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    用于從脂肪組織分離非脂肪細(xì)胞的方法和裝置制造方法及圖紙

    技術(shù)編號(hào):10928563 閱讀:233 留言:0更新日期:2015-01-21 10:24
    根據(jù)本公開(kāi)的一方面,提供一種用于從脂肪組織樣品分離非脂肪細(xì)胞的設(shè)備。所述設(shè)備包括第一材料片、粘結(jié)至所述第一材料片的第二材料片以及界定在所述第一材料片與所述第二材料片之間的多個(gè)室,所述多個(gè)室包括:樣品解離室,其包括入口和出口;廢物收集室,其包括與所述樣品解離室的所述出口流體連通的入口;以及細(xì)胞精制室,其包括與所述樣品解離室流體連通的入口,以及出口。

    【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
    【國(guó)外來(lái)華專利技術(shù)】專利技術(shù)背景生物學(xué)和醫(yī)學(xué)中的許多技術(shù)如細(xì)胞分離、流式細(xì)胞術(shù)、細(xì)胞測(cè)定以及細(xì)胞療法依賴于解離組織來(lái)分離個(gè)別細(xì)胞。處理組織樣品經(jīng)常涉及多種動(dòng)作,如切碎、洗滌、酶消化、解離、孵育、混合、凝塊和碎片去除,以及濃縮。在研究實(shí)驗(yàn)室中,這些動(dòng)作經(jīng)常手動(dòng)進(jìn)行,并將樣品在一個(gè)開(kāi)放環(huán)境中從測(cè)試管至測(cè)試管進(jìn)行著轉(zhuǎn)移。所述手動(dòng)過(guò)程需要訓(xùn)練有素的人員并且對(duì)生物樣品的操縱會(huì)造成潛在的污染和感染風(fēng)險(xiǎn)。最近,研究和醫(yī)學(xué)團(tuán)體一直關(guān)注于從脂肪組織分離細(xì)胞。已經(jīng)研發(fā)了數(shù)種技術(shù)來(lái)從患者或動(dòng)物安全地去除脂肪組織部分。例如,腫脹吸脂和水射流吸脂技術(shù)已經(jīng)被廣泛用來(lái)從患者去除脂肪組織。脂肪組織含有儲(chǔ)存脂肪的脂肪細(xì)胞和維持組織的其它非脂肪細(xì)胞。脂肪組織的組成細(xì)胞、其作用以及其相互作用尚未被完全了解,并且是活躍的學(xué)術(shù)和臨床研究的主題。為了研究脂肪組織,可能需要解離組織并且分離組成細(xì)胞。所述過(guò)程可能涉及釋放組成細(xì)胞、去除碎片和不想要的細(xì)胞、濃縮并富集相關(guān)細(xì)胞,以及洗滌細(xì)胞。所述過(guò)程可為費(fèi)力的,并且可能要求訓(xùn)練有素的操作人員、昂貴的裝備設(shè)置以及具有適當(dāng)生物安全性措施的實(shí)驗(yàn)室。所述多個(gè)操縱動(dòng)作還會(huì)引起相關(guān)細(xì)胞的顯著損失,從而使得罕見(jiàn)且普遍性低的細(xì)胞的分離困難并且不可靠。此外,當(dāng)使用人樣品時(shí),交叉污染和感染的風(fēng)險(xiǎn)可能是顯著的。因此需要具有用于從脂肪組織有效分離相關(guān)細(xì)胞、尤其是除脂肪細(xì)胞以外的細(xì)胞的方法,并且具有使從脂肪組織分離非脂肪細(xì)胞變得容易且安全的裝置。