豬融合干擾素制造技術

本發明專利技術提供一種豬融合干擾素，該豬融合干擾素具有如下所示的氨基酸序列:(豬干擾素多肽)-(連接子)n-(豬免疫球蛋白Fc片段)；或(豬免疫球蛋白Fc片段)-(連接子)n-(豬干擾素多肽)；其中n為0或1至10的整數，且該豬融合干擾素可與抗豬干擾素的抗體專一性結合，并且與抗豬免疫球蛋白Fc段的抗體專一性結合。本發明專利技術并提供一種含有上述豬融合干擾素及/或豬干擾素的豬只抗病毒醫藥組合物、一種上述豬融合干擾素在制備動物抗病毒藥物中的用途，以及一種豬干擾素在制備動物抗病毒藥物中的用途。

【技術實現步驟摘要】
豬融合干擾素
本專利技術涉及一種豬融合干擾素的制備，以及這種豬融合干擾素在抗病毒上的應 用。
技術介紹
長期以來，動物感染毒性疾病往往無特效藥可以用來治療，通常都是以支持性療 法來耐過病毒侵襲，靠自身免疫力來抵御病毒。隨著生技產業的發展，人類已經出現多種抗 病毒藥物，可以用來治療病毒性疾病，而這些抗病毒藥物主要分為三類：生化藥物、核苷酸 類似物、干擾素。這三類抗病毒藥物中，目前以干擾素被認為是最具有潛力的選擇用藥，因 為干擾素具有多重生物活性，不但有抗病毒活性，也具有免疫調節、促進細胞分化和抗腫瘤 功能；其中，干擾素的抗病毒作用，主要是由第一型干擾素（IFNCI/3 )所負責。 目前市面上的干擾素制劑，多為針對人類所開發設計，例如：用來治療人類B型與 C型肝炎等病毒性疾病以及卡波西氏瘤（Kaposi' S sarcoma, KS)、黑色素腫瘤（malignant melanoma)等腫瘤疾病上的干擾素。 至于經濟動物方面，對于病毒性的疾病，并沒有像人類一樣具有商品化的抗病毒 藥物。若無有效的疫苗來預防某一動物病毒，當畜群受該病毒感染時，只能使用支持性療法 處理，但效果往往不彰，而造成畜牧業重大損失；因此，動物干擾素的開發，對動物保健產業 而言，可說是刻不容緩且極為重要的事。
技術實現思路
本專利技術提供一種豬融合干擾素，該豬融合干擾素具有如下所示的氨基酸序列： (豬干擾素多肽）_(連接子）n_(豬免疫球蛋白Fc片段）；或 (豬免疫球蛋白Fc片段）-(連接子） n_ (豬干擾素多肽）； 其中n為0或1至10的整數；且 該豬融合干擾素可與抗豬干擾素的抗體專一性結合，并且與抗豬免疫球蛋白Fc 段的抗體專一性結合。 該豬干擾素多肽與如SEQ ID N〇S:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16& 17所示之氨基酸序列其中至少一者具有至少80%序列同源性，較佳者，具有85%序列同源 性，更佳者，具有90%序列同源性，甚至是91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%序列同 源性。于一實施例中，該豬干擾素多肽選自于由如SEQ ID Nos:l、2、3、4、5、6、7、8、9、10、ll、 12、13、14、15、16及17所示之氨基酸序列所組成之群組中至少一者。 該豬免疫球蛋白Fc段與如SEQ ID Nos: 18、19、20、21及22所示之氨基酸序列其 中至少一者具有至少80%序列同源性，較佳者，具有85%序列同源性，更佳者，具有90%序列 同源性，甚至是91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%序列同源性。于一實施例中，該豬 免疫球蛋白Fc段選自于由如SEQ ID Nos: 18、19、20、21及22所示之氨基酸序列所組成之 群組中至少一者。 該連接子至少含有一個以上的甘氨酸（Glycine，Gly)，該連接子包含但不限于： Gly-Gly、Gly-Ser、如 SEQ ID Nos:23、24、25、26、27、28、29、30、31、32 所示的氨基酸序列。 本專利技術所提供的豬融合干擾素是藉由基因重組技術而得。先將編碼豬融合干擾素 蛋白的DNA序列選殖到表現載體中，形成含有編碼豬融合干擾素蛋白的DNA序列的質體，再 將該質體選殖到表現系統中，經過誘導蛋白質表現后得到豬融合干擾素。 該表現載體可為原核生物表現載體或真核生物表現載體。該原核生物表現載體包 含但不限于PET系列表現載體以及pGEX系列表現載體。該真核生物表現載體包含但不限于 pSecTag系列表現載體。表現載體包含但不限于：pcDNA系列、pVAX系列、pAd系列、pLenti 系列。 該表現系統可為原核生物表現系統（如：細菌）或真核生物表現系統（如：酵 母菌、昆蟲細胞、植物細胞和哺乳動物細胞等）。細菌的實例包括，但不限于，大腸桿菌 (Escherichia coli)。哺乳動物細胞的實例包括，但不限于，3T3細胞、中國倉鼠卵巢細 胞（Chinese hamster ovary cells，CH0 cells)、幼鼠腎細胞（baby hamster kidney cells, BHK cells)、人類子宮頸癌細胞（HeLa cells)，以及人類肝癌細胞〇fepG2cells)等。 本專利技術亦提供一種豬只抗病毒醫藥組合物，包含：一豬干擾素與一上述的豬融合 干擾素至少其中之一，以及一醫藥上可接受的載劑。其中該豬干擾素具有如SEQ ID Nos:l、 2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16及17所示之一的氨基酸序列，且該豬干擾素可 與抗豬干擾素的抗體專一性結合。 本專利技術并提供一種豬融合干擾素在制備抗病毒藥物中的用途，該豬融合干擾素 可有效抑制DNA病毒與RNA病毒在宿主細胞內的增殖，該病毒包含但不限于豬偽狂犬病 病毒（pseudorabies virus, PRV)、豬繁殖與呼吸道綜合癥病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)、豬小病毒（parvovirus)、豬傳染性胃腸炎 病毒（Transmissible gastroenteritis coronavirus, TGEV)、日本腦炎病毒（Japanese encephalitis virus, JEV)、豬輪狀病毒（Rotavirus)、豬環狀病毒第二型（Porcine circovirus type2，PCV2)、豬口蹄疫病毒（foot and mouth disease virus, FMDV)、豬癌 病毒（hog cholera virus, HCV)、非洲豬癌病毒（African swine fever virus)、豬痘病毒 (swinepox virus)、豬細胞巨大性病毒（porcine cytomegalovirus)、豬流行性下痢病毒 (porcine epidemic diarrhea virus)、豬水痛病病毒（swine vesicular disease virus)、 豬鐵士古病毒（porcine teschovirus)、豬星狀病毒（procine astrovirus)。 本專利技術又提供一種豬干擾素在制備抗病毒藥物中的用途，該豬干擾素可有效 抑制DNA病毒與RNA病毒在宿主細胞內的增殖，該病毒包含但不限于豬偽狂犬病病 毒（pseudorabies virus, PRV)、豬繁殖與呼吸道綜合癥病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)、豬小病毒（parvovirus)、豬傳染性胃腸炎 病毒（Transmissible gastroenteritis coronavirus, TGEV)、日本腦炎病毒（Japanese encephalitis virus, JEV)、豬輪狀病毒（Rotavirus)、豬環狀病毒第二型（Porcine circovirus type2，PCV2)本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種豬融合干擾素，包含下列氨基酸序列：(豬干擾素多肽)?(連接子)n?(豬免疫球蛋白Fc片段)；或(豬免疫球蛋白Fc片段)?(連接子)n?(豬干擾素多肽)；其中n為0或1至10的整數；其中該豬干擾素多肽具有如SEQ?ID?Nos:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16及17所示之一的氨基酸序列；其中該連接子具有如Gly?Gly、Gly?Ser、如SEQ?ID?Nos:23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33所示之一的氨基酸序列；其中該豬免疫球蛋白Fc段具有如SEQ?ID?Nos:18、19、20、21及22所示之一的氨基酸序列；且該豬融合干擾素可與抗豬干擾素的抗體專一性結合，并且與抗豬免疫球蛋白Fc段的抗體專一性結合。

