本實用新型專利技術涉及一種磷酸化多肽的純化裝置。該裝置包括純化玻璃管、混懸儀、接收瓶、真空泵、鐵架臺五部分。主要是利用減壓吸入、減壓過濾、砂板截留的原理而設計的。裝置中清洗液和洗脫液入口的設計,能夠快捷吸入溶液,減少了樣品污染的幾率,降低了裝置的磨損和腐蝕,節省了時間;混懸過程采用混懸儀,使該裝置混懸更充分,更有利于磷酸化多肽的純化,提高磷酸化多肽的純化質量和產率;通過減壓過濾實現了對大量樣本的純化,從而解決了化學合成的磷酸化多肽的大量純化的難題。本裝置具有操作方便、快捷、高效、干凈、耐用、適合大量磷酸化多肽純化的特點。(*該技術在2024年保護過期,可自由使用*)
【技術實現步驟摘要】
一種磷酸化多肽的純化裝置
本技術涉及一種磷酸化多肽的純化裝置,屬于化學純化
,具體地說是一種填裝二氧化鈦納米粒子的磷酸化多肽的減壓純化裝置。
技術介紹
蛋白質的磷酸化修飾幾乎調節著生命活動的所有過程,包括細胞的增值、發育和分化、神經活動、肌肉收縮、新陳代謝、腫瘤發生等。對磷酸化的認識有助于我們了解疾病的發生過程。而磷酸化多肽則是體現其母體蛋白磷酸化過程結構變化的最好模型,從而在尋找預防和治療各種疾病的有效藥物方面,具有重大的現實意義,因此磷酸化多肽具有重要研究價值。然而,磷酸化多肽在天然樣本中含量極低,介于其重要的研究價值,從七十年代末期開始,磷酸化多肽的人工合成得到許多化學家的重視。然而,要得到純的單一肽,尤其是制備大量的色譜行為相近的多肽純品,是人工合成并純化多肽的一項重要而又艱巨的環節。近期,二氧化鈦(TiO2)金屬氧化物富集技術得到了人們極大的關注,但目前已報道的用于二氧化鈦分離的裝置都是做成微柱(spin column)、二氧化鈦板(“A novel titaniumdioxide-polydimethylsiloxane plate for phosphopeptide enrichment and massspectrometry analysis”,《Analytica ChimicaActa》,P105-113, 2014 年)、色譜柱(申請號201310253448、200810211727.9)等,這些技術主要在蛋白質組學領域中對生物樣本中的天然磷酸化多肽進行微量相對富集,以便提高磷酸化多肽在質譜中的檢出率,尚停留在微量磷酸化多肽分析水平的純化,操作原理主要基于離心機的離心力或加壓而進行的,目前的裝置尚不能滿足化學合成的磷酸化多肽的大量純化。
技術實現思路
本技術專利是針對化學法合成磷酸化多肽的大量純化的實際需要提供的一種磷酸化多肽的純化裝置。在利用二氧化鈦能特異性吸附磷酸化多肽的基礎上,設計了一種磷酸化多肽的純化裝置,該裝置主要是用減壓吸入和減壓過濾的原理結合20 μ m的砂板使溶液能濾過,但能截留大于20 μ m的物質而設計的。其方案為:一種磷酸化多肽的純化裝置,該裝置包括純化玻璃管1、混懸儀2、接收瓶3、真空泵4、鐵架臺5五部分。