包含柔性塑料片的袋被廣泛用于收集、處理和儲(chǔ)存生物組織樣品,如外周血、臍帶血、血液組分、血漿、骨髓、脂肪抽吸物等。袋具有柔性且可膨脹優(yōu)勢(shì),并且能夠改變其內(nèi)部體積來(lái)適應(yīng)不同體積的樣品。為了有利于樣品處理,經(jīng)常使用外部管線將許多個(gè)別袋流體連接,以形成一個(gè)系統(tǒng)。所述袋和管線系統(tǒng)已經(jīng)被廣泛用于樣品處理,例如血液份化、細(xì)胞分離等。然而,由于集成了較多的處理動(dòng)作,因此袋和管線系統(tǒng)迅速變得笨重,難以使用并且很難制造。系統(tǒng)變成絕緣套管狀,且變得容易纏繞,并且許多部件彼此懸擺。為了使用所述裝置,操作人員需要高水平的訓(xùn)練和長(zhǎng)期的經(jīng)驗(yàn)來(lái)設(shè)置這種復(fù)雜的裝置。操作人員還需要另外注意按正確的順序?qū)⒏鞣N部分安裝在正確的位置。此外,這些裝置和系統(tǒng)的制造可為困難且昂貴的,因?yàn)槎鄠€(gè)袋、部件以及管線伸展段經(jīng)常必須個(gè)別地制造并且然后進(jìn)行組裝。所述裝置的組裝可能為勞動(dòng)密集型的,并且會(huì)呈現(xiàn)泄露和污染、即系統(tǒng)故障的風(fēng)險(xiǎn)。對(duì)于臨床應(yīng)用來(lái)說(shuō),裝置經(jīng)常是單次使用的,并且其可靠性是重要的。密集的勞力和裝置故障風(fēng)險(xiǎn)是這些常規(guī)絕緣套管狀系統(tǒng)的主要障礙。專利技術(shù)概述根據(jù)本公開(kāi)的一方面,提供一種用于從脂肪組織樣品分離非脂肪細(xì)胞的設(shè)備。所述設(shè)備包括第一材料片、粘結(jié)至第一材料片的第二材料片以及界定在第一材料片與第二材料片之間的多個(gè)室,所述多個(gè)室包括:樣品解離室,其包括入口和出口;廢物收集室,其包括與樣品解離室的出口流體連通的入口;以及細(xì)胞精制室,其包括與樣品解離室流體連通的入口,以及出口。根據(jù)一些實(shí)施方案,樣品解離室進(jìn)一步包括網(wǎng)式過(guò)濾器,所述網(wǎng)式過(guò)濾器包括孔徑在70μm與300μm之間的孔。根據(jù)一些實(shí)施方案,所述設(shè)備進(jìn)一步包括網(wǎng)式過(guò)濾器,所述網(wǎng)式過(guò)濾器包括在細(xì)胞精制室中、包括孔徑在20μm與50μm之間的孔。根據(jù)一些實(shí)施方案,樣品解離室進(jìn)一步包括第一網(wǎng)式過(guò)濾器,所述第一網(wǎng)式過(guò)濾器包括具有第一孔徑的孔,并且其中細(xì)胞精制室進(jìn)一步包括第二網(wǎng)式過(guò)濾器,所述第二網(wǎng)式過(guò)濾器包括具有第二孔徑的孔,其中第二孔徑小于第一孔徑。根據(jù)一些實(shí)施方案,所述設(shè)備進(jìn)一步包括控制樣品解離室、廢物收集室以及細(xì)胞精制室之間的流體連接的構(gòu)件。根據(jù)一些實(shí)施方案,控制流體連接的構(gòu)件包括旋塞閥。根據(jù)一些實(shí)施方案,所述設(shè)備進(jìn)一步包括流量控制裝置,所述流量控制裝置被構(gòu)造來(lái)將清洗溶液和解離溶液中的至少一種引入到樣品解離室中,并且具有與樣品解離室流體連通的出口。