一種用氣相質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)檢測茶葉中農(nóng)藥殘留的方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)公開了一種用氣相質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)檢測茶葉中農(nóng)藥殘留的方法，將109種農(nóng)藥樣品配置混合標(biāo)準(zhǔn)工作液；氣相-質(zhì)譜聯(lián)用儀配套自動(dòng)進(jìn)樣器參數(shù)設(shè)置；在氣相-質(zhì)譜儀中生成109種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)曲線模型；粉碎后的待測茶葉基體放置于離心管中，制取含有待測茶葉農(nóng)藥殘留的溶液；按照步驟2設(shè)定的氣相-質(zhì)譜儀的參數(shù)，通過步驟3中在氣相-質(zhì)譜儀中生成的109種農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)曲線模型，將步驟6中得到的茶葉農(nóng)藥殘留的溶液在氣相-質(zhì)譜儀中進(jìn)行分析得到檢測結(jié)果。本發(fā)明專利技術(shù)方法能檢測出多達(dá)109種茶葉農(nóng)藥殘留量。與現(xiàn)有技術(shù)相比，該方法凈化效果好、準(zhǔn)確。

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
【專利摘要】本專利技術(shù)公開了，將109種農(nóng)藥樣品配置混合標(biāo)準(zhǔn)工作液；氣相-質(zhì)譜聯(lián)用儀配套自動(dòng)進(jìn)樣器參數(shù)設(shè)置；在氣相-質(zhì)譜儀中生成109種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)曲線模型；粉碎后的待測茶葉基體放置于離心管中，制取含有待測茶葉農(nóng)藥殘留的溶液；按照步驟2設(shè)定的氣相-質(zhì)譜儀的參數(shù)，通過步驟3中在氣相-質(zhì)譜儀中生成的109種農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)曲線模型，將步驟6中得到的茶葉農(nóng)藥殘留的溶液在氣相-質(zhì)譜儀中進(jìn)行分析得到檢測結(jié)果。本專利技術(shù)方法能檢測出多達(dá)109種茶葉農(nóng)藥殘留量。與現(xiàn)有技術(shù)相比，該方法凈化效果好、準(zhǔn)確。【專利說明】
本專利技術(shù)屬于茶葉農(nóng)藥殘留檢測
，涉及。
技術(shù)介紹
茶葉是世界性的飲品，但茶葉中的農(nóng)藥殘留問題嚴(yán)重威脅到了人類健康。為了滿足現(xiàn)實(shí)需求，建立快速、高效、低檢出限的茶葉多農(nóng)殘的檢測方法是十分必要的。目前，關(guān)于同時(shí)測定茶葉中多種農(nóng)殘的方法還比較少。日本、歐盟的標(biāo)準(zhǔn)中也未給出茶葉中多農(nóng)殘同時(shí)檢測的方法。已經(jīng)報(bào)道的多農(nóng)殘的檢測方法多為某一類農(nóng)藥(如有機(jī)磷類、有機(jī)氯、氨基甲酸酯類、擬除蟲菊酯類等)的檢測，檢測項(xiàng)目比較少。近年來研究人員逐漸認(rèn)識(shí)到了多農(nóng)殘檢測的重要性。另外，在現(xiàn)行檢測方法中，提取溶劑甲苯的使用對檢測人員的健康構(gòu)成了較大的威脅。這些均使得綠色、實(shí)用、高效的多農(nóng)殘檢測方法成為一種迫切需要。因?yàn)椴枞~的提取溶劑中雜質(zhì)很多，所以樣品前處理是非常關(guān)鍵的部分，它包括:萃取、分離、凈化、濃縮、定容等步驟。前處理的工作量和誤差來源占到了整個(gè)檢測過程的60%以上(劉韶光，2006)，重點(diǎn)有提取溶劑和輔助提取方式的選擇、凈化方式的選擇等。提取溶劑要盡量少提取雜質(zhì)，同時(shí)要求盡可能地提取出目標(biāo)農(nóng)殘。常用的提取溶劑有乙腈、乙酸乙酯、丙酮及混合提取溶劑(如丙酮-正己烷、丙酮-石油醚等)。乙腈對各種農(nóng)殘?zhí)崛⌒Ч急容^好，提取溶劑雜質(zhì)較少，基質(zhì)干擾小。乙酸乙酯提取時(shí)，大多數(shù)極性農(nóng)藥不能轉(zhuǎn)移到有機(jī)相中，且雜質(zhì)較多。丙酮提取回收率很高，提取雜質(zhì)多，需借助非極性溶劑與水分離。故采用丙酮-正己烷混合溶劑提取，丙酮提取出農(nóng)殘后再轉(zhuǎn)移到正己烷中，可以實(shí)現(xiàn)分層，并減少雜質(zhì)干擾。茶葉中的農(nóng)殘檢測常用的輔助提取方法有超聲法、均質(zhì)法、振蕩法、加速溶劑萃取、微波輔助萃取等。這些方法在茶葉農(nóng)殘檢測中多應(yīng)用廣泛。