其中純化玻璃管包括進樣口 6、清洗液和洗脫液入口 7、儲液室8、清洗液和洗脫液出口 9、進樣口蓋10、孔隙20 μ m的砂板11、三通閥門12 ;儲液室8被孔隙20 μ m的砂板11分割成兩個空間上儲液室和下儲液室;三通閥門12有三個孔隙,孔隙的設置確保當一個孔隙與下儲液室底部的孔隙相通時,另兩個孔隙與清洗液和洗脫液入口 7、清洗液和洗脫液出口 9也同時接通,當無任何孔隙與下儲液室底部的孔隙相通時,其它兩個孔隙也不與清洗液和洗脫液入口 7、清洗液和洗脫液出口 9相通;進樣口蓋10通過內螺紋與儲液室8相連;其中混懸儀2包括轉盤13、電機14、轉速旋鈕15、底座16,純化玻璃管I通過插入轉盤13的圓孔中固定到混懸儀2上,利用混懸儀的旋轉,使純化玻璃管I上下顛倒,達到樣品與二氧化鈦充分接觸吸附、清洗液與樣品充分接觸洗滌、洗脫液與樣品充分接觸洗脫的目的;其中真空泵4與清洗液和洗脫液入口 7相連,清洗液和洗脫液通過減壓便可吸入純化玻璃管的儲液室8 ;其中接收瓶3為設有主口和側口的兩口瓶,主口 17與清洗液和洗脫液出口 9相連,側口 18為帶有閥門的抽氣口。清洗液和洗脫液通過減壓過濾,進入接收瓶3,側口 18閥門主要是調節壓力的。純化操作過程主要包括:上樣操作、洗滌操作、洗脫操作。上樣后磷酸化多肽被吸附到二氧化鈦表面,并隨二氧化鈦一起被孔隙20 μ m的砂板11截留在上儲液室,未被吸附的物質隨溶液濾過20 μ m的砂板11到接收瓶3中;通過洗滌操作,未被吸附的物質,進一步被清洗液洗滌濾過20 μ m的砂板11到接收瓶3中,而磷酸化多肽仍被吸附在二氧化鈦表面,并被孔隙20 μ m的砂板11截留在上儲液室;最后通過洗脫操作,磷酸化多肽溶解到洗脫液中,濾過孔隙20 μ m的砂板11流入接收瓶3中,完成磷酸化多肽的純化。本技術的有益效果是:[0011 ] 1、接收瓶3與清洗液和洗脫液出口 9相連,清洗液和洗脫液通過減壓過濾,進入接收瓶,使清洗和洗脫過程更徹底,而且相比離心力原理,減壓過濾的原理可以去除大容量的清洗液和洗脫液,從而實現化學合成的磷酸化多肽的大量純化。2、采用混懸儀2的旋轉,使純化玻璃管I自動上下顛倒,從而達到樣品與二氧化鈦充分接觸吸附、清洗液與樣品充分接觸洗滌、洗脫液與樣品充分接觸洗脫的目的,相比常用的搖床式平面混搖,該裝置更立體、混懸的更充分、更有利于磷酸化多肽的純化,提高磷酸化多肽的純化質量和產率。3、由于磷酸化多肽的純化過程,需多次洗滌雜質和洗脫樣品,通過真空泵與清洗液和洗脫液入口 7相連,清洗液和洗脫液通過減壓便可吸入純化玻璃管的儲液室8,而不必打開進樣口蓋10,減少了樣品污染的幾率,降低了由于多次旋轉而造成對進樣口蓋10的磨損和腐蝕,操作時間大大節省,從而使磷酸化多肽的純化過程方便快捷、簡單耐用。【附圖說明】圖1為一種磷酸化多肽的純化裝置圖。I為純化玻璃管,其中:6為進樣口、7為清洗液和洗脫液入口、8為儲液室、9為清洗液和洗脫液出口、10為進樣口蓋、11為孔隙20 μ m的砂板、12為三通閥門;3為接收瓶,其中17為主口,18為側口;4為真空泵;5為鐵架臺。圖2為一種磷酸化多肽的純化混懸裝置圖。2為混懸儀,其中13為轉盤、14為電機、15為轉速旋鈕、16為底座。