實時PCR檢測單核苷酸多態(tài)性的方法及其應(yīng)用技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)提供了一種實時PCR檢測單核苷酸多態(tài)性的方法，其中PCR中采用的聚合酶為具有瓣狀核酸內(nèi)切酶活性的聚合酶；采用的熒光探針的5’端修飾有第一熒光基團、3’端修飾第二熒光基團；且熒光探針具有與待測核酸單核苷酸多態(tài)性位點的堿基互補的對應(yīng)堿基，該對應(yīng)堿基沿5’往3’方向的下一個堿基上標(biāo)記有淬滅基團；熒光探針的5’端至所述對應(yīng)堿基的序列與待測核酸非互補。本發(fā)明專利技術(shù)的方法設(shè)計能夠形成瓣狀結(jié)構(gòu)的熒光探針進行特異性的熒光標(biāo)記，并結(jié)合具有瓣狀核酸內(nèi)切酶活性的聚合酶，據(jù)所實時PCR測得的熒光的強度，即可判斷核酸樣本中的目標(biāo)核酸的SNP位點上的堿基的類型；可準(zhǔn)確地區(qū)分SNP位點上的不同堿基，大大地提高了進行SNP檢測的準(zhǔn)確性。

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】

【技術(shù)保護點】
一種實時PCR檢測單核苷酸多態(tài)性的方法，其特征在于，PCR過程中包括的聚合酶和熒光探針如下：所述聚合酶為具有瓣狀核酸內(nèi)切酶活性的聚合酶；所述熒光探針的5’端修飾有第一熒光基團、3’端修飾第二熒光基團；且所述熒光探針具有與待測核酸中單核苷酸多態(tài)性位點的堿基互補的對應(yīng)堿基，所述對應(yīng)堿基沿5’往3’方向的下一個堿基上標(biāo)記有淬滅基團；所述熒光探針的5’端至所述對應(yīng)堿基的序列與待測核酸非互補。

【技術(shù)特征摘要】

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：羅曉騰，郭永超，廖玉聲，
申請(專利權(quán))人：深圳聯(lián)合醫(yī)學(xué)科技有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：廣東;44