為馬鈴薯200g / L，葡萄糖20g / L，瓊脂粉18g / L。所述生防菌劑在防治小麥禾谷孢囊線蟲病方面的應用方法為:將S07生防菌劑按照20-25g / m-2進行溝施。菌株來源:生防菌S07，2009年7月再許昌小麥孢囊線蟲病田中的孢囊上分離得到。菌株分離方法:將取來的孢囊用70%的酒精消毒3min，再用1 %的次氯酸鈉消毒lmin，用無菌水沖洗3次，把孢囊在滅過菌的玻片上壓破，轉移到改良的高氏一號培養基(可溶性淀粉20g / L，硝酸鉀Ig / L，磷酸氫二鉀0.5g / L，七水硫酸鎂0.5g / L，氯化鈉0.5g / L，瓊脂18g / L，七水硫酸鐵0.01g / L)進行分離，25°C培養5d后，挑取孢囊邊緣單菌落進行劃線分離并純化，4°C冰箱中保存。菌株篩選依據:對小麥孢囊線蟲二齡線蟲(J2)的致死作用，具有方法如下，將分離到的放線菌菌株的培養液200ul加入50ul線蟲液(2000條/ ml)，同時設空白液體培養基做對照，放入15°C培養箱中，48h后觀察線蟲的死亡情況，用NaOH確定線蟲的死活，48h后校正死亡率為83%的處理的菌株命名為S07。菌株鑒定方法:鑒定方法為結合形態學鑒定，分子生物學鑒定及生理生化特征分析形態學鑒定:在ISP2培養基(酵母提取物4.0g / L，麥芽提取物10.0g / L，葡萄糖4.0g / L，瓊脂15.0g / L，pH7.3)上，氣生菌絲發達，暗灰色，能形成同心環，基內菌絲黃色，不斷裂，不產生色素，孢子成鏈，孢子鏈直或稍彎曲，孢子球形或橢圓形，表面光滑，經形態學鑒定為一種鏈霉菌(Streptomyces sp.)。分子生物學鑒定:取50~IOOmg S07菌株的菌絲體，加液氮充分研磨后，迅速轉移至1.5mL離心管中，用CTAB法提取菌株基因組DNA。利用引物fx1-f5’AGA GTT TGA TCC TGGCTC AG3’和fxir5’ AGA AAG GAG GTG ATC CAG CC3’進行PCR擴增，擴增產物經瓊脂糖凝膠回收純化后，將DNA片段連接到PMD19，然后將連接產物轉化到本文檔來自技高網...
【技術保護點】
一種防治小麥禾谷孢囊線蟲的生防菌株S07，其特征在于：所述防治小麥禾谷孢囊線蟲的生防菌株S07為環狀鏈霉菌（Streptomyces?anulatus），保藏號為CGMCC?NO：8630。
【技術特征摘要】
【專利技術屬性】
技術研發人員：李洪連，張潔，付博，李永輝，袁虹霞，石穎斐，
申請(專利權)人：河南農業大學，
類型：發明
國別省市：
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