【具體實施方式】下面結合說明書附圖詳細說明本技術【具體實施方式】,一種磷酸化多肽的純化裝置,純化玻璃管1、混懸儀2、接收瓶3、真空泵4、鐵架臺5五部分;其中純化玻璃管包括進樣口 6、清洗液和洗脫液入口 7、儲液室8、清洗液和洗脫液出口 9、進樣口蓋10、孔隙20 μ m的砂板11、三通閥門12 ;儲液室8被孔隙20 μ m的砂板11分割成兩個空間上儲液室和下儲液室,大于20 μ m的物質將被截留在上儲液室,小于20 μ m的物質將濾過20 μ m的砂板11流入下儲液室;三通閥門12有三個孔隙,孔隙的設置確保當,另兩個孔隙與清洗液和洗脫液入口 7、清洗液和洗脫液出口 9同時接通,當無任何孔隙與下儲液室底部的孔隙相通時,其它兩個孔隙也不與清洗液和洗脫液入口 7、清洗液和洗脫液出口 9相通;進樣口蓋10通過內螺紋與儲液室8相連;其中混懸儀2包括轉盤13、電機14、轉速旋鈕15、底座16,純化玻璃管I通過插入轉盤13的圓孔中固定到混懸儀2上;其中真空泵4與清洗液和洗脫液入口 7相連;其中接收瓶3為兩口瓶,主口 17與清洗液和洗脫液出口 9相連,側口 18帶有閥門的抽氣口,通過閥門調節壓力。一種磷酸化多肽的純化裝置使用方法:上樣操作:首先移去進樣口蓋10,并將三通閥門12的三個孔隙旋轉到不與清洗液和洗脫液入口 7、清洗液和洗脫液出口 9相通,將二氧化鈦和磷酸化多肽粗品溶液移取到純化玻璃管儲液室8中,蓋上進樣口蓋10,確保純化玻璃管儲液室8是密封的;之后將純化玻璃管I沿轉盤13的直徑方向固定到混懸儀2上,接通混懸儀2的電源,旋轉轉速旋鈕15,帶動純化玻本文檔來自技高網...
【技術保護點】
一種磷酸化多肽的純化裝置,其特征在于:該裝置包括純化玻璃管(1)、混懸儀(2)、接收瓶(3)、真空泵(4)、鐵架臺(5)五部分;其中純化玻璃管包括進樣口(6)、清洗液和洗脫液入口(7)、儲液室(8)、清洗液和洗脫液出口(9)、進樣口蓋(10)、孔隙20μm的砂板(11)、三通閥門(12);儲液室(8)被孔隙20μm的砂板(11)分割成兩個空間上儲液室和下儲液室;三通閥門(12)有三個孔隙,孔隙的設置確保當一個孔隙與下儲液室底部的孔隙相通時,另兩個孔隙與清洗液和洗脫液入口(7)、清洗液和洗脫液出口(9)也同時接通,而當無任何孔隙與下儲液室底部的孔隙相通時,其它兩個孔隙也不與清洗液和洗脫液入口(7)、清洗液和洗脫液出口(9)相通;進樣口蓋(10)通過內螺紋與儲液室(8)相連;其中混懸儀(2)包括轉盤(13)、電機(14)、轉速旋鈕(15)、底座(16),純化玻璃管(1)通過插入轉盤(13)的圓孔中固定到混懸儀(2)上;其中真空泵(4)與清洗液和洗脫液入口(7)相連;其中接收瓶(3)為設有主口和側口的兩口瓶,主口(17)與清洗液和洗脫液出口(9)相連,側口(18)為帶有閥門的抽氣口。
【技術特征摘要】
1.一種磷酸化多肽的純化裝置,其特征在于:該裝置包括純化玻璃管(I)、混懸儀(2)、接收瓶(3)、真空泵(4)、鐵架臺(5)五部分; 其中純化玻璃管包括進樣口出)、清洗液和洗脫液入口(7)、儲液室(8)、清洗液和洗脫液出口(9)、進樣口蓋(10)、孔隙20μπι的砂板(11)、三通閥門(12);儲液室(8)被孔隙20μπι的砂板(11)分割成兩個空間上儲液室和下儲液室;三通閥門(12)有三個孔隙,孔隙的設置確保當一個孔隙與下儲液室底部的孔隙相通時,另兩個孔隙與清洗液和洗脫液入口(7)、清洗液和洗...
【專利技術屬性】
技術研發人員:隋少卉,蔣志剛,董俊軍,李善茂,項豐順,張鳴,劉基偉,周蕾,
申請(專利權)人:中國人民解放軍防化學院,
類型:新型
國別省市:北京;11
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