一種復合芽孢菌劑及其制備方法和應用技術

本發明專利技術公開了一種復合芽孢菌劑及其制備方法和應用。本發明專利技術保護甲基營養化芽孢桿菌(Bacillus?methylotrophicus)LPL-117。本發明專利技術還保護一種復合菌劑，包括甲基營養化芽孢桿菌LPL-117、解淀粉芽孢桿菌LPL-K13、解淀粉芽孢桿菌LPL-K103、蠟狀芽孢桿菌LPL-NKY和膠凍樣類芽孢桿菌LPL-HYZ。本發明專利技術還保護所述復合菌劑在促進植物生長和/或抑制植物病原菌和/或防治植物發生植物病原菌侵染引起的相關疾病中的應用。本發明專利技術對于植物病原菌引起的相關疾病的防治具有重大價值，對于植物的栽培，特別是經濟植物的栽培具有重大應用價值。

【技術實現步驟摘要】
一種復合芽孢菌劑及其制備方法和應用
本專利技術涉及一種復合芽孢菌劑及其制備方法和應用。
技術介紹
長期以來我國農業增產主要依靠大量化學肥料和農藥的投入，不合理施用化肥和農藥引起的農業生態環境問題日漸嚴重。近些年,隨著人們保護環境意識的增強及對無公害農產品的日益重視,新技術、新產品研發不斷深入,探尋新的生物肥源和生物防治以替代或部分替代化肥和農藥的研究倍受關注。芽孢桿菌是土壤和植物微生態區系的優勢生物種群，因其能夠產生耐熱、耐旱、抗紫外線和有機溶劑的芽孢，加之易制成粉劑，便于貯藏運輸，利于實現大規模生產，所以是理想的植物促生菌篩選對象。芽孢桿菌通過成功定殖至植物根際體表或體內與病原菌競爭植物周圍的營養、分泌抗菌物質以抑制病原菌生長、同時誘導植物防御系統抵御病原菌入侵，從而達到生防的目的。目前，利用單一微生物防治植物病害和促進植物生長的報道較多，但是單一菌株作用機制單一，受環境影響較大。通過促生菌復配可實現多菌株間的優勢互補與協同作用，增強其在自然環境中的適應性、競爭力及存活率，充分發揮其促生和生防效果，但目前針對多功能復合芽孢菌劑的研究較少。
技術實現思路
本專利技術的目的是提供一種復合芽孢菌劑及其制備方法和應用。本專利技術保護甲基營養化芽孢桿菌(Bacillusmethylotrophicus)LPL-117。甲基營養化芽孢桿菌(Bacillusmethylotrophicus)LPL-117已于2013年6月19日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱CGMCC，地址為：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所)，保藏登記號為CGMCCNO.7749。甲基營養化芽孢桿菌(Bacillusmethylotrophicus)LPL-117簡稱甲基營養化芽孢桿菌LPL-117。本專利技術還保護一種復合菌劑，包括甲基營養化芽孢桿菌LPL-117、解淀粉芽孢桿菌(Bacillusamyloliquefaciens)LPL-K13、解淀粉芽孢桿菌(Bacillusamyloliquefaciens)LPL-K103、蠟狀芽孢桿菌(Bacilluscereus)LPL-NKY和膠凍樣類芽孢桿菌(Paenibacillusmucilaginosus)LPL-HYZ。所述復合菌劑中，以上各個菌株可以獨立包裝，也可以混合包裝。解淀粉芽孢桿菌(Bacillusamyloliquefaciens)LPL-K13已于2013年6月19日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱CGMCC，地址為：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所)，保藏登記號為CGMCCNO.7748。解淀粉芽孢桿菌(Bacillusamyloliquefaciens)LPL-K13簡稱解淀粉芽孢桿菌LPL-K13。解淀粉芽孢桿菌(Bacillusamyloliquefaciens)LPL-K103已于2013年6月19日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱CGMCC，地址為：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所)，保藏登記號為CGMCCNO.7747。