一種茜草配方顆粒高效液相色譜指紋圖譜的建立方法及其標準指紋圖譜組成比例

本發明專利技術提供了一種茜草配方顆粒高效液相色譜指紋圖譜的建立方法，以及由此得到的茜草配方顆粒標準指紋圖譜。本發明專利技術的建立方法包括以下步驟：（1）供試品溶液的制備（2）高效液相色譜分析。本發明專利技術方法所獲得的茜草配方顆粒水溶液高效液相色譜標準指紋圖譜共有色譜峰11個，其保留時間分別為6.072min、6.559min、8.087min、9.170min、12.118min、20.988min、29.251min、32.211min、33.189min、38.430min、45.431min。茜草配方顆粒脂溶性成分HPLC標準指紋圖譜共有色譜峰共有9個，其保留時間分別為12.156min、12.832min、14.552min、22.615min、23.291min、25.412min、27.356min、34.383min、37.076min。本發明專利技術供試品制作簡便，色譜條件容易實現，方法的穩定性和重現性好，能有效控制茜草配方顆粒質量，為茜草配方顆粒的質量控制提供參考。

【技術實現步驟摘要】
【專利摘要】本專利技術提供了一種茜草配方顆粒高效液相色譜指紋圖譜的建立方法，以及由此得到的茜草配方顆粒標準指紋圖譜。本專利技術的建立方法包括以下步驟：（1）供試品溶液的制備（2）高效液相色譜分析。本專利技術方法所獲得的茜草配方顆粒水溶液高效液相色譜標準指紋圖譜共有色譜峰11個，其保留時間分別為6.072min、6.559min、8.087min、9.170min、12.118min、20.988min、29.251min、32.211min、33.189min、38.430min、45.431min。茜草配方顆粒脂溶性成分HPLC標準指紋圖譜共有色譜峰共有9個，其保留時間分別為12.156min、12.832min、14.552min、22.615min、23.291min、25.412min、27.356min、34.383min、37.076min。本專利技術供試品制作簡便，色譜條件容易實現，方法的穩定性和重現性好，能有效控制茜草配方顆粒質量，為茜草配方顆粒的質量控制提供參考。【專利說明】一種茜草配方顆粒高效液相色譜指紋圖譜的建立方法及其標準指紋圖譜
本專利技術涉及一種中藥配方顆粒指紋圖譜的建立方法，特別是茜草配方顆粒高效液相色譜指紋圖譜的建立方法，以及由此方法所得到的茜草配方顆粒標準指紋圖譜，屬于藥物分析
中。
技術介紹
茜草配方顆粒是通過對中藥茜草進行提取、濃縮、制粒所得。茜草為茜草科植物茜草Rubia cordifolia L.的干燥根和根莖,主產于安徽、江蘇、山東、河南、陜西。春、秋二季采挖，除去泥沙，干燥。茜草性味苦寒，歸肝經，用于涼血、祛瘀、止血、通經，主治吐血、衄血、崩漏、外傷出血、瘀阻經閉、關節痹痛、跌撲腫痛。臨床包括茜草和茜草炭的使用。 《中國藥典》2010年版對茜草的質量控制包括原植物品種、藥材性狀、理化鑒別、含量測定等項目，文獻也對茜草中化學成分進行闡述，包括茜草素、羥基茜草素等蒽醌及其苷類，大葉茜草素，茜草內酯等萘醌及其苷類，環己肽類，三萜類，多糖等成分，但是對于茜草配方顆粒這樣有效成分類型多、組分復雜的中藥制劑，僅測定某類成分的含量，難以客觀、有效地評價或控制藥材的質量。 中藥指紋圖譜是指某些中藥材或中藥制劑經適當處理后，采用一定的分析手段，得到的能夠標示其化學特征的色譜圖或光譜圖。中藥指紋圖譜是一種綜合的，可量化的鑒定手段，它是建立在中藥化學成分系統研究的基礎上，主要用于評價中藥材以及中藥制劑半成品質量的真實性、優良性和穩定性。色譜指紋圖譜技術作為一種多組分復雜樣品的有效質量控制方法，能夠反映出待測樣品的整體性、特征性，目前已被廣泛用于中草藥及其各種制劑的質量控制。目前，中藥指紋圖譜技術已涉及眾多方法，由于高效液相色譜(HPLC)具有分離效能高、選擇性高、檢測靈敏度高、分析速度快、應用范圍廣等特點，且中藥成分絕大多數可在高效液相色譜儀上進行分析檢測，因此高效液相色譜法已成為中藥指紋圖譜技術的首選方法。但目前還未見有利用高效液相色譜(HPLC)方法對茜草配方顆粒指紋圖譜進行測試和分析的報道。
技術實現思路
本專利技術的目的是提供一種茜草配方顆粒高效液相色譜指紋圖譜的建立方法，以及由此方法所得到的茜草配方顆粒標準指紋圖譜，該方法及圖譜可提供一種能有效控制茜草配方顆粒質量的方法，為茜草配方顆粒的質量控制提供參考。 