本發(fā)明專利技術(shù)涉及一種雞用微生態(tài)制劑及其制備方法，屬于微生物制劑制備技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明專利技術(shù)的雞用微生態(tài)制劑是將雞全腸內(nèi)容物用培養(yǎng)基稀釋，然后過濾，得濾液；然后將濾液接種于培養(yǎng)基，于厭氧培養(yǎng)系統(tǒng)、40.5-41.5℃培養(yǎng)35-37h，得腸菌培養(yǎng)液種子液；最后將種子液接種于發(fā)酵罐中，向罐內(nèi)充氮?dú)?，保持壓力?.018-0.022MPa、pH為6.8-7.0，于40.5-41.5℃靜止培養(yǎng)46-50h。該微生態(tài)制劑是一種全天候、多菌屬、聯(lián)合、協(xié)調(diào)和疊加共同起作用的生物源性復(fù)合制劑，無毒副作用，不存在排異反應(yīng)，無藥物殘留，無激素殘留，不產(chǎn)生細(xì)菌的耐藥性。其所含有效活菌含量不低于100億個(gè)/ml；其主要益生菌的生物活性有效期在常溫下延長至8個(gè)月。
【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
一種雞用微生態(tài)制劑及其制備方法
本專利技術(shù)涉及一種雞用微生態(tài)制劑及其制備方法，屬于微生物制劑制備
技術(shù)介紹
微生態(tài)制劑又名促生素、利生素、活菌制劑、益生素，是從動物或自然界分離、鑒定或通過生物工程人工組建的有益微生物，經(jīng)培養(yǎng)、發(fā)酵、干燥、加工等特殊工藝制成的含有活菌并用于動物的生物制劑或活菌制劑。廣義的動物微生態(tài)制劑既包括正常微生物成員，即益生素(菌)，還包括一些能促進(jìn)正常微生物群生長繁殖所需物質(zhì)的制劑，如低聚糖等益生元。狹義上，微生態(tài)制劑就指益生素。本專利技術(shù)中所述微生態(tài)制劑為廣義含義的微生態(tài)制劑。根據(jù)菌種組成，微生態(tài)制劑可分為單一菌制劑和復(fù)合菌制劑。常見的單一菌制劑為乳酸菌制劑、芽孢桿菌制劑、酵母菌制劑、放線菌制劑及光合細(xì)菌制劑等幾大類。作為本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的是，所有微生物生長繁殖均需要培養(yǎng)基含有碳源、氮源、無機(jī)鹽、生長因子、水及能源，但是不同類型微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需求是不一樣的。所以，復(fù)合菌制劑的制備要遠(yuǎn)遠(yuǎn)難于單一菌制劑的制備；因此，目前所公開的復(fù)合菌制劑較少。其中所含復(fù)合菌種類最多的是日本琉球大學(xué)比嘉照夫教授專利技術(shù)的復(fù)合微生物制劑，由光合細(xì)菌、乳酸菌、酵母菌和放線菌等10屬8O多種微生物組成。但是健康人群以及其它動物的腸道中存在的菌種種類高達(dá)1000多種，這些微生物菌群在腸道免疫系統(tǒng)的形成上扮演著重要作用，且每種微生物對于維持機(jī)體消化和維生素代謝以及對于宿主的健康都是功不可沒的，如果改變腸道菌群的組成將會增加食品過敏或者腸道炎性疾病的風(fēng)險(xiǎn)。所以，單一菌制劑和復(fù)合菌制劑存在以下缺陷：1.單一菌種和復(fù)合制劑功能不全面，聯(lián)合、協(xié)調(diào)和疊加作用不明顯；2.有些單一菌種和復(fù)合制劑使用的菌種非原籍菌，存在致病風(fēng)險(xiǎn)。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的在于提供一種含有與固有菌群的桿菌球菌比例、陽性菌陰性菌比例基本保持一致菌群的微生態(tài)制劑及其制備方法。