根據(jù)一些實(shí)施方案,所述設(shè)備進(jìn)一步包括用于對(duì)樣品解離室和細(xì)胞精制室中的一個(gè)施加壓力的構(gòu)件。根據(jù)一些實(shí)施方案,所述設(shè)備進(jìn)一步包括下游處理設(shè)備,所述下游處理設(shè)備與細(xì)胞精制室的出口流體連通并且包括至少一個(gè)微流體裝置,所述微流體裝置被構(gòu)造來(lái)將從細(xì)胞精制室輸出的流體分離成第一溶液和第二溶液,所述第一溶液具有第一濃度的一種或多種相關(guān)細(xì)胞,所述第二溶液具有小于第一溶液的濃度的所述一種或多種相關(guān)細(xì)胞,其中相關(guān)細(xì)胞包括從脂肪組織樣品分離的非脂肪細(xì)胞。根據(jù)本公開(kāi)的一方面,提供一種無(wú)菌且基本上隔離的脂肪組織處理系統(tǒng)。所述系統(tǒng)包括組織處理室,其包括入口、出口,以及至少一個(gè)網(wǎng)式過(guò)濾器,所述網(wǎng)式過(guò)濾器設(shè)置在組織處理室的入口與組織處理室的出口之間;廢物收集室,其與組織處理室包括在同一封閉空間中,所述廢物收集室包括與組織處理室的出口流體連通的入口;以及碎片去除室和樣品收集室中的一個(gè),所述碎片去除室包括碎片去除機(jī)構(gòu),所述樣品收集室與組織處理室包括在同一封閉空間中,并且與組織處理室流體連通。根據(jù)本公開(kāi)的一方面,提供一種在組織處理系統(tǒng)中處理脂肪組織樣品的方法。所述方法包括將待處理的脂肪組織樣品通過(guò)第一室的入口端口引入到第一室中,處理第一室中的脂肪組織樣品,并且將細(xì)胞通過(guò)第一室的出口、通過(guò)第二室的入口從第一室轉(zhuǎn)移至第二室中,所述第二室與第一室包括在同一封閉空間中。根據(jù)一些實(shí)施方案,處理脂肪組織樣品包括解離脂肪組織樣品。根據(jù)一些實(shí)施方案,處理脂肪組織樣品包括從第一室中的脂肪組織樣品去除過(guò)量的流體。根據(jù)一些實(shí)施方案,處理脂肪組織樣品包括使用清洗溶液洗滌第一室中的脂肪組織樣品。根據(jù)一些實(shí)施方案,處理脂肪組織樣品包括使用清洗溶液洗滌第一室中的脂肪組織樣品,并且使用包含至少一種酶的解離溶液解離第一室中的脂肪組織樣品。根據(jù)一些實(shí)施方案,解離溶液包含膠原酶。根據(jù)一些實(shí)施方案,解離溶液包含膠原酶、脫氧核糖核酸酶以及透明質(zhì)酸酶。根據(jù)一些實(shí)施方案,使用解離溶液解離脂肪組織樣品在約37℃下進(jìn)行。根據(jù)一些實(shí)施方案,所述方法進(jìn)一步包括使用包括在第二室中的網(wǎng)式過(guò)濾器去除碎片。根據(jù)一些實(shí)施方案,網(wǎng)式過(guò)濾器的孔徑在15微米與100微米之間。根據(jù)一些實(shí)施方案,所述方法進(jìn)一步包括將樣品保留在第一室中,并且將廢物流通過(guò)包括在第一室中的網(wǎng)式過(guò)濾器和第一室的第一出口、通過(guò)第三室的入口轉(zhuǎn)移到第三室中,所述第三室與第一室包括在同一本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...

