當前發(fā)明專利技術(shù)涉及用于在液體樣品中觀察、分析和/或分離對象的流式細胞術(shù)系統(tǒng)和方法，其包括數(shù)字全息顯微鏡(DHM)和至少一個流體系統(tǒng)，其中，所述DHM包括照明裝置、干涉儀系統(tǒng)和數(shù)字記錄裝置，其中，所述流體系統(tǒng)能夠引導(dǎo)所述對象通過所述DHM的照明裝置的照明光束，其中，所述流體系統(tǒng)包括用于引起通過所述流體系統(tǒng)的液體樣品流的機構(gòu)，其中，優(yōu)選地，所述流體系統(tǒng)包括用于在所述流體系統(tǒng)內(nèi)控制液體樣品流的橫向尺寸的流大小控制設(shè)備，優(yōu)選地，所述流大小控制設(shè)備能夠在所述液體樣品流中將對象逐個地或一次多個地排開。
【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
【國外來華專利技術(shù)】【專利摘要】當前專利技術(shù)涉及用于在液體樣品中觀察、分析和/或分離對象的流式細胞術(shù)系統(tǒng)和方法，其包括數(shù)字全息顯微鏡(DHM)和至少一個流體系統(tǒng)，其中，所述DHM包括照明裝置、干涉儀系統(tǒng)和數(shù)字記錄裝置，其中，所述流體系統(tǒng)能夠引導(dǎo)所述對象通過所述DHM的照明裝置的照明光束，其中，所述流體系統(tǒng)包括用于引起通過所述流體系統(tǒng)的液體樣品流的機構(gòu)，其中，優(yōu)選地，所述流體系統(tǒng)包括用于在所述流體系統(tǒng)內(nèi)控制液體樣品流的橫向尺寸的流大小控制設(shè)備，優(yōu)選地，所述流大小控制設(shè)備能夠在所述液體樣品流中將對象逐個地或一次多個地排開。【專利說明】有數(shù)字全息顯微鏡的流式細胞儀
本專利技術(shù)屬于使用數(shù)字全息顯微鏡(DHM)在液體樣品中觀察、測量、分析和/或分離對象的
，所述對象包括生物有機體和非生物對象、雜質(zhì)、污染物，或其任意組合，所述生物有機體諸如細胞、細菌、酵母、微生物、線蟲。更特別地，公開了一種系統(tǒng)，其中所述對象流動通過在流式細胞術(shù)設(shè)置中的DHM反應(yīng)器的照明光束，其中對象可以被觀察、測量、分析、分類和可能地根據(jù)其由DHM所觀察到的特性而分離。
技術(shù)介紹
流式細胞術(shù)(Flow cytometry)是通過將它們懸浮在流體的流中并將它們通過電子探測裝置而用于計數(shù)和檢查微觀粒子的技術(shù)，所述微觀粒子諸如細胞和染色體。它允許高達每秒數(shù)千顆粒的物理和/或化學(xué)特性的同時多參數(shù)分析。流式細胞術(shù)經(jīng)常地用在特別是血癌的健康失調(diào)的診斷中，但在研究和臨床實踐中都有許多其它應(yīng)用。常見的變化是基于它們的性質(zhì)而物理地分選粒子，以便純化所關(guān)注的群體。 熒光活性細胞分選是一種特殊類型的流式細胞術(shù)。基于每個細胞的特定光散射和熒光特性，它提供了用于一次一個細胞地分選生物細胞的異質(zhì)混合物到兩個或更多的容器中的方法。因為它提供了來自單個細胞的熒光信號的客觀和定量的記錄以及特別感興趣的細胞的物理分離，它是有用的科學(xué)儀器。細胞懸浮液被夾帶在窄的、快速流動的液體流的中心中。所述流動被布置成使得在細胞之間相對于其直徑有較大的間隔。振動結(jié)構(gòu)導(dǎo)致細胞流斷裂成單個液滴。所述系統(tǒng)被調(diào)整，使得每滴有多于一個細胞的概率很低。就在所述流斷裂成液滴之前，所述流動通過每個感興趣細胞的熒光性質(zhì)被測量的熒光測量站。