一種黨參藥材的檢測(cè)方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)屬于中藥材質(zhì)量檢測(cè)領(lǐng)域，具體涉及一種黨參藥材的檢測(cè)方法，該檢測(cè)方法包括黨參炔苷含量的測(cè)定以及對(duì)黨參藥材農(nóng)藥殘留量的檢測(cè)。該方法不僅檢測(cè)的準(zhǔn)確度高，方法簡(jiǎn)單、快速，而且可同時(shí)完成多個(gè)檢測(cè)指標(biāo)，準(zhǔn)確率及實(shí)用效果均較好，更有利于對(duì)黨參質(zhì)量的控制，有助于提高該藥物使用的安全性和穩(wěn)定性。

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)屬于中藥材質(zhì)量檢測(cè)領(lǐng)域，具體涉及一種黨參藥材的質(zhì)量檢測(cè)方法。
技術(shù)介紹
黨參（Codonopsispilosula)，屬桔梗科（Platycodon)植物，古代以產(chǎn)于中國(guó)上 當(dāng)郡的為最名貴，故稱黨參。幾十年來(lái)，在原有研宄基礎(chǔ)上，國(guó)內(nèi)外對(duì)黨參化學(xué)成分進(jìn)行了 深入研宄，從黨參中鑒定出了 10種留醇類、21種糖苷類、5種生物堿類及含氮成分、34種揮 發(fā)油成分、13種三萜類及其他成分，還有多種人體必需的無(wú)機(jī)元素和氨基酸。 近年來(lái)，中藥領(lǐng)域的大力發(fā)展以及中藥材需求量的加大，導(dǎo)致大量偽劣藥材的上 市，其中不少偽品的農(nóng)藥殘留量嚴(yán)重超標(biāo)，給黨參藥材的質(zhì)量、用藥的安全性及有效性造成 了很大的沖擊。藥材農(nóng)藥殘留問(wèn)題日益引起世界各國(guó)的重視，國(guó)際上從1970年起開(kāi)始研宄 藥材農(nóng)藥殘留量問(wèn)題，1980年世界衛(wèi)生組織將農(nóng)藥殘留測(cè)定單獨(dú)列為檢測(cè)項(xiàng)目，近年來(lái)成 為世界性的研宄熱點(diǎn)。 中藥質(zhì)量分為外部質(zhì)量和內(nèi)在質(zhì)量。外部質(zhì)量包括藥材性狀特征、組織特征等。其 中，藥材性狀包括形狀、大小（藥材直徑和長(zhǎng)度等）、表面特征、質(zhì)地、斷面特征、氣味等；組 織特征包括藥材的組織構(gòu)造、細(xì)胞形狀及內(nèi)含物等。內(nèi)在質(zhì)量包括浸出物、化學(xué)成分（有效 成分、特征成分）檢測(cè)和控制、農(nóng)藥及重金屬殘留分析；重金屬分析包括鉛（Pb)、鎘（Cd)、汞 (Hg)、砷（As)、銅（Cu)及重金屬總量的定量和限量測(cè)定，農(nóng)藥殘留量分析包括有機(jī)氯、有機(jī) 磷、擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的測(cè)定。 而藥典中黨參的檢測(cè)項(xiàng)目只有性狀、顯微鑒別、薄層和浸出物鑒別，指標(biāo)比較單 一，不利于黨參藥材的質(zhì)量控制，不利于黨參使用的安全性和穩(wěn)定性。因此，建立一種新的 黨參藥材的質(zhì)量檢測(cè)方法具有重要的意義。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
