一種紅豆杉中紫杉醇的薄層色譜檢測方法技術

一種紅豆杉中紫杉醇的薄層色譜檢測方法，涉及一種檢測方法，具體涉及一種紅豆杉中紫杉醇的薄層色譜檢測方法，所述方法包括如下步驟：⑴紫杉醇對照品溶液制備；⑵樣品溶液制備；⑶薄層色譜檢測。本發明專利技術有益效果是檢測紫杉醇方法簡單、實用和經濟。

【技術實現步驟摘要】
【專利摘要】，涉及一種檢測方法，具體涉及，所述方法包括如下步驟：⑴紫杉醇對照品溶液制備；⑵樣品溶液制備；⑶薄層色譜檢測。本專利技術有益效果是檢測紫杉醇方法簡單、實用和經濟。【專利說明】—種紅豆杉中紫杉醇的薄層色譜檢測方法
本專利技術涉及一種檢測方法，具體涉及。
技術介紹
紫杉醇是紅豆杉屬植物中的一種復雜的次生代謝產物，也是目前所了解的惟一一種可以促進微管聚合和穩定已聚合微管的藥物。同位素示蹤表明，紫杉醇只結合到聚合的微管上，不與未聚合的微管蛋白二聚體反應。細胞接觸紫杉醇后會在細胞內積累大量的微管，這些微管的積累干擾了細胞的各種功能，特別是使細胞分裂停止于有絲分裂期，阻斷了細胞的正常分裂。通過I1-1II臨床研究，紫杉醇主要適用于卵巢癌和乳腺癌，對肺癌、大腸癌、黑色素瘤、頭頸部癌、淋巴瘤、腦瘤也都有一定療效。常規的紫杉醇檢測方法為HPLC檢測，填料為反相填料。流動相為乙腈-水，檢測器是紫外檢測器。
技術實現思路
常規的HPLC檢測紫杉醇方法要求高:⑴需要一臺HPLC，一臺HPLC價格通常10萬以上，HPLC價格高，普及率低；(2) HPLC需要有專業的人員操作、維護和維修；⑶HPLC檢測需要大量溶劑，大量溶劑的使用對環境也造成了極大的污染；(4) HPLC檢測每次只能檢測一個樣品，檢測時間也長。本專利技術提供了一種易于操作、能定性半定量和經濟的薄層色譜檢測方法，該方法解決HPLC檢測的部分弊端。，所述方法包括如下步驟:⑴稱取紫杉醇0.1?lmg，用Iml有機溶劑溶解，得到紫杉醇對照品溶液；⑵將紅豆杉原料粉碎，用醇溶液浸提三次，合并三次浸提溶液，濃縮浸提溶液至原體積的1/3?1/2，用等體積有機溶劑I萃取三次，合并三次萃取相，蒸干萃取相，稱取蒸干粉末0.1?lmg，用Iml有機溶劑II溶解，得到樣品溶液；⑶吸取步驟⑴和⑵制備的溶液各5?10 μ 1，點在同一硅膠G薄層板上，展開劑是鹵代烴和醇，鹵代烴和醇的體積比是100:10?I,展開,取出，晾干,用5?10%濃硫酸乙醇溶液顯色，用105°C烘干薄層板至斑點顯色。所述方法步驟中有的機溶劑優選為甲醇、無水乙醇或N，N_甲基甲酰胺，N，N_甲基甲酰胺溶解紫杉醇溶解度高，甲醇和無水乙醇沸點低。所述方法步驟⑴紅豆杉原料優選為樹皮、枝葉和樹根。所述方法步驟⑵醇溶液優選為甲醇、無水乙醇、甲醇水溶液或乙醇水溶液。所述方法步驟⑵有機溶劑I優選為二氯甲烷、三氯甲烷或乙酸乙酯。所述方法步驟⑵有機溶劑II優選為甲醇、無水乙醇或N，N-二甲基甲酰胺，N，N-甲基甲酰胺溶解紫杉醇溶解度高，甲醇和無水乙醇沸點低。所述方法步驟⑶鹵代烴優選為二氯甲烷或三氯甲烷。所述方法步驟⑶醇優選為甲醇或無水乙醇。本專利技術有益效果是:⑴紫杉醇檢測方法簡單、實用和經濟。⑵一次檢測可以同時檢測多個樣品。⑶檢測結果可以定性和半定量。【具體實施方式】下述非限制性實施例可以使本領域的普通技術人員更全面地理解本專利技術，但不以任何方式限制本專利技術。