    【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
    一種用于從脂肪組織樣品中分離非脂肪細(xì)胞的設(shè)備,所述設(shè)備包括:第一材料片;粘結(jié)至所述第一材料片的第二材料片;以及界定在所述第一材料片與所述第二材料片之間的多個(gè)室,所述多個(gè)室包括:樣品解離室,其包括入口和出口;廢物收集室,其包括與所述樣品解離室的所述出口流體連通的入口;以及細(xì)胞精制室,其包括與所述樣品解離室流體連通的入口,以及出口。

    【技術(shù)特征摘要】
    【國(guó)外來(lái)華專利技術(shù)】2011.12.07 US 61/567,9261.一種用于從脂肪組織樣品中分離非脂肪細(xì)胞的設(shè)備,所述設(shè)
    備包括:
    第一材料片;
    粘結(jié)至所述第一材料片的第二材料片;以及
    界定在所述第一材料片與所述第二材料片之間的多個(gè)室,所述多
    個(gè)室包括:
    樣品解離室,其包括入口和出口;
    廢物收集室,其包括與所述樣品解離室的所述出口流體連通的入
    口;以及
    細(xì)胞精制室,其包括與所述樣品解離室流體連通的入口,以及出
    口。
    2.如權(quán)利要求1所述的設(shè)備,其中所述樣品解離室進(jìn)一步包括
    網(wǎng)式過(guò)濾器,所述網(wǎng)式過(guò)濾器包括孔徑在70μm與300μm之間的孔。
    3.如權(quán)利要求1所述的設(shè)備,其進(jìn)一步包括網(wǎng)式過(guò)濾器,所述
    網(wǎng)式過(guò)濾器包括在所述細(xì)胞精制室中、包括孔徑在20μm與50μm
    之間的孔。
    4.如權(quán)利要求1所述的設(shè)備,其中所述樣品解離室進(jìn)一步包括
    第一網(wǎng)式過(guò)濾器,所述網(wǎng)式過(guò)濾器包括具有第一孔徑的孔,并且其中
    所述細(xì)胞精制室進(jìn)一步包括第二網(wǎng)式過(guò)濾器,所述第二網(wǎng)式過(guò)濾器包
    括具有第二孔徑的孔,其中所述第二孔徑小于所述第一孔徑。
    5.如權(quán)利要求1所述的設(shè)備,其進(jìn)一步包括控制所述樣品解離

    \t室、所述廢物收集室以及所述細(xì)胞精制室之間的流體連接的構(gòu)件。
    6.如權(quán)利要求5所述的設(shè)備,其中控制流體連接的所述構(gòu)件包
    括旋塞閥。
    7.如權(quán)利要求1所述的設(shè)備,其進(jìn)一步包括流量控制裝置,所
    述流量控制裝置被構(gòu)造來(lái)將清洗溶液和解離溶液中的至少一種引入
    到所述樣品解離室中,并且具有與所述樣品解離室流體連通的出口。
    8.如權(quán)利要求1所述的設(shè)備,其進(jìn)一步包括用于對(duì)所述樣品解
    離室和所述細(xì)胞精制室中的一個(gè)施加壓力的構(gòu)件。
    9.如權(quán)利要求1所述的設(shè)備,其進(jìn)一步包括下游處理設(shè)備,所
    述下游處理設(shè)備與所述細(xì)胞精制室的所述出口流體連通并且包括至
    少一個(gè)微流體裝置,所述微流體裝置被構(gòu)造來(lái)將從所述細(xì)胞精制室輸
    出的流體分成第一溶液和第二溶液,所述第一溶液具有第一濃度的一
    種或多種相關(guān)細(xì)胞,所述第二溶液具有小于所述第一溶液的濃度的所
    述一種或多種相關(guān)細(xì)胞,其中所述相關(guān)細(xì)胞包括從脂肪組織樣品分離
    的非脂肪細(xì)胞。
    10.一種無(wú)菌且基本上隔離的脂肪組織處理系統(tǒng),其包括:
    組織處理室,其包括入口、出口,以及至少一個(gè)網(wǎng)式過(guò)濾器,所
    述網(wǎng)式過(guò)濾器設(shè)置在所述組織處理室的所述入口與所述組織處理室
    的所述出口之間;
    廢物收集室,其與所述組織處理室包括在同一封閉空間中,所述
    廢物收集室包括與所述組織處理室的所述出口流體連通的入口;以及
    碎片去除室和樣品收集室中的一個(gè),所述碎片去除室包括碎...

    【專利技術(shù)屬性】
    技術(shù)研發(fā)人員:L·R·黃施冰如,廖智菁,
    申請(qǐng)(專利權(quán))人:財(cái)團(tuán)法人工業(yè)技術(shù)研究院,妍芳生技開(kāi)發(fā)股份有限公司
    類型:發(fā)明
    國(guó)別省市:中國(guó)臺(tái)灣;71

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