【技術特征摘要】
1. 一種豬融合干擾素，包含下列氨基酸序列： (豬干擾素多肽）-(連接子）n_ (豬免疫球蛋白Fc片段）；或 (豬免疫球蛋白Fc片段）-(連接子）n-(豬干擾素多肽）； 其中η為0或1至10的整數； 其中該豬干擾素多肽具有如 SEQ ID Nos:l、2、3、4、5、6、7、8、9、10、ll、12、13、14、15、16 及17所示之一的氨基酸序列； 其中該連接子具有如 Gly-Gly、Gly-Ser、如 SEQ ID Nos:23、24、25、26、27、28、29、30、 31、32、33所示之一的氨基酸序列； 其中該豬免疫球蛋白Fc段具有如SEQ ID Nos: 18、19、20、21及22所示之一的氨基酸 序列；且 該豬融合干擾素可與抗豬干擾素的抗體專一性結合，并且與抗豬免疫球蛋白Fc段的 抗體專一'I生結合。2. -種豬只抗病毒醫藥組合物，包含： 一如權利要求1所述的豬融合干擾素；以及 一醫藥上可接受的載劑。3. 如權利要求2所述的豬只抗病毒醫藥組合物，其特征在于，該豬干擾素具有如SEQ ID Nos:l、2、3、4、5、6、7、8、9、10、ll、12、13、14、15、16 及 17 所示之一的氨基酸序列，且該豬 干擾素可與抗豬干擾素的抗體專一性結合。4. 一種如權利要求1所述的豬融合干擾素在制備動物抗病毒藥物中的用途。5. 如權利要求4所述的用途，其特征在于，該病毒為豬偽狂犬病病毒（pseudorabies virus, PRV)、豬繁殖與呼吸道綜合癥病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)、豬小病毒（parvovirus)、豬傳染性胃腸炎病毒（Transmissible gastroenteritis coronavirus, TGEV)> 日本腦炎病毒(Japanese encephalitis virus, JEV)、豬輪狀病毒（Rotavirus)、豬環狀病毒第二型（Porcine circovirus type2，PCV2)、豬口蹄疫病毒（foot and mouth...

【專利技術屬性】
技術研發人員：郭村勇，吳忠晉，陳漢婷，
申請(專利權)人：施懷哲維克生物科技股份有限公司，
類型：發明
國別省市：中國臺灣;71