其中超聲法簡便，適合多個(gè)樣品同時(shí)處理，對植物組織破碎效果好，故此實(shí)驗(yàn)中選用超聲法輔助提取。在茶葉農(nóng)殘的檢測過程中，除常規(guī)干擾物外，揮發(fā)性酯類、茶堿、色素等雜質(zhì)很多，導(dǎo)致茶葉凈化過程要求高。茶葉中農(nóng)殘檢測的凈化方法有固相萃取(SPE )、液液分配、固相微萃取(SPE)、凝膠滲透色譜(GPC)、基質(zhì)固相分散萃取(MSPDE)等。固相萃取法因其方便快速、凈化效果好、節(jié)省溶劑等特點(diǎn)成為目前最常用的凈化方法之一，此實(shí)驗(yàn)即選用固相萃取法凈化。茶葉農(nóng)殘檢測中常用的固相萃取柱中，PSA柱為陰離子極性填料柱，去除脂肪酸效果比較好，但去除色素、留醇、維生素的能力一般。C18柱為非極性填料柱，對非極性組分吸附效果較好，去除脂肪酸、色素的能力一般。TPT茶葉專用柱為三種填料混合柱，既有非極性的石墨化碳，還有陰離子交換填料和極性填料，對茶葉提取溶劑的整體凈化效果較好。實(shí)際多農(nóng)殘檢測中，通常需要對多個(gè)樣品同時(shí)進(jìn)行檢測，在進(jìn)行固相萃取操作時(shí)也可用淋洗劑直接將目標(biāo)物質(zhì)淋洗下來，將雜質(zhì)吸附在固相填料上，以節(jié)省時(shí)間和溶劑，使操作更簡便，這種方法被稱之為逆向固相萃取。目前，在檢測技術(shù)上，氣相色譜和液相色譜技術(shù)是茶葉農(nóng)殘檢測領(lǐng)域中應(yīng)用比較廣泛的兩種方法。但是，由于茶葉提取溶劑很復(fù)雜，雜質(zhì)峰干擾太嚴(yán)重，在氣相色譜和液相色譜分析中，在同一根色譜柱上干擾物與目標(biāo)物的峰重疊的現(xiàn)象經(jīng)常發(fā)生，容易造成假陽性的測定結(jié)果。尤其是在做多農(nóng)殘檢測時(shí)，單一的氣相色譜檢測器根本無法實(shí)現(xiàn)多類農(nóng)殘的同時(shí)檢測。現(xiàn)有的技術(shù)茶葉農(nóng)藥殘留檢測過程復(fù)雜，準(zhǔn)確性不高。而串聯(lián)質(zhì)譜通過選擇性地采集目標(biāo)物質(zhì)的特征離子，可以大大減少干擾物的影響，提高了檢測靈敏度，而且質(zhì)譜又是分析未知化合物結(jié)構(gòu)和物質(zhì)確認(rèn)的有效手段。因此，色譜一質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)在茶葉多農(nóng)殘檢測中受到越來越多的重視。此外新興的毛細(xì)管電泳技術(shù)和生物檢測技術(shù)等，應(yīng)用還較少，正在開發(fā)、推廣階段。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的在提供，主要解決了現(xiàn)有檢測方法檢測農(nóng)藥殘留不夠準(zhǔn)確，檢測的殘留農(nóng)藥種類較少的問題。本專利技術(shù)所采用的技術(shù)方案是按照以下步驟進(jìn)行:步驟1:首先將109種農(nóng)藥樣品配置標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液；步驟2:應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液配置混合標(biāo)準(zhǔn)工作液； 步驟3:氣相-質(zhì)譜聯(lián)用儀配套自動(dòng)進(jìn)樣器參數(shù)設(shè)置；步驟4:在氣相-質(zhì)譜儀中生成109種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)曲線模型；步驟5:粉碎后的待測茶葉基體放置于離心管中，加入IOmL的去離子水，并加入丙酮和正己烷混合液，30°C水浴、IOOHz下超聲震蕩10-60min ；步驟6:震蕩完成后加氯化鈉促進(jìn)分層，離心，再取離心管中上清液于250mL梨形瓶中，于40°C水浴下減壓旋蒸；步驟7:用丙酮正己烷混合液在梨形瓶中分多次溶解完全梨形瓶中產(chǎn)生無懸浮顆粒，溶解后的液體過ProElutPSA柱，用IOOmL梨形瓶接收洗脫液后于40°C水浴減壓旋蒸，繼續(xù)用30-60mL的乙腈:水溶液分多次溶解，溶解后的液體過ProElutC18柱并用真空泵使流速保持在l_2d/s，用SOmL離心管接收洗脫液，加氯化鈉，充分震蕩后離心，取上清液到梨形瓶中，于40°C水浴下，在5kpa壓力下旋蒸，用1:1的丙酮:正己烷定容到2mL，得到含有待測茶葉農(nóng)藥殘留的溶液；步驟8:按照步驟2設(shè)定的氣相-質(zhì)譜儀的參數(shù)，通過步驟3中在氣相-質(zhì)譜儀中生成的109種農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)曲線模型，將步驟6中得到的茶葉農(nóng)藥殘留的溶液在氣相-質(zhì)譜儀中進(jìn)行分析得到檢測結(jié)果。