解淀粉芽孢桿菌(Bacillusamyloliquefaciens)LPL-K103簡稱解淀粉芽孢桿菌LPL-K103。蠟狀芽孢桿菌(Bacilluscereus)LPL-NKY已于2013年6月19日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱CGMCC，地址為：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所)，保藏登記號為CGMCCNO.7761。蠟狀芽孢桿菌(Bacilluscereus)LPL-NKY簡稱蠟狀芽孢桿菌LPL-NKY。膠凍樣類芽孢桿菌(Paenibacillusmucilaginosus)LPL-HYZ已于2013年6月19日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱CGMCC，地址為：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所)，保藏登記號為CGMCCNO.7750。膠凍樣類芽孢桿菌(Paenibacillusmucilaginosus)LPL-HYZ簡稱膠凍樣類芽孢桿菌LPL-HYZ。所述復合菌劑中，甲基營養化芽孢桿菌LPL-117、解淀粉芽孢桿菌LPL-K13、解淀粉芽孢桿菌LPL-K103、蠟狀芽孢桿菌LPL-NKY和膠凍樣類芽孢桿菌LPL-HYZ的配比具體為3.2×1010cfu：2.4×1010cfu：1.8×1010cfu：7.8×1010cfu：1.3×1010cfu。所述復合菌劑中，甲基營養化芽孢桿菌LPL-117、解淀粉芽孢桿菌LPL-K13、解淀粉芽孢桿菌LPL-K103、蠟狀芽孢桿菌LPL-NKY和膠凍樣類芽孢桿菌LPL-HYZ的配比具體為4.1×1010cfu：3.7×1010cfu：2.9×1010cfu：5.8×1010cfu：1.0×1010cfu。本專利技術還保護所述復合菌劑在促進植物生長和/或抑制植物病原菌和/或防治植物發生植物病原菌侵染引起的相關疾病中的應用。所述植物可為黃瓜或番茄，具體可為黃瓜中農6號或番茄中雜9號。所述植物病原菌可為立枯絲核菌、尖孢鐮刀菌或辣椒疫霉。所述植物病原菌具體可為立枯絲核菌(Rhizoctoniasolani)：ACCC36124。尖孢鐮刀菌(Fusariumoxysporum)：ACCC37438。辣椒疫霉(Phytophthoracapsisi)：ACCC37300。本專利技術還保護甲基營養化芽孢桿菌LPL-117、解淀粉芽孢桿菌LPL-K13、解淀粉芽孢桿菌LPL-K103、蠟狀芽孢桿菌LPL-NKY和膠凍樣類芽孢桿菌LPL-HYZ在制備復合菌劑中的應用。所述復合菌劑的用途為促進植物生長和/或抑制植物病原菌和/或防治植物發生植物病原菌侵染引起的相關疾病。所述植物可為黃瓜或番茄，具體可為黃瓜中農6號或番茄中雜9號。所述植物病原菌可為立枯絲核菌、尖孢鐮刀菌或辣椒疫霉。所述植物病原菌具體可為立枯絲核菌(Rhizoctoniasolani)：ACCC36124。尖孢鐮刀菌(Fusariumoxysporum)：ACCC37438。辣椒疫霉(Phytophthoracapsisi)：ACCC37300。本專利技術還保護一種復合芽孢桿菌菌肥，其制備方法包括如下步驟：(1)將甲基營養化芽孢桿菌LPL-117、解淀粉芽孢桿菌LPL-K13、解淀粉芽孢桿菌LPL-K103、蠟狀芽孢桿菌LPL-NKY和膠凍樣類芽孢桿菌LPL-HYZ分別進行如下操作：①將菌接種至培養基甲，使發酵體系中的初始菌濃度為107cfu/mL，30℃、通氣保壓0.05MPa、160rpm振蕩培養36h；②完成步驟①后，取整個體系，按10％體積比的接種量轉接至培養基乙，混勻后30℃靜置培養5天，然后風干至含水量為10％以下(具體可為8％)，粉碎，得到各個固態發酵物；所述培養基甲(pH6.5-7.0)的組成如下：2％質量比的蔗糖、2％質量比的酵母浸膏、1.5％質量比的牛肉浸膏、0.06％質量比的MgSO4·7H2O、0.0009％質量比的FeSO4·7H2O，余量為水；所述培養基乙(自然pH，含水量為40％)的組成如下：40％質量比的米糠、30％本文檔來自技高網...