本專利技術(shù)實(shí)現(xiàn)上述專利技術(shù)目的的技術(shù)方案：一種雞用微生態(tài)制劑的制備方法，其步驟為：（1）將SPF成年母雞全腸內(nèi)容物用9-11倍其重量的培養(yǎng)基稀釋，然后過濾，得濾液；（2）將濾液按9-11%的接種量接種于培養(yǎng)基，于厭氧培養(yǎng)系統(tǒng)、40.5-41.5℃靜止培養(yǎng)35-37h，得腸菌培養(yǎng)液種子液；（3）將種子液按4.5-5.5%的接種量接種于發(fā)酵罐中，向罐內(nèi)充氮?dú)猓３謮毫?.018-0.022MPa、pH為6.8-7.0，于40.5-41.5℃靜止培養(yǎng)46-50h。步驟（2）和（3）所用培養(yǎng)基的制備方法：取豆芽液300ml，然后向其加入魚粉蛋白胨8g、鹽酸半胱氨酸0.6g、大豆蛋白胨6g、維生素B10.4g、牛肉膏20g、酵母浸粉2g、可溶性淀粉0.5g、葡萄糖10g、磷酸氫二鉀25g，硫酸鎂10g；然后加熱至溶解，再攪拌至混合均勻；然后加水補(bǔ)足1000ml，再調(diào)pH值至7.0；于121℃滅菌30分鐘即得1000ml培養(yǎng)基。上述制備方法，其步驟（1）、（2）和（3）中的數(shù)據(jù)（用量比例、發(fā)酵參數(shù)）的改變會影響所制備的微生態(tài)制劑的品質(zhì)；即含菌群的種類、各菌群的含量、活菌含量、常溫保存期等。所以，必須將上述數(shù)據(jù)限定在本專利技術(shù)的范圍內(nèi)，此時(shí)所制備的生態(tài)制劑的有效活菌含量不低于100億個(gè)/ml，常溫保存期可達(dá)8個(gè)月；與雞腸道內(nèi)固有菌群相比，其桿菌球菌比例、陽性菌陰性菌比例與雞腸道內(nèi)固有菌群的基本保持一致，桿菌球菌的比例80:20-85:15之間；革蘭氏陽性菌和陰性菌的比例在75:25-85:15之間；且嗜酸乳桿菌、丁酸梭菌、糞球菌、乳酸片球菌、酵母菌和含量分別增加8-10%、4-5%、4-5%、8-10%、4-5%。上述制備方法，優(yōu)選的，步驟（1）中全腸內(nèi)容物與培養(yǎng)基的重量比為1:10；步驟（2）中濾液按10%的接種量接種于培養(yǎng)基，41℃靜止培養(yǎng)36h；步驟（3）中將種子液按5%的接種量接種于發(fā)酵罐中，壓力為0.02MPa、pH為6.8-7.0，于41℃靜止培養(yǎng)48h。在此制備條件下制備的生態(tài)制劑，有效活菌含量不低于110億/ml，常溫保存期可達(dá)9個(gè)月，其桿菌球菌比例、陽性菌陰性菌比例與雞腸道內(nèi)固有菌群的比例更加一致；桿菌球菌的比例為80:16-18；革蘭氏陽性菌和陰性菌的比例為75:21-24；其嗜酸乳桿菌、丁酸梭菌、糞球菌、乳酸片球菌、酵母菌和含量分別增加10%、5%、5%、10%、5%。本專利技術(shù)還提供了一種采用上述方法制備的雞用微生態(tài)制劑。該微生態(tài)制劑是一種全天候、多菌屬、聯(lián)合、協(xié)調(diào)和疊加共同起作用的生物源性復(fù)合制劑，無毒副作用，不存在排異反應(yīng)，無藥物殘留，無激素殘留，不產(chǎn)生細(xì)菌的耐藥性。其所含有效活菌含量不低于100億個(gè)/ml；其主要益生菌的生物活性有效期在常溫下延長至8個(gè)月。與本專利技術(shù)之前的單一菌種制劑、復(fù)合菌種制劑相比，其所含有益菌的種類更多，與固有菌群的桿菌球菌比例、陽性菌陰性菌比例基本保持一致；能有效防治雞幼禽腸道疾病，尤其是對雛雞白痢有突出的預(yù)防效果。另外，該微生態(tài)制劑所含主要益生菌包括嗜酸乳桿菌、丁酸梭菌、糞球菌、乳酸片球菌、酵母菌等5種益生菌比例稍優(yōu)于固有菌群；該制劑在畜禽養(yǎng)殖中具有以下功能：防治畜禽腸道疾病，預(yù)防耐藥性病原菌和混合感染；提高飼料轉(zhuǎn)化率并降低飼料成本；提高生產(chǎn)性能和肉品質(zhì)；優(yōu)化生態(tài)環(huán)境和降低環(huán)境污染。具體實(shí)施方式黃豆芽加水煮沸1h后，用8層醫(yī)用紗布過濾，濾液于121℃滅菌，制得豆芽液。實(shí)施例1取豆芽液300ml，然后向其加入魚粉蛋白胨8g、鹽酸半胱氨酸0.6g、大豆蛋白胨6g、維生素B10.4g、牛肉膏20g、酵母浸粉2g、可溶性淀粉0.5g、葡萄糖10g、磷酸氫二鉀25g，硫酸鎂10g；然后加熱至100℃使之完全溶解，此時(shí)各組分均溶解，再攪拌至混合均勻；然后加水補(bǔ)足1000ml，再調(diào)pH值至7.0；分裝之后于121℃滅菌30分鐘，即得培養(yǎng)基。