電充電環(huán)剛好放置在所述流斷裂成液滴的點上。電荷基于所述即刻前的熒光強度測量而被放置在所述環(huán)上，并且由于液滴從流斷裂，相反的電荷被截留在所述液滴上。所述帶電液滴然后掉落通過靜電偏轉(zhuǎn)系統(tǒng)，所述系統(tǒng)基于它們的電荷轉(zhuǎn)移液滴到容器內(nèi)。在某些系統(tǒng)中，電荷被直接地施加到流，并且斷裂的液滴保留與流符號相同的電荷。所述流然后在液滴斷裂之后返回到中性。 流式細胞術(shù)由此可用于在液體樣品中分析對象和將對象從其它分離。其中，一般通過使用對象的低密度懸浮液和在窄流中或在小液滴中對象液體被允許向下掉落的液滴形噴嘴，對象懸浮在液體中并且逐個排開。所述窄流在照明裝置前通過，所述照明裝置一般是激光束或熒光激活光。所述激光束可以從對象散射，或者如果這些對象已經(jīng)標有熒光標記物，照明裝置能夠在對象中誘導(dǎo)熒光。基于觀察到的散射和/或熒光響應(yīng)的光，可以得到關(guān)于單獨地掃描的對象的信息。此信息可以進一步用于從所述束中分離此對象。至此，電荷可以被誘導(dǎo)在對象或其中所述對象懸浮的液滴上，并且然后可以通過施加靜電場將對象從所述流中移除。由于測量裝置通常能夠一次一個地獲得關(guān)于對象的信息，在現(xiàn)有的流式細胞術(shù)中重要的是，當它們通過測量裝置時，諸如對象的微觀粒子在液體流中逐個排開。 美國專利7463366公開了一種用三維顯微技術(shù)獲得樣品的方法和設(shè)備，特別是厚的生物樣品和由樣品發(fā)出的熒光場。一個實施例包括獲得試樣的干涉信號，獲取從試樣發(fā)出的熒光信號，記錄這些信號，和處理這些信號，以便重建試樣的和由試樣發(fā)出的熒光場的在給定時間的三維圖像。另一實施例包括數(shù)字全息顯微鏡、照射樣品的熒光激發(fā)源，其中所述顯微鏡和熒光激發(fā)源結(jié)合以獲得試樣的干涉信號并且獲得由試樣發(fā)出的熒光信號，用于記錄所述干涉信號和熒光信號的裝置，以及用于處理所述干涉信號和熒光信號以便重建試樣的和從試樣發(fā)出的熒光場的在給定時間的三維圖像。 專利申請W02004102111公開了一種緊湊的顯微鏡，所述顯微鏡能夠以數(shù)字全息的方式工作用于獲得樣品的高質(zhì)量3D圖像，所述樣品包括熒光樣品和相對較厚的樣品，如生物樣品，所述顯微鏡包括用于照射要研究的樣品的至少部分地空間相干的照明裝置，和用于從所述樣品在電子成像設(shè)備的傳感器上產(chǎn)生干涉光束的差分干涉儀，所述干涉儀包括用于以限定的角度相對于其他的傾斜一個干涉光束的即傾斜裝置(namely tiltingmeans)，所述傾斜導(dǎo)致所述干涉光束在電子成像裝置的傳感器上的限定偏移，所述偏移比各光束的空間相干寬度小，所述顯微鏡能夠被準完全地獨立與樣品地預(yù)先調(diào)整，使得需要用于獲得樣品的可靠3D圖像的額外調(diào)整最小化。 流體動力聚焦是被例如微生物學(xué)家使用以從流式細胞儀或庫爾特計數(shù)器(Coulter counters)提供更準確的結(jié)果用于例如確定細菌或細胞的大小的技術(shù)。隨著它們被迫通過小的隧道，引起激光束或電流中的中斷，細胞被計數(shù)。這些中斷由儀器進行分析。由于直徑必須在微米的量級，而隧道的長度應(yīng)超過幾個毫米，難以使用普通的制造工藝創(chuàng)建用于此目的的足夠窄的通道。利用流體動力學(xué)的效應(yīng)，流體動力聚焦通過用流體建立隧道的壁解決了這個問題。利用由玻璃或塑料制成的寬的(幾百微米的直徑)管，通過所述管泵送被稱為鞘流(sheath flow)的流體的“壁”。