【技術保護點】
甲基營養化芽孢桿菌(Bacillus?methylotrophicus)LPL?117，其保藏編號為CGMCC?NO.7749。

【技術特征摘要】
1.甲基營養化芽孢桿菌(Bacillusmethylotrophicus)LPL-117，其保藏編號為CGMCCNO.7749。2.一種復合菌劑，包括甲基營養化芽孢桿菌(Bacillusmethylotrophicus)LPL-117、解淀粉芽孢桿菌(Bacillusamyloliquefaciens)LPL-K13、解淀粉芽孢桿菌(Bacillusamyloliquefaciens)LPL-K103、蠟狀芽孢桿菌(Bacilluscereus)LPL-NKY和膠凍樣類芽孢桿菌(Paenibacillusmucilaginosus)LPL-HYZ；所述甲基營養化芽孢桿菌(Bacillusmethylotrophicus)LPL-117的保藏編號為CGMCCNO.7749；所述解淀粉芽孢桿菌(Bacillusamyloliquefaciens)LPL-K13的保藏編號為CGMCCNO.7748；所述解淀粉芽孢桿菌(Bacillusamyloliquefaciens)LPL-K103的保藏編號為CGMCCNO.7747；所述蠟狀芽孢桿菌(Bacilluscereus)LPL-NKY的保藏編號為CGMCCNO.7761；所述膠凍樣類芽孢桿菌(Paenibacillusmucilaginosus)LPL-HYZ的保藏編號為CGMCCNO.7750。3.權利要求2所述復合菌劑在促進植物生長和/或抑制植物病原菌和/或防治植物發生植物病原菌侵染引起的相關疾病中的應用；所述植物病原菌為立枯絲核菌(Rhizoctoniasolani)、尖孢鐮刀菌(Fusariumoxysporum)或辣椒疫霉(Phytophthoracapsici)。4.甲基營養化芽孢桿菌(Bacillusmethylotrophicus)LPL-117、解淀粉芽孢桿菌(Bacillusamyloliquefaciens)LPL-K13、解淀粉芽孢桿菌(Bacillusamyloliquefaciens)LPL-K103、蠟狀芽孢桿菌(Bacilluscereus)LPL-NKY和膠凍樣類芽孢桿菌(Paenibacillusmucilaginosus)LPL-HYZ在制備復合菌劑中的應用；所述甲基營養化芽孢桿菌(Bacillusmethylotrophicus)LPL-117的保藏編號為CGMCCNO.7749；所述解淀粉芽孢桿菌(Bacillusamyloliquefaciens)LPL-K13的保藏編號為CGMCCNO.7748；所述解淀粉芽孢桿菌(Bacillusamyloliquefaciens)LPL-K103的保藏編號為CGMCCNO.7747；所述蠟狀芽孢桿菌(Bacilluscereus)LPL-NKY的保藏編號為CGMCCNO.7761；所述膠凍樣類芽孢桿菌(Paenibacillusmucilaginosus)LPL-HYZ的保藏編號為CGMCCNO.7750。5.一種復合芽孢桿菌菌肥，其制備方法包括如下步驟：(1)將甲基營養化芽孢桿菌(Bacillusmethylotrophicus)LPL-117、解淀粉芽孢桿菌(Bacillusamyloliquefaciens)LPL-K13、解淀粉芽孢桿菌(Bacillusamyloliquefaciens)LPL-K103、蠟狀芽孢桿菌(Bacilluscereus)LPL-NKY和膠凍樣類芽孢桿菌(Paenibacillusmucilaginosus)LPL-HYZ分別進行如下操作：①將菌接種至培養基甲，使發酵體系中的初始菌濃度為107cfu/mL，30℃、通氣保壓0.05MPa、160rpm振蕩培養36h；②完成步驟①后，取整個體系，按10％體積比的接種量轉接至培養基乙，混勻后30℃靜置培養5天，然后風干至含水量為10％以下，粉碎...

【專利技術屬性】
技術研發人員：李平蘭，韓玉竹，尚慶茂，王洋，游成真，張寶，張志剛，褚群，
申請(專利權)人：中國農業大學，
類型：發明
國別省市：北京;11