本發明專利技術涉及在體分離原代呼吸道上皮細胞的工具，具體涉及一種用于分離原代呼吸道上皮細胞的雙材質中空套管。其特征在于由不同管徑的硅膠管(管徑細、強度高)和鐵氟龍中空管(管徑粗、強度小、韌性大)通過硅膠膠水粘合而成。
【技術實現步驟摘要】
【專利摘要】本專利技術涉及在體分離原代呼吸道上皮細胞的工具，具體涉及一種用于分離原代呼吸道上皮細胞的雙材質中空套管。其特征在于由不同管徑的硅膠管(管徑細、強度高)和鐵氟龍中空管(管徑粗、強度小、韌性大)通過硅膠膠水粘合而成。【專利說明】一種用于分離原代呼吸道上皮細胞的雙材質中空套管
本專利技術涉及醫學儀器領域，具體而言，涉及一種用于分離原代呼吸道上皮細胞的雙材質中空套管。
技術介紹
呼吸道上皮細胞是呼吸系統與外界接觸的第一道天然屏障，其結構與功能穩態是呼吸系統維持正常換氣功能和防御功能的細胞基礎。呼吸道上皮細胞附著于基底膜生長，共同構成呼吸道的假復層柱狀纖毛上皮，其表面的纖毛有節律地向咽部擺動，在機體排除呼吸道刺激性異物的過程中發揮了重要作用。 實驗動物的原代呼吸道上皮細胞作為人呼吸道上皮細胞的實驗模型，對于臨床和實驗室工作具有不可取代的借鑒作用。呼吸道上皮細胞分離培養技術的不斷完善必將對以呼吸系統研宄為基礎的病毒學、病理學和毒理學、生物化學、藥代動力學、發育生物學，甚至臨床治療與應用產生推動作用。 目前，國內外分離實驗用動物大氣道原代呼吸道上皮細胞大多采用縱向剪開氣管，直接浸入含鏈酶蛋白酶的試管中，4°C酶解18-24小時，再離心酶解液(離心力123g)，最后收集細胞團的方法來獲取原代呼吸道上皮細胞。然而，這種方法獲取的細胞數較少、活性較差，最為重要的是雜細胞過多，對呼吸道疾病的細胞學研宄產生限制。因此，我們總結實驗中的經驗，開發出基于氣管插管的分離大氣道上皮細胞的方法。但是，在該方法的操作過程中存在以下問題:若選用的材質強度太大而彈性小，導致針頭插入欠緊，且折返、動脈夾夾持困難，容易造成鏈霉蛋白酶外漏；若選取的材質強度小而彈性大，又將導致手術線結扎時，不宜扎緊，也會造成鏈霉蛋白酶外漏等。目前雖已有多種氣管插管方法應用于動物體外實驗中，但這些方法不但技術操作復雜且需要特殊設備，而且往往因鏈霉蛋白酶外漏導致細胞消化不充分，從而影響整個實驗的成敗。于是我們針對上述問題開發出雙材質中空套管。此套管選取兩種不同特性、材質的中空管組成套管，分別滿足兩端不同需要，以達到防止鏈霉蛋白酶外漏并有效減少鏈霉蛋白酶用量的效果，從而減少酶解液對游離呼吸道上皮細胞的損傷作用，在保證分離的呼吸道上皮細胞活性的基礎上，大幅增加細胞分離數量。本專利技術通過運用鐵氟龍中空管、GA-1073硅膠管和文錦超能380硅膠膠水實現這一構想。 GA-1073硅膠管強度大(硬度70土OT)，且生物相容性較好。鐵氟龍管，又叫聚四氟乙稀(Polytetrafluoroethene，PTFE)管，是采用PTFE材料制成，具有強度小(硬度50-5?)、韌性大的特點，可塑性強。文錦超能380硅膠膠水化學成份為氰基丙烯酸酯，目前醫用氰基丙烯酸酯粘合劑已在創傷骨科中廣泛應用，無生物毒性。本套管即利用GA-1073硅膠管強度大不易變形，即在手術線結扎時不易坍陷的特點，通過選取適當管徑的GA-1073硅膠管，在減少對氣管損傷的同時，更便于插入動物氣管，手術線結扎緊密；又利用鐵氟龍中空管強度小和韌性大的特點，既便于連接注射器，又在后期動脈夾封閉管腔時便于折返。文錦超能380硅膠膠水是以高分子聚合物為主體的溶劑型產品，粘接強度高、抗剪切。此雙材質中空套管不僅可以重復使用，而且在保證分離的呼吸道上皮細胞活性的基礎上，大幅增加細胞分離數量。 目前，市售的原代呼吸道上皮細胞價格昂貴，且多數都已喪失纖毛定向擺動的在體生理功能，活性較差。因此，需要更為便利且快捷的呼吸道上皮細胞分離設備。
技術實現思路