為此，本專利技術(shù)所要解決的技術(shù)問(wèn)題在于現(xiàn)有技術(shù)中黨參藥材檢測(cè)指標(biāo)單一，不利 于黨參藥材的質(zhì)量控制，進(jìn)而提供一種新的黨參藥材的檢測(cè)方法。 為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本專利技術(shù)是通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的： 本專利技術(shù)的黨參藥材的檢測(cè)方法，該方法包括如下黨參炔苷的含量測(cè)定步驟以及農(nóng) 藥殘留量的測(cè)定步驟，其中， A、黨參炔苷的含量測(cè)定包括如下步驟： (1)精密稱取干燥至恒重的黨參炔苷對(duì)照品4. 82mg，加入甲醇定容至10mL，得濃 度為0. 482mg/mL;精密移取此對(duì)照品溶液5.OmL，加入甲醇定容至10mL，得濃度為0. 241mg/ mL的對(duì)照品溶液； ⑵精密稱定待測(cè)黨參藥材粉末2g，精密加入甲醇25mL，稱定重量，超聲提取 30min，放置至室溫，稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，作為供試品溶 液； (3)照高效液相色譜法試驗(yàn)，選用ZORBAXSB-C18色譜柱，以體積比28% :72%的 乙腈-水為流動(dòng)相；控制流速為1.OmL/min，柱溫為30°C，269nm波長(zhǎng)條件下進(jìn)行檢測(cè)；分別 精密吸取對(duì)照品、供試品溶液各10UL注入液相色譜儀，測(cè)定； B、農(nóng)藥殘留量測(cè)定包括以下步驟： (1)精密稱取三苯基磷酸酯適量，加丙酮制成每lmL含100yg三苯基磷酸酯的溶 液，作為內(nèi)標(biāo)貯備液； 分別精密量取各農(nóng)藥對(duì)照品貯備溶液lmL及上述內(nèi)標(biāo)貯備液lmL，加丙酮定容至 100mL，作為混合對(duì)照品貯備溶液；分別精密量取適量，加乙腈定容制成20-1000ng/mL的不 同濃度的溶液，作為混合對(duì)照品溶液； 另取核糖酸內(nèi)酯適量，加乙腈溶解制成每lmL含20mg核糖酸內(nèi)酯的溶液，另取山 梨醇適量，加水溶解制成每lmL含山梨醇10mg的溶液；分別精密量取上述核糖酸內(nèi)酯、山梨 醇溶液各lmL混勾，加乙腈定容至10mL，作為分析保護(hù)劑； (2)精密稱取待測(cè)藥材細(xì)粉10g，并加入氯化鈉lg混勾，精密加入丙酮100mL，冰 浴超聲處理30分鐘，離心，將上清液迅速移入裝有l(wèi)g無(wú)水硫酸鈉的具塞錐形瓶中，放置30 分鐘；隨后精密量取上述溶液60mL減壓濃縮至近干，并加入體積比為1 :1的環(huán)已烷-乙酸 乙酯溶液溶解樣品并定容至10mL，過(guò)濾后取濾液經(jīng)GPC凝膠滲透色譜凈化，以體積比為1 : 1的環(huán)已烷-乙酸乙酯溶液為流動(dòng)相洗脫，收集洗脫液，移入KD瓶中，減壓濃縮至近干； 向上述樣品中加入體積比為1 :1的乙酸乙酯-丙酮混合溶液5mL溶解，并轉(zhuǎn)移至 石墨碳-氨基混合固相萃取小柱上，以體積比為1 :1的乙酸乙酯-丙酮混合溶液15mL洗 脫，收集洗脫液，氮吹至近干，隨后加入上述內(nèi)標(biāo)貯備液5yL，加乙腈定容至lmL，作為供試 品溶液； (3)精密量取上述各濃度混合對(duì)照品溶液及供試品溶液各400yL，并分別加入上 述分析保護(hù)劑100yL混勻，隨后分別精密吸取1yL，進(jìn)行氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀測(cè)定；其 中， 氣相色譜分析條件為：取規(guī)格為30mX0. 25mmX0. 25um的彈性石英毛細(xì)管柱 DB17ms，以高純氦氣為載氣，柱流速1. 