本發(fā)明專利技術(shù)根據(jù)雪花草的生長特性并在MS培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上配制出適合雪花草組織培養(yǎng)的用于不定芽誘導的培養(yǎng)基、用于繼代增殖的培養(yǎng)基和用于無菌生根培養(yǎng)基。使用本發(fā)明專利技術(shù)所述的用于不定芽誘導的培養(yǎng)基、用于繼代增殖的培養(yǎng)基和用于無菌生根培養(yǎng)基能有效提高繁殖系數(shù)，降低生產(chǎn)成本；生產(chǎn)周期短，種植效益大大提高；能夠有效解決夏季雪花草嚴重供應不足的問題，也為種植者提供良好的經(jīng)濟效益。
【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
【專利摘要】本專利技術(shù)根據(jù)雪花草的生長特性并在MS培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上配制出適合雪花草組織培養(yǎng)的用于不定芽誘導的培養(yǎng)基、用于繼代增殖的培養(yǎng)基和用于無菌生根培養(yǎng)基。使用本專利技術(shù)所述的用于不定芽誘導的培養(yǎng)基、用于繼代增殖的培養(yǎng)基和用于無菌生根培養(yǎng)基能有效提高繁殖系數(shù)，降低生產(chǎn)成本；生產(chǎn)周期短，種植效益大大提高；能夠有效解決夏季雪花草嚴重供應不足的問題，也為種植者提供良好的經(jīng)濟效益。【專利說明】
本專利技術(shù)涉及，屬于植物快速繁殖
。
技術(shù)介紹
隨著國民經(jīng)濟的發(fā)展，水族箱逐漸普及，也越來越流行。觀賞水草在水族箱中的地位重要，已經(jīng)發(fā)展到以水草為主的水族箱觀賞階段。目前在水族箱中應用的觀賞水草品種已經(jīng)超過500多種，其中絕大多數(shù)來原于美洲(皇冠類)、非洲(榕類)、東南亞(椒草類)等地。 雪花草(Hottonia inflat)，在水族箱布景中常常作為中、前景水生水草。具3_7次羽狀深裂的互生葉片，俯視時很像雪花的結(jié)晶圖案，會在水上開紅紫色花。雪花草的水上草與水中草同型，水上草通常突出水面生長，亦可在濕地上匍匐生長。雪花草的種植比其它水草相對困難，其水上草或水中草，均不耐高溫，當溫度超過28 V以上時生長不良或死亡，導致在夏季市場上供不應求。 觀賞水草內(nèi)生菌多，組織培養(yǎng)十分困難。目前也有一些觀賞水草如水榕、紅椒、綠椒等已經(jīng)通過組織培養(yǎng)獲得成功，但是對于一些依靠傳統(tǒng)繁殖難度高、且具有高觀賞和經(jīng)濟價值的品種，如大噴泉、長葉網(wǎng)草等品種由于組織培養(yǎng)困難還沒有成功。目前國內(nèi)專業(yè)開展水草組織培養(yǎng)研宄和工廠化生產(chǎn)的還不多，工廠化育苗技術(shù)體系還有待進一步研宄。雪花草的繁殖目前主要依靠其分蘗，繁殖系數(shù)低，在生產(chǎn)上需要大量的種苗，增加種苗成本。組織培養(yǎng)技術(shù)能夠在短期內(nèi)大量提供雪花草的種苗，同時克服雪花草在夏季由于高溫難生長的困境。 針對以上的現(xiàn)狀，本專利技術(shù)提供了，其操作簡單。雪花草種苗的全年供應，使得更多喜愛雪花草的消費者能有足夠的材料來造景，提高種植和銷售者的收入，從而促進觀賞水草產(chǎn)業(yè)的進一步發(fā)展。