本專利技術涉及一種便于進行原代呼吸道上皮細胞分離的雙材質中空套管。所述雙材質套管能夠保證實驗動物氣管插管的成功率，并且確保由注射器、雙材質中空套管和氣管所組成的管道系統的通暢性和密閉性，防止此管道系統在培養基中浸泡、酶解的過程中出現酶解液滲漏，在保證鏈霉蛋白酶與呼吸道上皮細胞的接觸和作用的同時，有效減少鏈霉蛋白酶的用量，從而降低酶解液對游離呼吸道上皮細胞的損傷。以獲取更多數目且活性更好的原代呼吸道上皮細胞。 所述的雙材質中空套管由， (I)管徑細、強度高的硅膠管構成的插入氣管的內層套管，和 (2)管徑粗、韌性大、可對折并通過止血鉗封閉的鐵氟龍中空管構成的外層套管套接而成； 并且硅膠管的外徑等于鐵氟龍中空管的內徑。 所述的套接為通過可用于外科手術的醫用粘合劑粘合，所述的醫用粘合劑優選為文錦超能380硅膠粘硅膠膠水。 所述的硅膠管優選為GA-1073硅膠管，強度大不易變形，在手術線結扎時不易坍陷，通過選取適當管徑的GA-1073硅膠管，在減少對氣管損傷的同時，能更便于插入動物氣管，且手術線結扎時不塌陷從而保證了鏈霉蛋白酶消化液的順利流入氣管腔； 所述的鐵氟龍中空管強度小韌性大的，既便于連接注射器，又在后期封閉管腔時便于折疊并通過止血鉗夾緊密封。 此套管不僅可以重復使用，而且能保證實驗動物氣管插管的成功率，并且確保由注射器、雙材質中空套管和實驗動物氣管所組成的管道的通暢性和密閉性，減少鏈霉蛋白酶的用量，有效提升分離得到的呼吸道上皮細胞的活性，增加呼吸道上皮細胞的分離數量。 所述的硅膠管和鐵氟龍中空管的口徑大小和長度可以根據實驗動物模型來合理選擇，以便于插管操作。 所述的硅膠管套接與鐵氟龍中空管內的長度取決于分離原代呼吸道上皮細胞的模型動物種類和兩種材質管的長度，優選為硅膠管長度的四分之一。 本專利技術為有關呼吸道上皮細胞的研宄、教學、醫學應用提供了有利的物質條件，聯合應用我們已授權的專利(ZL 201110440894.2)中所述的培養基，能有效增加分離得到的呼吸道上皮細胞的數量和活力，并保留呼吸道上皮細胞的纖毛定向擺動的在體生理功能。 本專利技術使得原代呼吸道上皮細胞分離操作簡單易行，可重復性強，便于推廣應用，具有廣泛的推廣價值。 【專利附圖】【附圖說明】 圖1.雙材質中空套管的立體圖(以小鼠專用雙材質中空套管為例)。(比例尺5:I) 圖2.雙材質中空套管的剖視圖。(比例尺5:1) 圖3.雙材質中空套管沿線A-A’的剖視圖。(比例尺50:1) 圖4.雙材質中空套管連接游離BALB/c小鼠氣管后的實物圖，1.一號手術線； 2.小鼠氣管；3.GA-1073硅膠管；4.鐵氟龍中空管。 圖5.注入鏈酶蛋白前雙材質中空套管連接氣管實物圖，1.小鼠氣管；2.GA-1073硅膠管；3.鐵氟龍中空管。 圖6.注入鏈酶蛋白后氣管氣球樣改變的實物圖，1.小鼠氣管；2.GA-1073硅膠管； 3.鐵氟龍中空管。 圖7.倒置顯微鏡下的小鼠原代呼吸道上皮細胞 【具體實施方式】 以分離小鼠呼吸道上皮細胞專用雙材質中空套管為例 實施例1.雙材質套管的制作 (I)取兩端分別為45度斜末端和平末端，內徑0.6mm，外徑0.8mm的GA-1073娃膠管; (2)取20mm和兩端均為平末端，內徑0.8mm，外徑1.0mm的鐵氟龍中空管25mm， (3)將GA-1073硅膠管的平末端涂上10微升文錦超能380硅膠膠水插入鐵氟龍中空管中，插入5_后固定15s即得所述雙材質套管。 圖1所示為本專利技術所述雙材質中空套管的立體圖(以小鼠專用雙本文檔來自技高網...
【技術保護點】
一種進行原代呼吸道上皮細胞分離的雙材質中空套管，其特征在于，所述的雙材質中空套管由，(1)管徑細、強度高的硅膠管構成的插入氣管的內層套管，和(2)管徑粗、韌性大、可對折并通過止血鉗封閉的鐵氟龍中空管構成的外層套管套接而成；并且硅膠管的外徑等于鐵氟龍中空管的內徑。
【技術特征摘要】
【專利技術屬性】
技術研發人員：李煜生，任杰，
申請(專利權)人：南方醫科大學，
類型：發明
國別省市：廣東;44
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