本發(fā)明專利技術(shù)涉及一種復(fù)合微生物飼料添加劑及其生產(chǎn)方法和用途。該添加劑包括釀酒酵母（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）、植物乳桿菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍ）、干酪乳桿菌干酪亞種（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉｓｕｂｓｐ．ｃａｓｅｉ），經(jīng)過斜面培養(yǎng)、一級種子、二級種子以及混合培養(yǎng)發(fā)酵，實現(xiàn)了復(fù)合菌生物量及其不同菌種配比的最優(yōu)化，復(fù)合添加劑有效活菌數(shù)大于２×１０↑［９］ｃｕｆ／ｍＬ。本發(fā)明專利技術(shù)提供的復(fù)合微生物飼料添加劑，能有效提高飼料利用率和養(yǎng)殖動物機(jī)體免疫能力，減少患病幾率，并且能夠改善養(yǎng)殖動物肉、蛋、奶的品質(zhì)，降低動物飼養(yǎng)成本。
【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
?一種復(fù)合微生物飼料添加劑及其生產(chǎn)方法和用途
本專利技術(shù)涉及一種復(fù)合微生物飼料添加劑、其生產(chǎn)方法以及在作為動物飼料添加劑中的用途。技術(shù)背景微生物飼料添加劑是根據(jù)微生態(tài)平衡理論、微生態(tài)失調(diào)理論、微生態(tài)營養(yǎng)理論和微生態(tài)防治理論選用動物體內(nèi)正常微生物菌株及其生長促進(jìn)物質(zhì)經(jīng)特殊加工工藝而制成的制劑。我國飼料添加劑分為飼料級氨基酸、酶制劑、微生物添加劑、抗氧化劑和穩(wěn)定劑等12類。其中，微生物制劑、酶制劑由于其明顯的使用效果，并且無抗生素、激素和農(nóng)藥殘留，符合當(dāng)前食品安全概念，應(yīng)用日益廣泛。目前，國內(nèi)外微生物飼料添加劑已有品種上市。國外產(chǎn)品有“Probios”“Biomaax40TM”“Primalac”，國內(nèi)品種有“華星寶”“促生康”等。微生物飼料添加劑從菌種存活狀態(tài)可分活菌、滅活菌制劑；從菌種構(gòu)成可分單一菌劑和多菌種復(fù)合菌劑；從劑型上分液體、固體、顆粒劑型，也有少量微囊化包埋制劑。目前國內(nèi)在復(fù)合微生物篩選培養(yǎng)過程中，由于缺乏基本的理論指導(dǎo)以及成熟的生產(chǎn)工藝，對復(fù)合培養(yǎng)的發(fā)酵過程及其各菌群之間的相互作用及其機(jī)理普遍了解甚少，導(dǎo)致產(chǎn)品活菌總數(shù)不能保持一定水平，產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)定，影響了其在使用過程中的效果。-->
技術(shù)實現(xiàn)思路
(一)要解決的技術(shù)問題本專利技術(shù)的目的在于針對上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，公開了一種復(fù)合微生物飼料添加劑，用于動物養(yǎng)殖。本專利技術(shù)還公開了該添加劑的生產(chǎn)方法和用途。(二)技術(shù)方案本專利技術(shù)從大量已知可定植養(yǎng)殖動物體內(nèi)有益菌群中篩選出3種不同屬、種的活性微生物菌種，它們具有較好的協(xié)同共生關(guān)系，本專利技術(shù)篩選出的微生物為釀酒酵母(Saccharomyces?cerevisiae)、植物乳桿菌(Lactobacillus?plantarum)、干酪乳桿菌干酪亞種(Lactobacillus?caseisubsp.casei)。根據(jù)上述篩選結(jié)果，本專利技術(shù)設(shè)計了一種復(fù)合微生物飼料添加劑，包括釀酒酵母1.0×108～5.0×109cfu/mL、植物乳桿菌1.0×108～5.0×1010cfu/mL、干酪乳桿菌干酪亞種1.0×108～4.0×1010cfu/mL。優(yōu)選地，該添加劑包括釀酒酵母3.0×108～1.0×109cfu/mL、植物乳桿菌5.0×108～5.0×109cfu/mL、干酪乳桿菌干酪亞種5.0×108～5.0×109cfu/mL。本專利技術(shù)所述的復(fù)合微生物飼料添加劑的生產(chǎn)方法，包括如下步驟：1).斜面培養(yǎng)：將釀酒酵母、植物乳桿菌、干酪乳桿菌干酪亞種原始菌種無菌條件下分別接種于固體培養(yǎng)基上，將釀酒酵母15～38℃條件下培養(yǎng)2～6天，植物乳桿菌、干酪乳桿菌干酪亞種15～42℃條件下培養(yǎng)1～3天，使菌種活化；2).