一種靈芝多糖高產工程菌株Rmust-UDP及其構建方法技術

本發明專利技術公開一種靈芝多糖高產工程菌株Rmust-UDP及其構建方法，其在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心的保藏編號為CGMCCNO.9324，本發明專利技術提供的靈芝工程菌，是通過選用靈芝強啟動子P-gpd過表達編碼UDP-葡萄糖焦磷酸化酶（UDP）基因，得到高產靈芝多糖靈芝工程菌Rmust-UDP；通過搖瓶發酵實驗表明，該菌在其細胞生長不受影響的情況下，UDP轉化子菌株產靈芝胞內多糖的含量為23.47mg/100mg比野生型菌株（WT菌株）的含量（15.28mg/100mg）提高了53.6%，UDP轉化子菌株產靈芝胞外多糖的含量為1.66g/L比野生型菌株（WT菌株）的含量（1.22g/L）提高了36.1%。因此，本高產菌株可以作為生產靈芝多糖的工程菌株，具有廣泛的應用前景。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術屬于基因工程和代謝工程領域的，具體涉及一種通過基因工程對靈芝代謝 途徑中有關靈芝多糖合成的UDP-葡萄糖焦磷酸化酶（UDP)基因過表達的方法，構建了一個 靈芝多糖的高產工程菌株。
技術介紹
靈芝（fefloofe/ma )是擔子菌綱，多孔菌科，靈芝屬真菌。靈芝真菌在我 國有20多種，包括赤芝，黃芝，紫芝，黑芝，薄蓋靈芝，樹舌等。我國應用靈芝作為藥物已有 兩千多年的歷史。靈芝對于增強人體免疫力，調節血糖，控制血壓，輔助腫瘤放化療，保肝護 肝，促進睡眠等方面均具有顯著療效。由于其特殊的藥用價值，靈芝的有效成分分析和藥理 學研究已經引起了國際上的廣泛關注，尤其在日本，美國，韓國等國家。目前，靈芝的研究已 經深入到了分子水平，一些專著相繼出版，從不同的角度介紹了靈芝的生物學特性、栽培技 術、藥理學作用及臨床應用等情況。 靈芝多糖是從靈芝中提取的一種新內源活性物質，其所含的化學成分能夠顯著提 高吞噬細胞的吞噬能力，增強體液免疫和細胞免疫功能，還能提高紅細胞中超氧化物歧化 酶活性，對人體具有多種功能。 UDP-葡萄糖焦磷酸化酶（UDP)基因是靈芝多糖合成途徑中的一個較為重要的基 因。在細胞中，糖原分解會產生大量游離的葡萄糖-1-磷酸，UDP-葡萄糖焦磷酸化酶主要催 化葡萄糖-1-磷酸變為UDP-葡萄糖，而UDP-葡萄糖是糖原生物合成中糖基的供體。這是糖 原合成的第一步反應。糖原合成后再經過一系列的反應就產生了各種多糖。因此UDP-葡 萄糖焦磷酸化酶基因對糖原的合成具有重要的作用。靈芝多糖的合成途徑如下所示：

【技術保護點】
一種靈芝多糖高產工程菌株Rmust?UDP，其在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心的保藏編號為CGMCC?NO.?9324。

【技術特征摘要】
1. 一種靈芝多糖高產工程菌株Rmust-UDP，其在中國微生物菌種保藏管理委員會普通 微生物中心的保藏編號為CGMCC NO. 9324。2. 權利要求1所述靈芝多糖高產工程菌株Rmust-UDP的構建方法，其特征在于：將目 的片段與表達載體相連得到重組表達質粒PJW-EX...

【專利技術屬性】
技術研發人員：徐軍偉，李煥軍，任夢飛，紀森林，張德懷，
申請(專利權)人：昆明理工大學，
類型：發明
國別省市：云南;53