3mL/分鐘，進(jìn)樣量1yL，采用高壓不分流進(jìn)樣，設(shè)置 進(jìn)樣口溫度為230°C，升溫程序具體為：初始溫度60°C，以30°C/分鐘升至120°C、以10°C/ 分鐘升至200°C、以2°C/分鐘升至230°C、以30°C/分鐘升至300°C，并保持7分鐘； EI源質(zhì)譜測(cè)定的條件為：設(shè)置電子能量70eV，離子源溫度230°C，接口溫度250°C。 本專利技術(shù)的黨參藥材的檢測(cè)方法，農(nóng)藥殘留量測(cè)定中，上述GPC凝膠滲透色譜凈化 步驟的條件具體為：填料為Bio-BeadsS-X3 200-400目，凈化柱為2. 5mmX40cm，具體洗脫 參數(shù)為凈化去雜900s，目標(biāo)物收集1200s，柱子清洗300s。 本專利技術(shù)的黨參藥材的檢測(cè)方法，農(nóng)藥殘留量測(cè)定中，上述農(nóng)藥對(duì)照品包括敵敵畏、 甲胺磷、乙酰甲胺磷、四氯硝基苯、六氯苯、a-六六六、0 -六六六、y-六六六、6 -六六六、 氧化樂(lè)果、二嗪磷、五氯硝基苯、久效磷、地蟲硫磷、磷胺I、樂(lè)果、七氯、五氯苯胺、百菌清、 甲基毒死蜱、艾氏劑、克菌丹、磷胺II、甲基對(duì)硫磷、甲基嘧啶磷、甲基五氯苯基硫醚、甲霜 靈、三唑酮、毒死蜱、馬拉硫磷、殺螟硫磷、對(duì)硫磷、二甲戊靈、順式環(huán)氧七氯、反式環(huán)氧七 氯、三唑醇A、三唑醇B、反式氯丹、順式硫丹、順式氯丹、反式硫丹、pp' -DDE、PP' -DDD、 OP' -DDT、PP' -DDT、狄氏劑、殺撲磷、異狄氏劑、乙硫磷、三苯基磷酸酯、聯(lián)苯菊酯、硫丹硫 酸酯、異菌脲、甲氰菊酯、三氯殺螨醇、氯氟氰菊酯、甲氧DDT、三氯殺螨砜、伏殺硫磷、氯菊酯 1、氯菊酯2、氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯。 本專利技術(shù)的黨參藥材的檢測(cè)方法，黨參炔苷含量測(cè)定中，上述供試品的超聲條件為 功率250W，頻率40kHz。 本專利技術(shù)的黨參藥材的檢測(cè)方法，黨參炔苷含量測(cè)定中，上述待測(cè)藥材的粒徑為 180-2000um。 本專利技術(shù)的黨參藥材的檢測(cè)方法，黨參炔苷含量測(cè)定中，上述黨參炔苷對(duì)照品的干 燥步驟為用五氧化二磷減壓干燥12小時(shí)以上。 本專利技術(shù)的黨參藥材的檢測(cè)方法，農(nóng)藥殘留量測(cè)定中，上述待測(cè)藥材的粒徑為 180-2000um。 本專利技術(shù)上述方法通過(guò)對(duì)黨參藥材所含的黨參炔苷含量的測(cè)定以及對(duì)黨參藥材農(nóng) 藥殘留量的測(cè)定，進(jìn)行黨參藥材真?zhèn)蝺?yōu)劣的判定標(biāo)準(zhǔn)。本專利技術(shù)通過(guò)高效液相色譜法檢測(cè)黨 參炔苷的含量，不僅準(zhǔn)確且簡(jiǎn)單易行。本專利技術(shù)通過(guò)氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用的方式檢測(cè)藥材的 殘留農(nóng)藥量，不僅檢測(cè)的本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種黨參藥材的檢測(cè)方法，其特征在于，該方法包括如下黨參炔苷的含量測(cè)定步驟以及農(nóng)藥殘留量的測(cè)定步驟，其中，A、黨參炔苷的含量測(cè)定包括如下步驟：(1)精密稱取干燥至恒重的黨參炔苷對(duì)照品4.82mg，加入甲醇定容至10mL，得濃度為0.482mg/mL；精密移取此對(duì)照品溶液5.0mL，加入甲醇定容至10mL，得濃度為0.241mg/mL的對(duì)照品溶液；(2)精密稱定待測(cè)黨參藥材粉末2g，精密加入甲醇25mL，稱定重量，超聲提取30min，放置至室溫，稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，作為供試品溶液；(3)照高效液相色譜法試驗(yàn)，選用ZORBAX?SB?C18色譜柱，以體積比28％：72％的乙腈?