一級種子培養(yǎng)：將步驟1)培養(yǎng)的菌種無菌條件下分別接種于液-->體培養(yǎng)基，釀酒酵母15～38℃條件下，100～200r/min搖床培養(yǎng)2～6天，植物乳桿菌、干酪乳桿菌干酪亞種15～42℃條件下靜止培養(yǎng)1～3天，單菌種液體培養(yǎng)OD600值3.0-4.0之間時停止培養(yǎng)，制得一級種子；3).二級種子培養(yǎng)：按液體培養(yǎng)基的體積比為5～20％的接種量，將一級種子分別接種于發(fā)酵罐中，釀酒酵母15～38℃條件下，攪拌速度為100～200r/min，通氣量為1∶0.5～1.5，培養(yǎng)2～6天，植物乳桿菌、干酪乳桿菌干酪亞種15～42℃條件下培養(yǎng)1～3天，制得二級種子；4).混合發(fā)酵培養(yǎng)：按液體培養(yǎng)基的體積比為5～20％的接種量，將二級種子接種于發(fā)酵罐中，進(jìn)行高密度發(fā)酵培養(yǎng)，獲得添加劑。其中，步驟1)、2)、3)中釀酒酵母所用的培養(yǎng)基是PDA培養(yǎng)基，植物乳桿菌、干酪乳桿菌干酪亞種所用的培養(yǎng)基是MRS培養(yǎng)基。固態(tài)培養(yǎng)基與液態(tài)培養(yǎng)基的區(qū)別在于固態(tài)培養(yǎng)基在制備過程中添加了適量的瓊脂。其中，步驟4)所用的培養(yǎng)基的配方按質(zhì)量百分比為：糖蜜1～30％、硫酸銨0.5～10％、蛋白胨0.5～5％、碳酸鈣0.5-3％，余量為水；所述的高密度發(fā)酵培養(yǎng)可以采用補(bǔ)料分批培養(yǎng)(FBC)方式，其中補(bǔ)料碳源為：葡萄糖、甘油、蔗糖、糖蜜其中任一種或其混合物；氮源為：硫酸銨、牛肉膏、蛋白胨其中任一種或其混合物。并且，培養(yǎng)過程分階段調(diào)控發(fā)酵pH、溶解氧、攪拌轉(zhuǎn)速和溫度等條件。具體地說發(fā)酵培養(yǎng)過程包括：a、有氧培養(yǎng)階段：起始0～24小時內(nèi)，間隔通氣，保持在有氧條件發(fā)酵，通氣量1∶1～1.5，調(diào)控發(fā)酵溶解氧5～15％，攪拌轉(zhuǎn)速150～200r/min，攪拌間隔時間1～3小時，攪拌1～3分鐘，溫度25～35℃；b、微溶氧和厭氧培養(yǎng)階段：24～96小時，保持發(fā)酵液上層微溶氧狀態(tài)，靜止培養(yǎng)，間隔攪拌，攪拌間隔時間3～5小時，攪拌3～5分鐘，使用碳酸鈣調(diào)節(jié)pH保持穩(wěn)定在3.8～4.5之間，溫度25～35℃。-->本專利技術(shù)所述復(fù)合微生物飼料添加劑可作為飼料添加劑用于動物的飼養(yǎng)。(三)有益效果本專利技術(shù)能有效提高飼料利用率和養(yǎng)殖動物機(jī)體免疫能力，減少患病幾率，并能改善養(yǎng)殖動物肉、蛋、奶的品質(zhì)，降低動物飼養(yǎng)成本。具體實施方式下面結(jié)合實施例對本專利技術(shù)作進(jìn)一步的說明，但不用來限制本專利技術(shù)所要保護(hù)的范圍。實施例1??復(fù)合微生物飼料添加劑的構(gòu)成總菌數(shù)為?????????????????3.9×109cfu/mL釀酒酵母?????????????????8.0×108cfu/mL植物乳桿菌???????????????1.0×109cfu/mL干酪乳桿菌干酪亞種???????2.1×109cfu/mL實施例2??復(fù)合微生物飼料添加劑的構(gòu)成總菌數(shù)為?????????????????2.0×109cfu/mL釀酒酵母?????????????????1.0×109cfu/mL植物乳桿菌???????????????5.0×108cfu/mL干酪乳桿菌干酪亞種???????5.0×108cfu/mL實施例3??復(fù)合微生物飼料添加劑的構(gòu)成總菌數(shù)為?????????????????2.0×1010cfu/mL釀酒酵母?????????????????3.0×108cfu/mL植物乳桿菌???????????????5.0×109cfu/mL-->干酪乳桿菌干酪亞種???????5.0×109cfu/mL實施例4??復(fù)合微生物飼料添加劑的構(gòu)成總菌數(shù)為?????????????????5.0×1010cfu/mL釀酒酵母?????????????????1.0×108cfu/mL植物乳桿菌???????????????5.0×1010cfu/mL干酪乳桿菌干酪亞種???????1.0×108cfu/mL實施例5??