為實現上述目的，本專利技術的技術方案如下:一種茜草配方顆粒高效液相色譜指紋圖譜的建立方法，包括如下步驟:(I)供試品溶液的制備:取茜草配方顆粒置于具塞錐形瓶中，加入蒸餾水溶解，搖勻，濾過，取續濾液，即得茜草配方顆粒水溶液；移取茜草配方顆粒水溶液至分液漏斗中，加乙酸乙酯振搖提取后，合并乙酸乙酯液，置蒸發皿中蒸干，殘渣加甲醇溶解，轉移至量瓶中，加甲醇定容，搖勻，濾過，取續濾液，即得茜草配方顆粒脂溶性成分溶液；(2)高效液相色譜分析:將供試品溶液注入高效液相色譜分析儀進行高效液相色譜測定，得到指紋圖譜，色譜分析條件為:色譜柱為綠百草Ecosil 120-5-C18 AQ Plus,4.6mmX250mm,5ym ;檢測波長250nm ;流動相為甲醇-0.05%磷酸水，梯度洗脫，流速為 0.9-1.lmL/min ;其中,梯度洗脫具體程序如下:a、茜草配方顆粒水溶液的梯度洗脫程序為:0?20 min:甲醇濃度由5%勻速增加至30%， 20?25 min:甲醇濃度由30%勻速增加至50%， 25?40 min:甲醇濃度由50%勻速增加至70%， 40^60 min:甲醇濃度由70%勻速增加至100%， 60?70 min:甲醇濃度保持在100% ；b、茜草配方顆粒脂溶性成分溶液的梯度洗脫程序為:(TlO min:甲醇濃度由5%勻速增加至50%， 10^60 min:甲醇濃度由50%勻速增加至100%， 60?70 min:甲醇濃度保持在100%。 本專利技術最優的技術方案為采用如下步驟:(1)供試品溶液的制備:取茜草配方顆粒0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入蒸餾水20mL，溶解，搖勻，濾過，取續濾液，即得茜草配方顆粒水溶液；精密移取茜草配方顆粒水溶液1ml，移入分液漏斗中，加乙酸乙酯振搖提取3次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，置蒸發皿中蒸干，殘渣加甲醇溶解，轉移至5mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得茜草配方顆粒脂溶性成分溶液；(2)高效液相色譜分析:將供試品溶液注入高效液相色譜分析儀進行高效液相色譜測定，得到指紋圖譜，色譜分析條件為:色譜柱為綠百草Ecosil 120-5-C18 AQ Plus,4.6mmX250mm,5ym ;檢測波長250nm ;流動相為甲醇-0.05%磷酸水，梯度洗脫，流速為lmL/min ;其中，梯度洗脫具體程序如下:a、茜草配方顆粒水溶液的梯度洗脫程序為:(Γ20 min:甲醇濃度由5%勻速增加至30%， 20?25 min:甲醇濃度由30%勻速增加至50%， 25?40 min:甲醇濃度由50%勻速增加至70%， 40^60 min:甲醇濃度由70%勻速增加至100%， 60?70 min:甲醇濃度保持在100% ；b、茜草配方顆粒脂溶性成分溶液的梯度洗脫程序為:(TlO min:甲醇濃度由5%勻速增加至50%， 10^60 min:甲醇濃度由50%勻速增加至100%， 60?70 min:甲醇濃度保持在100%。 采用上述最優的技術方案所得到的茜草配方顆粒水溶液HPLC標準指紋圖譜共有色譜峰11個，其保留時間分別為I號峰6.072 min、2號峰6.559 min、3號峰8.087 min,4號峰 9.170 min,5 號峰 12.118 min,6 號峰 20.988 min,7 號峰 29.251 min,8 號峰 32.211min、9號峰33.189 min、10號峰38.430 min、11號峰45.431 min ;所得到的菌草配方顆粒月旨溶性成分HPLC標準指紋圖譜共有色譜峰共有9個，其保留時間分別為I號峰12.156min、2號峰 12.832min、3 號峰 14.552min、4 號峰 22.615min、5 號峰 23.291min、6 號峰 25.412m本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種茜草配方顆粒高效液相色譜指紋圖譜的建立方法，其特征在于：包括如下步驟：（1）供試品溶液的制備：取茜草配方顆粒置于具塞錐形瓶中，加入蒸餾水溶解，搖勻，濾過，取續濾液，即得茜草配方顆粒水溶液；移取茜草配方顆粒水溶液至分液漏斗中，加乙酸乙酯振搖提取后，合并乙酸乙酯液，置蒸發皿中蒸干，殘渣加甲醇溶解，轉移至量瓶中，加甲醇定容，搖勻，濾過，取續濾液，即得茜草配方顆粒脂溶性成分溶液；（2）高效液相色譜分析：將供試品溶液注入高效液相色譜分析儀進行高效液相色譜測定，得到指紋圖譜，色譜分析條件為：色譜柱為綠百草Ecosil?120?5?C18?AQ?Plus，4.6mm×250mm，5μm；檢測波長250nm；流動相為甲醇?0.05%磷酸水，梯度洗脫，流速為0.9?1.1mL/min；其中，梯度洗脫具體程序如下：a、茜草配方顆粒水溶液的梯度洗脫程序為：0~20?min：甲醇濃度由5%勻速增加至30%，20~25?min：甲醇濃度由30%勻速增加至50%，25~40?min：甲醇濃度由50%勻速增加至70%，40~60?min：甲醇濃度由70%勻速增加至100%，60~70?min：甲醇濃度保持在100%；b、茜草配方顆粒脂溶性成分溶液的梯度洗脫程序為：0~10?min：甲醇濃度由5%勻速增加至50%，10~60?min：甲醇濃度由50%勻速增加至100%，60~70?min：甲醇濃度保持在100%。...

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：潘華峰，嚴萍，嚴艷，趙自明，
申請(專利權)人：潘華峰，廣東一方制藥有限公司，
類型：發明
國別省市：廣東;44