丹參酸甲酯磺酸鈉的制備方法和應用技術

本發明專利技術公開了丹參酸甲酯磺酸鈉的制備方法和應用。該制備方法包括下述步驟：采用高效液相反相色譜法分離丹參酮類磺化液，高效液相反相色譜法的條件如下：流動相A為0.1%三乙胺-水、流動相B為0.1%三乙胺-甲醇；或，流動相A為0.1%二乙胺-水、流動相B為0.1%二乙胺-甲醇；或，流動相A為0.1%氨水、流動相B為甲醇；檢測波長為271nm，保留時間為35～50min。本發明專利技術的制備方法制備能力強、制備量大、周期短、效率高，工藝操作連續性強易于進行質量控制和生產。本發明專利技術還可將丹參酸甲酯磺酸鈉作為標準品，對丹參酮IIA磺酸鈉原料藥中的丹參酸甲酯磺酸鈉的含量進行檢測和控制。

【技術實現步驟摘要】
【專利摘要】本專利技術公開了丹參酸甲酯磺酸鈉的制備方法和應用。該制備方法包括下述步驟：采用高效液相反相色譜法分離丹參酮類磺化液，高效液相反相色譜法的條件如下：流動相A為0.1%三乙胺-水、流動相B為0.1%三乙胺-甲醇；或，流動相A為0.1%二乙胺-水、流動相B為0.1%二乙胺-甲醇；或，流動相A為0.1%氨水、流動相B為甲醇；檢測波長為271nm，保留時間為35～50min。本專利技術的制備方法制備能力強、制備量大、周期短、效率高，工藝操作連續性強易于進行質量控制和生產。本專利技術還可將丹參酸甲酯磺酸鈉作為標準品，對丹參酮IIA磺酸鈉原料藥中的丹參酸甲酯磺酸鈉的含量進行檢測和控制。【專利說明】丹參酸甲酯磺酸鈉的制備方法和應用
本專利技術涉及藥物領域，具體涉及丹參酸甲酯磺酸鈉的制備方法和應用。
技術介紹
丹參,又名血參、赤根、紅根、血生根,為唇形科植物(Salvia miltiorrhza)的根莖，其入藥始載于《神農本草經》。中醫認為，其味苦微寒，具有活血痛經、祛瘀止痛、清心除煩、涼血消癰的功效，適用于治療月經不調、痛經、經閉、崩漏、帶下、冠心病、動脈粥樣硬化、高血脂、心絞痛、跌打淤血、失眠、神經衰弱、乙肝等疾病，為婦科、內科及外傷科證屬血瘀兼熱者常用。現代藥學研究表明，丹參中化學成分復雜，主要為水溶性丹參酚酸類和脂溶性二萜醌類丹參酮類化合物。其中，丹參酮類化合物主要包括丹參酮1、丹參酮II A、丹參酮IIB、異丹參酮1、異丹參酮II A、隱丹參酮、異隱丹參酮、甲基丹參酮、羥基丹參酮等。丹參酮II A是重要的丹參有效成分。丹參酮II A磺酸鈉(Sodium Tanshinone II ASulfonate，STS)，則是丹參酮II A經磺化后得到的水溶性磺酸鹽。由于磺酸基的引入，在治療冠心病、心絞痛、心肌梗塞等疾病方面，丹參酮II A磺酸鈉相比丹參酮IIA具有更多的優越性，從而成為主要的心血管類丹參提取物中藥。丹參酮IIA是制備丹參酮IIA磺酸鈉的原料，從丹參藥材飲片提取，故難免混有少量、或極低含量其他結構較為相似的組分，如丹參酮II B、丹參酮1、隱丹參酮、紫丹參甲素等。若要制備高純度丹參酮IIA磺酸鈉，則獲得這些極低含量相關組分標準品、以及這些標準品在丹參酮IIA磺酸鈉原`料相關成分含量控制中的應用，具有重要意義。但是，由于該類化合物結構復雜，化學全合成難度大，要獲得高純度對照品成為挑戰。有研究報道從丹參酮II A磺酸鈉原料藥中提取相關物質，由于其含量極低，HPLC純度通常不到百分之一，采用高效液相法分離提取，工作量大、難度高。因此，丹參提取物中極低含量組分的高純度標準品規模化制備，及其在丹參酮IIA磺酸鈉原料藥相關物質含量監控中的應用成為本領域長期以來難以解決的技術難題。丹參酸甲酯也是丹參脂溶性二萜醌類化合物有效成分之一，并且尚未有技術大量制備丹參酸甲酯磺酸鈉的報道。現有技術中專利CN200610039234.2“一組從丹參中提取的二萜醌類化合物的磺化物在醫藥中的應用”表明丹參酸甲酯磺酸鈉可以應用于治療冠心病(包括心絞痛，心肌梗死，心律失常，心肌血供應不足)和抗菌消炎等。因此，定量控制丹參酸甲酯磺酸鈉，對丹參酮II A磺酸鈉原料的質量保證具有重要意義。
技術實現思路