本專利技術(shù)的特點(diǎn)還在于步驟2中氣相-質(zhì)譜聯(lián)用儀配套自動(dòng)進(jìn)樣器參數(shù)設(shè)置按以下設(shè)置:日本島津A0C-20i+S，進(jìn)樣口溫度250.01:，進(jìn)樣量11^，不分流進(jìn)樣；載氣:高純氦氣，初始?jí)毫?00-900Pa，線速度36.8cm/sec,吹掃留量6.0mL/min ;毛細(xì)管色譜柱:DB_5ms柱(30mX0.25mmX0.25um);柱箱溫度:60.(TC ;柱溫升溫程序:60°C保持 2min，以 15°C /min的速率從升至150°C，以I (TC /min的速率從升至200°C，以2°C /min的速率從升至220°C,以25 V /min的速率從升至290°C，保持8min ;離子源溫度200°C ;接口溫度280°C ；溶劑延遲時(shí)間6min。步驟4和步驟6中，丙酮和正己烷混合液中丙酮和正己烷的質(zhì)量比為1:4。本專利技術(shù)方法能檢測出多達(dá)109種茶葉農(nóng)藥殘留量。與現(xiàn)有技術(shù)相比，該方法凈化效果好、準(zhǔn)確。【具體實(shí)施方式】本專利技術(shù)的【具體實(shí)施方式】如下:(I)配置標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液:準(zhǔn)確稱取每種農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)品0.0lOOg左右，加入到IOmL容量瓶內(nèi)，用丙酮溶解定容至刻度，分別制得每種農(nóng)藥濃度為1000mg/L的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，冷藏待用。( 2)配置混合標(biāo)準(zhǔn)工作液:分別將每種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液取出部分置于IOOmL的容量瓶中，配置成濃度均為10mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液，冷藏待用。使用期限為I個(gè)月。(3)設(shè)置儀器參數(shù):氣相-質(zhì)譜聯(lián)用儀配套自動(dòng)進(jìn)樣器參數(shù)設(shè)置按以下設(shè)置:日本島津A0C_20i+S，進(jìn)樣口本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種用氣相質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)檢測茶葉中農(nóng)藥殘留的方法，其特征在于按照以下步驟進(jìn)行：步驟1：首先將109種農(nóng)藥樣品配置標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液；步驟2：應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液配置混合標(biāo)準(zhǔn)工作液；步驟3：氣相?質(zhì)譜聯(lián)用儀配套自動(dòng)進(jìn)樣器參數(shù)設(shè)置；步驟4：在氣相?質(zhì)譜儀中生成109種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)曲線模型；步驟5：粉碎后的待測茶葉基體放置于離心管中，加入10mL的去離子水，并加入丙酮和正己烷混合液，30℃水浴、100Hz下超聲震蕩10?60min；步驟6：震蕩完成后加氯化鈉促進(jìn)分層，離心，再取離心管中上清液于250mL梨形瓶中，于40℃水浴下減壓旋蒸；步驟7：用丙酮正己烷混合液在梨形瓶中分多次溶解完全梨形瓶中產(chǎn)生無懸浮顆粒，溶解后的液體過ProElutPSA柱，用100mL梨形瓶接收洗脫液后于40℃水浴減壓旋蒸，繼續(xù)用30?60mL的乙腈：水溶液分多次溶解，溶解后的液體過ProElutC18柱并用真空泵使流速保持在1?2d/s，用80mL離心管接收洗脫液，加氯化鈉，充分震蕩后離心，取上清液到梨形瓶中，于40℃水浴下，在5kpa壓力下旋蒸，用1:1的丙酮：正己烷定容到2mL，得到含有待測茶葉農(nóng)藥殘留的溶液；步驟8：按照步驟2設(shè)定的氣相?質(zhì)譜儀的參數(shù)，通過步驟3中在氣相?質(zhì)譜儀中生成的109種農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)曲線模型，將步驟6中得到的茶葉農(nóng)藥殘留的溶液在氣相?質(zhì)譜儀中進(jìn)行分析得到檢測結(jié)果。...

【技術(shù)特征摘要】

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：王魯峰，徐婷，潘思軼，徐曉云，
申請(專利權(quán))人：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)，
類型：發(fā)明
國別省市：湖北;42