一種雙色熒光標(biāo)記篩選抗阿霉素心肌毒性活性物質(zhì)的方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)公開了一種雙色熒光標(biāo)記篩選抗阿霉素心肌毒性活性物質(zhì)的方法，包括：取心肌細(xì)胞，加入待篩選物質(zhì)進(jìn)行預(yù)保護(hù)；預(yù)保護(hù)完成后，加入阿霉素進(jìn)行損傷；向損傷后的心肌細(xì)胞中同時(shí)加入具有不同激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)的細(xì)胞膜完整性熒光探針與細(xì)胞核熒光探針，進(jìn)行熒光標(biāo)記；染色完成后采集、分析細(xì)胞熒光圖像，分別計(jì)算待篩選物質(zhì)對(duì)心肌細(xì)胞細(xì)胞膜和細(xì)胞核的保護(hù)率；從待篩選物質(zhì)中篩選出對(duì)心肌細(xì)胞的細(xì)胞膜和細(xì)胞核的保護(hù)率均大于15%的活性物質(zhì)。采用兩種熒光探針同時(shí)標(biāo)記心肌細(xì)胞，從不同的作用機(jī)制出發(fā)考察待篩選物質(zhì)對(duì)心肌細(xì)胞的保護(hù)效果，不僅篩選和評(píng)價(jià)方法具有快速、經(jīng)濟(jì)、高通量、高內(nèi)涵的特點(diǎn)，而且篩選和評(píng)價(jià)結(jié)果更為全面嚴(yán)謹(jǐn)。

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種雙色熒光標(biāo)記篩選抗阿霉素心肌毒性活性物質(zhì)的方法，包括：（1）取心肌細(xì)胞，加入待篩選物質(zhì)進(jìn)行預(yù)保護(hù)；（2）預(yù)保護(hù)完成后，加入阿霉素進(jìn)行損傷；（3）向損傷后的心肌細(xì)胞中同時(shí)加入具有不同激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)的細(xì)胞膜完整性熒光探針與細(xì)胞核熒光探針，進(jìn)行熒光標(biāo)記；（4）染色完成后采集、分析細(xì)胞熒光圖像，分別計(jì)算待篩選物質(zhì)對(duì)心肌細(xì)胞細(xì)胞膜和細(xì)胞核的保護(hù)率；（5）從待篩選物質(zhì)中篩選出對(duì)心肌細(xì)胞的細(xì)胞膜和細(xì)胞核的保護(hù)率均大于15%的活性物質(zhì)。

【技術(shù)特征摘要】

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：程翼宇，趙筱萍，王毅，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：浙江大學(xué)，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：浙江;33