本專利技術所要解決的技術問題在于為了克服現有技術中丹參酸甲酯磺酸鈉提純困難、效率低、提取量低的缺陷，提供了丹參酸甲酯磺酸鈉的制備方法和應用。本專利技術的制備方法的制備能力強、制備量大、周期短、純度高、效率高，并且減少了有機溶劑的使用，工藝操作連續性強易于進行質量控制和生產。本專利技術通過以下技術方案解決上述技術問題。本專利技術的丹參酸甲酯磺酸鈉的結構如下式所示:【權利要求】1.一種丹參酸甲酯磺酸鈉的制備方法，其包括下述步驟:采用高效液相反相色譜法分離丹參酮類磺化液，即可； 其中，高效液相反相色譜法的條件如下: 流動相A為0.1%三乙胺-水、流動相B為0.1%三乙胺-甲醇；或，流動相A為0.1% 二乙胺-水、流動相B為0.1% 二乙胺-甲醇；或，流動相A為0.1%氨水、流動相B為甲醇；百分比為組分占流動相的體積百分比；檢測波長為271nm，保留時間為35~50min。2.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述的高效液相反相色譜法包括富集純化、中間純化和精制純化，其中，所述的富集純化的條件如下: 流動相A為0.1%三乙胺-水、流動相B為0.1%三乙胺-甲醇；或，流動相A為0.1% 二乙胺-水、流動相B為0.1% 二乙胺-甲醇；或，流動相A為0.1%氨水、流動相B為甲醇；流速為80~120mL/min，檢測波長為271nm ； 將丹參酮類磺化液與流動相A按體積比為1:4的混合物上樣25min，80%流動相A+20%流動相B平衡lmin，以流動相A和流動相B按照下述體積比進行線性梯度洗脫40min:80%A+20%B — 40%A+60%B，再以100%流動相B再生lOmin，收集保留時間為42~50min的洗脫液得到富集純化樣品溶液； 所述的中間純化的條件如下: 流動相A為0.1%三乙胺-水、流動相B為0.1%三乙胺-甲醇；或，流動相A為0.1% 二乙胺-水、流動相B為0.1% 二乙胺-甲醇；或，流動相A為0.1%氨水、流動相B為甲醇；流速為80~120mL/m in，檢測波長為271nm ； 將所述的富集純化樣品溶液與水按體積比為1:1的混合物上樣10min，80%流動相A+20%流動相B平衡lOmin，以流動相A和流動相B按照下述體積比進行線性梯度洗脫40min:80%A+20%B — 40%A+60%B,再以100%流動相B再生lOmin，收集保留時間為36~44min的洗脫液得到中間純化樣品溶液； 所述的精制純化的條件如下: 流動相A為0.1%三乙胺-水、流動相B為0.1%三乙胺-甲醇；或，流動相A為0.1% 二乙胺-水、流動相B為0.1% 二乙胺-甲醇；或，流動相A為0.1%氨水、流動相B為甲醇；流速為20~30mL/min，檢測波長為271nm ； 將所述的中間純化樣品溶液與水按體積比為1:1的混合物上樣10min，80%流動相A+20%流動相B平衡lOmin，以流動相A和流動相B按照下述體積比進行線性梯度洗脫30min:80%A+20%B — 50%A+50%B,再以100%流動相B再生lOmin，收集保留時間為45~50min的洗脫液得到精制純化樣品溶液。3.如權利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述的富集純化采用的裝置如下:采用PrepStar SD-1制備系統和L&L4002色譜柱，裝PLRP-S反相C18聚合物填料160.0g,動態軸向壓縮系統裝填至壓力650psi，靜態鎖緊至柱床高度25cm ;柱溫為10~30°C ； 和/或，所述的中間純化采用的裝置如下:采用Pr印Star SD-1制備系統和L&L4002色譜柱，裝PLRP-S反相C18聚合物填料160.0g，動態軸向壓縮系統裝填至壓力650psi，靜態鎖緊至柱床高度25cm ;柱溫為10~30°C ; 和/或，所述的精制純化采用的裝置如下:采用PrepStar SD-1制備系統和L&L4001色譜柱，裝反相C18硅本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種丹參酸甲酯磺酸鈉的制備方法，其包括下述步驟：采用高效液相反相色譜法分離丹參酮類磺化液，即可；其中，高效液相反相色譜法的條件如下：流動相A為0.1%三乙胺?水、流動相B為0.1%三乙胺?甲醇；或，流動相A為0.1%二乙胺?水、流動相B為0.1%二乙胺?甲醇；或，流動相A為0.1%氨水、流動相B為甲醇；百分比為組分占流動相的體積百分比；檢測波長為271nm，保留時間為35～50min。

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：洪勇，袁永雷，黃臻輝，
申請(專利權)人：上海第一生化藥業有限公司，
類型：發明
國別省市：上海;31