實施例1—種紅豆杉中紫杉醇的薄層色譜檢測方法，所述方法包括如下步驟:⑴稱取紫杉醇標準品0.5mg，用Iml甲醇超聲溶解，得到紫杉醇對照品溶液，濃度0.5mg/ml,作為定性和半定量的標準；⑵將紅豆杉樹皮、枝葉和樹根粉碎，粉碎后用無水乙醇浸提三次，合并三次浸提溶液，減壓蒸餾法濃縮浸提溶液，真空度0.8MPa，水浴溫度55°C，濃縮至原體積的1/3，用等體積二氯甲烷萃取濃縮液三次，合并三次萃取相，減壓蒸餾法蒸干萃取相，真空度0.4MPa，水浴溫度35°C，稱取蒸干粉末0.5mg，用Iml甲醇超聲溶解，得到樣品溶液；⑶用玻璃點樣毛細管吸取步驟⑴和⑵制備的溶液各10 μ 1，點在同一硅膠G薄層板、距板底Icm處同一水平線上，展開劑是三氯甲烷和無水乙醇，三氯甲烷和無水乙醇的體積比是100:5，平衡5?lOmin，展開，展開至距板頂Icm處取出，取出，用熱風吹干，用10%濃硫酸乙醇溶液顯色，用105°C烘干薄層板至斑點顯色。【權利要求】1.，所述方法包括如下步驟: ⑴稱取紫杉醇0.1?lmg，用Iml有機溶劑溶解，得到紫杉醇對照品溶液； ⑵將紅豆杉原料粉碎，用醇溶液浸提三次，合并三次浸提溶液，濃縮浸提溶液至原體積的1/3?1/2，用等體積有機溶劑I萃取三次，合并三次萃取相，蒸干萃取相，稱取蒸干粉末0.1?lmg，用Iml有機溶劑II溶解，得到樣品溶液； ⑶吸取步驟⑴和⑵制備的溶液各5?10 μ 1，點在同一硅膠G薄層板上，展開劑是鹵代烴和醇，鹵代烴和醇的體積比是100:10?I,展開,取出，晾干,用5?10%濃硫酸乙醇溶液顯色，用105°C烘干薄層板至斑點顯色。2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于:所述方法步驟⑴有機溶劑是甲醇、無水乙醇或N，N-二甲基甲酰胺。3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于:所述方法步驟⑴紅豆杉原料是樹皮、枝葉和樹根。4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于:所述方法步驟⑵醇溶液是甲醇、無水乙醇、甲醇水溶液或乙醇水溶液。5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于:所述方法步驟⑵有機溶劑I是二氯甲烷、三氯甲烷或乙酸乙酯。6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于:所述方法步驟⑵有機溶劑II是甲醇、無水乙醇或N，N-二甲基甲酰胺。7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于:所述方法步驟⑶鹵代烴是二氯甲烷或三氯甲烷。8.根據權利要求1所述的方法，其特征在于:所述方法步驟⑶醇是甲醇或無水乙醇。【文檔編號】G01N30/90GK103808852SQ201210460859【公開日】2014年5月21日 申請日期:2012年11月15日 優先權日:2012年11月15日 【專利技術者】劉勝遠 申請人:劉勝遠本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種紅豆杉中紫杉醇的薄層色譜檢測方法，所述方法包括如下步驟：⑴稱取紫杉醇0.1～1mg，用1ml有機溶劑溶解，得到紫杉醇對照品溶液；⑵將紅豆杉原料粉碎，用醇溶液浸提三次，合并三次浸提溶液，濃縮浸提溶液至原體積的1/3～1/2，用等體積有機溶劑Ⅰ萃取三次，合并三次萃取相，蒸干萃取相，稱取蒸干粉末0.1～1mg，用1ml有機溶劑Ⅱ溶解，得到樣品溶液；⑶吸取步驟⑴和⑵制備的溶液各5～10μl，點在同一硅膠G薄層板上，展開劑是鹵代烴和醇，鹵代烴和醇的體積比是100：10～1，展開，取出，晾干，用5～10%濃硫酸乙醇溶液顯色，用105℃烘干薄層板至斑點顯色。

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：劉勝遠，
申請(專利權)人：劉勝遠，
類型：發明
國別省市：遼寧;21