水為流動(dòng)相；控制流速為1.0mL/min，柱溫為30℃，269nm波長(zhǎng)條件下進(jìn)行檢測(cè)；分別精密吸取對(duì)照品、供試品溶液各10μL注入液相色譜儀，測(cè)定；B、農(nóng)藥殘留量測(cè)定包括以下步驟：(1)精密稱取三苯基磷酸酯適量，加丙酮制成每1mL含100μg三苯基磷酸酯的溶液，作為內(nèi)標(biāo)貯備液；分別精密量取各農(nóng)藥對(duì)照品貯備溶液1mL及所述內(nèi)標(biāo)貯備液1mL，加丙酮定容至100mL，作為混合對(duì)照品貯備溶液；分別精密量取適量，加乙腈定容制成20?1000ng/mL的不同濃度的溶液，作為混合對(duì)照品溶液；另取核糖酸內(nèi)酯適量，加乙腈溶解制成每1mL含20mg核糖酸內(nèi)酯的溶液，另取山梨醇適量，加水溶解制成每1mL含山梨醇10mg的溶液；分別精密量取上述核糖酸內(nèi)酯、山梨醇溶液各1mL混勻，加乙腈定容至10mL，作為分析保護(hù)劑；(2)精密稱取待測(cè)藥材細(xì)粉10g，并加入氯化鈉1g混勻，精密加入丙酮100mL，冰浴超聲處理30分鐘，離心，將上清液迅速移入裝有1g無(wú)水硫酸鈉的具塞錐形瓶中，放置30分鐘；隨后精密量取上述溶液60mL減壓濃縮至近干，并加入體積比為1：1的環(huán)已烷?乙酸乙酯溶液溶解樣品并定容至10mL，過(guò)濾后取濾液經(jīng)GPC凝膠滲透色譜凈化，以體積比為1：1的環(huán)已烷?乙酸乙酯溶液為流動(dòng)相洗脫，收集洗脫液，移入KD瓶中，減壓濃縮至近干；向上述樣品中加入體積比為1：1的乙酸乙酯?丙酮混合溶液5mL溶解，并轉(zhuǎn)移至石墨碳?氨基混合固相萃取小柱上，以體積比為1：1的乙酸乙酯?丙酮混合溶液15mL洗脫，收集洗脫液，氮吹至近干，隨后加入所述內(nèi)標(biāo)貯備液5μL，加乙腈定容至1mL，作為供試品溶液；(3)精密量取上述各濃度混合對(duì)照品溶液及供試品溶液各400μL，并分別加入所述分析保護(hù)劑100μL混勻，隨后分別精密吸取1μL，進(jìn)行氣相色譜?質(zhì)譜聯(lián)用儀測(cè)定；其中，所述氣相色譜分析條件為：取規(guī)格為30m×0.25mm×0.25um的彈性石英毛細(xì)管柱DB17ms，以高純氦氣為載氣，柱流速1.3mL/分鐘，進(jìn)樣量1μL，采用高壓不分流進(jìn)樣，設(shè)置進(jìn)樣口溫度為230℃，升溫程序具體為：初始溫度60℃，以30℃/分鐘升至120℃、以10℃/分鐘升至200℃、以2℃/分鐘升至230℃、以30℃/分鐘升至300℃，并保持7分鐘；所述EI源質(zhì)譜測(cè)定的條件為：設(shè)置電子能量70eV，離子源溫度230℃，接口溫度250℃。...

【技術(shù)特征摘要】

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：李士博，李波，韓斌，李登鵬，陳杰，趙建邦，何祿仁，趙端瑋，宋平順，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：甘肅中天藥業(yè)有限責(zé)任公司，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：甘肅;62