在無菌環(huán)境中將符合GB/T17999-2008標(biāo)準(zhǔn)的SPF成年母雞解剖，取其全腸內(nèi)容物（簡稱腸容物）稱重；然后按腸容物:培養(yǎng)基為1：10的重量比例將腸容物加入到培養(yǎng)基中，充分?jǐn)嚢柚筮^濾，得濾液；將濾液按10%的接種量接種于培養(yǎng)基中，然后置于厭氧培養(yǎng)系統(tǒng)中，于41℃靜止培養(yǎng)36h，得雞原籍腸道菌群種子液，并保存菌種。然后取種子液按5%的接種量接種于1噸的發(fā)酵罐（發(fā)酵罐中是與步驟2相同的培養(yǎng)基）中，將罐內(nèi)充氮?dú)?，保持壓力?.02MPa，pH保持在6.8-7.0，41℃靜止培養(yǎng)48h后，檢測后無菌環(huán)境分裝，制得本專利技術(shù)的雞用原生態(tài)制劑。常溫保質(zhì)期為9個(gè)月；所述常溫保質(zhì)期是自然溫度下遮光、密閉保存的期限。實(shí)施例2取豆芽液300ml，然后向其加入魚粉蛋白胨8g、鹽酸半胱氨酸0.6g、大豆蛋白胨6g、維生素B10.4g、牛肉膏20g、酵母浸粉2g、可溶性淀粉0.5g、葡萄糖10g、磷酸氫二鉀25g，硫酸鎂10g；然后加熱至100℃使之完全溶解，此時(shí)各組分均溶解，再攪拌至混合均勻；然后加水補(bǔ)足1000ml，再調(diào)pH值至7.0；分裝之后于121℃滅菌30分鐘，即得培養(yǎng)基。在無菌環(huán)境中將符合GB/T17999-2008標(biāo)準(zhǔn)的SPF成年母雞解剖，取其全腸內(nèi)容物（簡稱腸容物）稱重；然后按腸容物:培養(yǎng)基為1：9的重量比例將腸容物加入到培養(yǎng)基中，充分?jǐn)嚢柚筮^濾，得濾液；將濾液按9%的接種量接種于培養(yǎng)基中，然后置于厭氧培養(yǎng)系統(tǒng)中，于40本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種雞用微生態(tài)制劑的制備方法，其特征在于，其步驟為：（1）將SPF成年母雞全腸內(nèi)容物用9?11倍其重量的培養(yǎng)基稀釋，然后過濾，得濾液；（2）將濾液按9?11%的接種量接種于培養(yǎng)基，于厭氧培養(yǎng)系統(tǒng)、40.5?41.5℃靜止培養(yǎng)35?37h，得腸菌培養(yǎng)液種子液；（3）將種子液按4.5?5.5%的接種量接種于發(fā)酵罐中，向罐內(nèi)充氮?dú)?，保持壓力?.018?0.022MPa、pH為6.8?7.0，于40.5?41.5℃靜止培養(yǎng)46?50h。
【技術(shù)特征摘要】
1.一種雞用微生態(tài)制劑的制備方法，其特征在于，其步驟為：（1）將SPF成年母雞全腸內(nèi)容物用9-11倍其重量的培養(yǎng)基稀釋，然后過濾，得濾液；（2）將濾液按9-11%的接種量接種于培養(yǎng)基，于厭氧培養(yǎng)系統(tǒng)、40.5-41.5℃靜止培養(yǎng)35-37h，得腸菌培養(yǎng)液種子液；（3）將種子液按4.5-5.5%的接種量接種于發(fā)酵罐中，向罐內(nèi)充氮?dú)?，保持壓力?.018-0.022MPa、pH為6.8-7.0，于40.5-41.5℃靜止培養(yǎng)46-50h；步驟（2）和（3）所用培養(yǎng)基的制備方法：取豆芽液300ml，然后向其加入魚粉蛋白胨8g、鹽酸半胱氨酸0.6g、大豆蛋白胨6g、維生素B10.4g、牛肉膏20g、酵母浸粉2g、可溶性淀粉0.5g、葡萄糖10g、磷酸氫二鉀25...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：張從敬，黃迪海，秦卓明，王世榮，劉霞，張?jiān)佥x，徐秀榮，盛曉丹，
申請(專利權(quán))人：山東省健牧生物藥業(yè)有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：山東;37
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