樣品被注入到鞘流的中間。如果兩種流體在其速度或密度上足夠不同，它們不會混合:它們形成兩層穩(wěn)定的流動。所述穩(wěn)定性對懸浮對象的更好的測定質(zhì)量是必需的。 W02011/068764公開了一種流式細胞儀，其包括具有樣品通道的毛細管、至少一個聯(lián)接到所述毛細管的振動產(chǎn)生換能器(vibrat1n producing transducer),所述至少一個振動產(chǎn)生換能器被構(gòu)造為在樣品通道內(nèi)產(chǎn)生引起聲輻射壓的聲信號，以聲學(xué)地濃縮在樣品通道中的流體樣品流內(nèi)流動的顆粒；和具有紫色激光和藍色激光的掃描源(interrogat1nsource)，紫色和藍色激光被構(gòu)造為至少與一些聲學(xué)地濃縮的顆粒相互作用以產(chǎn)生輸出信號。如在W02011/068764中的系統(tǒng)是有聲學(xué)聚焦的流式細胞儀的例子，并且更具體地是有聲學(xué)聚焦的毛細管流式細胞儀的例子。 W01998/057152公開了一種方法并且描述了用于探測標記到微粒的熒光物質(zhì)的裝置。所述設(shè)備包括用于輸送微粒通過選定位置的單一的毛細管流動載體系統(tǒng)，用于照射標記到微粒的物質(zhì)的電磁輻射源，和用于測量物質(zhì)在選定位置發(fā)射的熒光的探測系統(tǒng)。所述方法包括輸送微粒到選定位置，照射標記到微粒的熒光物質(zhì)，并測定熒光物質(zhì)在選定位置發(fā)射的熒光。如在W01998/057152或W02011/068764中的系統(tǒng)是毛細管流式細胞儀的一個例子。 現(xiàn)有技術(shù)的流式細胞儀具有許多缺點。一個缺點是從散射光得到的關(guān)于對象的信息是有限的。因為來自流式細胞分析的數(shù)據(jù)處于集合的水平，觀察和測量單個對象的行為是不容易的。現(xiàn)有技術(shù)的流式細胞儀的另一個主要缺點儀是其低對象吞吐率。即使對于高速流式細胞儀和分選機，這仍然少于每秒幾千個對象。吞吐本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護點】
用于在液體樣品中觀察、分析和/或分離對象的流式細胞術(shù)系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包括數(shù)字全息顯微鏡(DHM)和至少一個流體系統(tǒng)，其中，所述DHM包括照明裝置、干涉儀系統(tǒng)和數(shù)字記錄裝置，其中，所述流體系統(tǒng)能夠引導(dǎo)所述對象通過所述DHM的照明裝置的照明光束，其中，所述流體系統(tǒng)包括用于引起通過所述流體系統(tǒng)的液體樣品流的機構(gòu)，其中，優(yōu)選地，所述流體系統(tǒng)包括用于在所述流體系統(tǒng)內(nèi)控制液體樣品流的橫向尺寸的流大小控制設(shè)備，優(yōu)選地，所述流大小控制設(shè)備在所述液體樣品流中能夠?qū)ο笾饌€地或一次多個地排開。
【技術(shù)特征摘要】
【國外來華專利技術(shù)】...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：S朱麗斯，P馬圖伊斯，
申請(專利權(quán))人：奧維奇奧成像系統(tǒng)股份有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：比利時;BE
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