技術(shù)實現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的在于解決當前雪花草種苗的來源，特別是為在夏季保障雪花草種苗。并提供一種快速，低成本的雪花草的組織培養(yǎng)快速繁殖的方法。 為實現(xiàn)上述目的，本專利技術(shù)采用的技術(shù)方法如下: ，包括以下步驟:(I)外植體選取與消毒， (2)培養(yǎng)基的制備，(3)不定芽誘導，⑷繼代增殖，(5)無菌生根以及(6)煉苗與移栽，所述的培養(yǎng)基的制備方法如下: (I)改良MS培養(yǎng)基的制備，配方為:用Ca(NO3)2.4H20代替原MS培養(yǎng)基中的CaCl2.2H20并添加抗壞血酸，其他組分均無變化；在改良MS培養(yǎng)基中Ca(NO3)2.4H20的濃度為300-600mg/L，抗壞血酸的濃度為3_10mg/L ； (2)制備用于不定芽誘導的培養(yǎng)基，配方為:在所述改良MS培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加6-BA、KT以及IBA ;在所述誘導培養(yǎng)基中6-BA的濃度為0.1-lmg/L，KT的濃度為0.05-0.5mg/L，IBA 的濃度為 0.1-0.5mg/L ； (3)制備用于繼代增殖的培養(yǎng)基，配方為:在所述改良MS培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加 6-BA、IBA以及GA ;在所述繼代增殖培養(yǎng)基中6-BA的濃度為1.0-5.0mg/L，IBA的濃度為0.05-0.5mg/L，GA 的濃度為 l_5mg/L ； (4)制備用于無菌生根培養(yǎng)基，配方為:在改良MS培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加6-BA和NAA ;在所述生根培養(yǎng)基中6-BA的濃度為0.05-0.5mg/L，NAA的濃度為0.5_3mg/L。 優(yōu)選的，在改良MS培養(yǎng)基中Ca(NO3)2.4Η20的濃度為456mg/L，抗壞血酸的濃度為5mg/L。 優(yōu)選的，所述用于不定芽誘導的培養(yǎng)基中6-BA的濃度為0.5mg/L，KT的濃度為0.lmg/L，IBA 的濃度為 0.2mg/L。 優(yōu)選的，在所述用于繼代增殖的培養(yǎng)基中6-BA的濃度為2.0mg/L, IBA的濃度為0.lmg/L, GA 的濃度為 3mg/L。 優(yōu)選的，在所述的用于無菌生根培養(yǎng)基中6-BA的濃度為0.lmg/L, NAA的濃度為lmg/L。 本專利技術(shù)的有益效果是: 利用本專利技術(shù)所述培養(yǎng)基對雪花草莖段的腋芽進行組織培養(yǎng)快速繁殖，有效提高繁殖系數(shù)，生產(chǎn)周期短，種植效益大大提高，能夠有效解決夏季雪花草嚴重供應不足的問題，也為種植者提供良好的經(jīng)濟效益。 【具體實施方式】 下面結(jié)合具體實施例，對本專利技術(shù)作進一步詳細的闡述，但本專利技術(shù)的實施方式并不局限于實施例表示的范圍。 實施例1 ，包括以下步驟: (I)外植體選取與消毒: ①選取雪花草幼嫩的枝條作為外植體， ②用中性洗滌劑洗滌枝條，以去除枝條表面的污垢，然后去除多余的葉片，干凈紙巾吸干表面水分， ③在超凈工作臺上，先用70%酒精浸泡10-30s，再用無菌水沖洗3-5次，每次3_5min， ④立即轉(zhuǎn)入0.1-0.3%的升未溶液中消毒8-12min，最后用無菌水洗滌3_5次，每次3-5min，得到消毒外植體； (2)改良MS培養(yǎng)基的制備: 改良MS培養(yǎng)基的配方為:用Ca (NO3) 2.4H20代替原MS培養(yǎng)基中的CaCl2.2H20并添加抗壞血酸，其他組分均無變化；其中Ca (NO3) 2.4Η20的濃度為456mg/L，抗壞血酸的濃度為 5mg/L ； (3)不定芽誘導: 將步驟(I)得到的消毒外植體切割成0.4-0.5cm長的單芽或雙芽莖段，然后接種于用于不定芽誘導的培養(yǎng)基，進行誘導培養(yǎng)18-22天，得到雪花草不定芽；誘導培養(yǎng)條件如下:溫度為26±3°C，濕度為50-80%，光照時間為14小時/天，光照強度為800_1200x ;所述用于不定芽誘導的培養(yǎng)基的配方為:在所述改良MS培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加6-BA、KT以及IBA ;其中6-BA的濃度為0.5mg/L，KT的濃度為0.lmg/L, IBA的濃度為0.2mg/L ； (4)繼代增殖: 將步驟(3)得到的雪花草不定芽接入用于繼代增殖的培養(yǎng)基，進行繼代培養(yǎng)20-25天，得到雪花草無菌苗；繼代增殖培養(yǎng)條件如下:溫度為26±3°C，濕度為50-65%，光照時間為14小時/天，光照強度為800-1200xlx ;所述用于繼代增殖的培養(yǎng)基的配方為:在所述改良MS培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加6-BA、IBA以及GA ;其中6-BA的濃度為2.0mg/L, IBA的濃度為0.lmg/L, GA的濃度為3mg/L ； (5)無菌生根: 將步驟(4)得到的雪花草無菌苗進行切繁并保持每株均有一個不定芽，然后接入用于無菌生根培養(yǎng)基中，進行生根培養(yǎng)15-20天，得到雪花草幼苗；生根培養(yǎng)條件如下:溫度為26±3°C，濕度為50-65%，光照時間為14小時/天，光照強度為800-12001x ;所述的用于無菌生根培養(yǎng)基的配方為:在改良MS培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加6-BA和NAA ;其中6-BA的濃度為0.lmg/L, NAA的濃度為lmg/L ； (6)煉苗與移栽: 步驟(5)中雪花草幼苗生長至根長1cm、苗高3cm后，將培養(yǎng)瓶瓶蓋打開，室內(nèi)煉苗培養(yǎng)5天，然后洗凈根部培養(yǎng)基，移入64孔的穴盤，放入消毒后的水池，塑料大棚，遮光率本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護點】
一種雪花草的組織培養(yǎng)快速繁殖方法，包括以下步驟：(1)外植體選取與消毒，(2)培養(yǎng)基的制備，(3)不定芽誘導，(4)繼代增殖，(5)無菌生根以及(6)煉苗與移栽，其特征在于，所述的培養(yǎng)基的制備方法如下：(1)改良MS培養(yǎng)基的制備，配方為：用Ca(NO3)2·4H2O代替原MS培養(yǎng)基中的CaCl2·2H2O并添加抗壞血酸，其他組分均無變化；在改良MS培養(yǎng)基中Ca(NO3)2·4H2O的濃度為300?600mg/L，抗壞血酸的濃度為3?10mg/L；(2)制備用于不定芽誘導的培養(yǎng)基，配方為：在所述改良MS培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加6?BA、KT以及IBA；在所述誘導培養(yǎng)基中6?BA的濃度為0.1?1mg/L，KT的濃度為0.05?0.5mg/L，IBA的濃度為0.1?0.5mg/L；(3)制備用于繼代增殖的培養(yǎng)基，配方為：在所述改良MS培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加6?BA、IBA以及GA；在所述繼代增殖培養(yǎng)基中6?BA的濃度為1.0?5.0mg/L，IBA的濃度為0.05?0.5mg/L，GA的濃度為1?5mg/L；(4)制備用于無菌生根培養(yǎng)基，配方為：在改良MS培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加6?BA和NAA；在所述生根培養(yǎng)基中6?BA的濃度為0.05?0.5mg/L，NAA的濃度為0.5?3mg/L。...
【技術(shù)特征摘要】
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：徐世強，王繼華，張木清，
申請(專利權(quán))人：廣西大學，
類型：發(fā)明
國別省市：廣西;45
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