復(fù)合微生物飼料添加劑的構(gòu)成總菌數(shù)為?????????????????4.5×1010cfu/mL釀酒酵母?????????????????5.0×109cfu/mL植物乳桿菌???????????????1.0×108cfu/mL干酪乳桿菌干酪亞種???????4.0×1010cfu/mL實施例6??復(fù)合微生物飼料添加劑的生產(chǎn)方法1).斜面培養(yǎng)：將釀酒酵母、植物乳桿菌、干酪乳桿菌干酪亞種原始菌種無菌條件下分別接種于固體培養(yǎng)基上，將釀酒酵母30℃條件下培養(yǎng)3天，植物乳桿菌、干酪乳桿菌干酪亞種37℃條件下培養(yǎng)2天；2).一級種子培養(yǎng)：將步驟1)培養(yǎng)的菌本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點】
一種復(fù)合微生物飼料添加劑，其特征在于該添加劑包括釀酒酵母（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）１．０×１０↑［８］～５．０×１０↑［９］ｃｆｕ／ｍＬ、植物乳桿菌（ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓｐｌａｎｔａｒｕｍ）１．０×１０ ↑［８］～５．０×１０↑［１０］ｃｆｕ／ｍＬ、干酪乳桿菌干酪亞種（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓｃａｓｅｉｓｕｂｓｐ．ｃａｓｅｉ）１．０×１０↑［８］～４．０×１０↑［１０］ｃｆｕ／ｍＬ。
【技術(shù)特征摘要】
1、一種復(fù)合微生物飼料添加劑，其特征在于該添加劑包括釀酒酵母(Saccharomyces?cerevisiae)1.0×108～5.0×109cfu/mL、植物乳桿菌(lactobacillus?plantarum)1.0×108～5.0×1010cfu/mL、干酪乳桿菌干酪亞種(Lactobacillus?casei?subsp.casei)1.0×108～4.0×1010cfu/mL。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)合微生物飼料添加劑，其特征在于該添加劑包括釀酒酵母3.0×108～1.0×109cfu/mL、植物乳桿菌5.0×108～5.0×109cfu/mL、干酪乳桿菌干酪亞種5.0×108～5.0×109cfu/mL。3、根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)合微生物菌劑，其特征在于該添加劑包括釀酒酵母8.0×108cfu/mL、植物乳桿菌1.0×109cfu/mL、干酪乳桿菌干酪亞種2.1×109cfu/mL。4、一種如權(quán)利要求1～3任一項所述的復(fù)合微生物飼料添加劑的生產(chǎn)方法，其特征是包含如下步驟：1).斜面培養(yǎng)：將釀酒酵母、植物乳桿菌、干酪乳桿菌干酪亞種原始菌種在無菌條件下分別接種于固體培養(yǎng)基上，將釀酒酵母15～38℃條件下培養(yǎng)2～6天，植物乳桿菌、干酪乳桿菌干酪亞種15～42℃條件下培養(yǎng)1～3天；2).一級種子培養(yǎng)：將步驟1)培養(yǎng)的菌種在無菌條件下分別接種于液體培養(yǎng)基，釀酒酵母15～38℃條件下，100～200r/min搖床培養(yǎng)2～6天，植物乳桿菌、干酪乳桿菌干酪亞種15～42℃條件下靜止培養(yǎng)1～3天，單菌種液體培養(yǎng)OD600值3.0-4.0之間時停止培養(yǎng)，制得一級種子；3).二級種子培養(yǎng)：按液體培養(yǎng)基的體積比為5～20％的接種量，將一級種子分別接種于發(fā)酵罐中，釀酒酵母15～38℃條件下，攪拌速度為100～200r/min，通氣量為1∶0.5～1.5，培養(yǎng)2～6天，植物乳桿菌、干酪乳桿菌干酪亞種15～42℃條件下培養(yǎng)1～3天，制得二級種子；4).混合發(fā)酵培養(yǎng)：按液體培養(yǎng)基的體積比為5～20％的接種量，將二級種子接種于發(fā)酵罐中，進(jìn)行高密度發(fā)酵培養(yǎng)，獲得添加劑，其中，所述的高密度發(fā)酵培養(yǎng)采用補(bǔ)料分批培養(yǎng)方式，其中補(bǔ)料碳源為：葡萄糖、甘油、蔗糖...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：康文力，金蕊，李季，彭生平，
申請(專利權(quán))人：李季，
類型：發(fā)明
國別省市：11[中國|北京]
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