一種含LncRNA的藥物組合物及其用途制造技術

本發明專利技術涉及一種含LncRNA的藥物組合物及其用途，該藥物組合物為LncRNA重組病毒載體或重組質粒載體包括水溶性填充劑、pH調節劑、穩定劑、注射用水和滲透壓調節劑；其重組病毒的制備以人基因組為模板，PCR擴增得到LncRNA序列，亞克隆連入腺病毒載體系統，構建LncRNA過表達病毒；該藥物組合物用于預防和治療腫瘤，促進腫瘤細胞凋亡或降低腫瘤細胞的成瘤能力。本發明專利技術原料易得，安全可靠，其制成的藥物組合物成分合理，療效明顯，應用范圍廣。

【技術實現步驟摘要】

： 本專利技術屬于醫藥生物
，涉及一種內源性長鏈非編碼RNA的新藥及其用 途，特別是一種含LncRNA的藥物組合物及其用途。
技術介紹
： 目前，腫瘤已是危害人類健康和生命的重大殺手，全世界有腫瘤病人約1400萬， 我國每年發病人數約200萬，死亡140-150萬，且發病人數和死亡人數呈現不斷增長的趨 勢，腫瘤已超過心腦血管疾病成為威脅人類健康的頭號殺手。而常用的腫瘤化療及放療是 通過誘導腫瘤細胞凋亡而達到治療腫瘤的目的。細胞凋亡，又稱程序性細胞死亡，是細胞在 特定的內源和外源信號誘導下，遵循自身的程序，發生的受遺傳調控的主動的高度有序的 自我結束生命的過程，在生物體的進化、維持內環境的穩定以及系統生長發育中起著重要 的作用；異常的細胞凋亡將會引起多種疾病的發生，例如過度的細胞凋亡會引發心血管疾 病，神經退行性疾病等，而細胞凋亡不足則會誘發腫瘤。但是細胞的凋亡過程調控異常，可 抑制化療藥物誘導的凋亡，導致耐藥。治療后耐藥性的形成導致對抗腫瘤藥物的敏感性降 低，從而導致了治療的失敗，因此，化療藥物在治療腫瘤過程中的耐藥性問題已成為目前臨 床治療中的重大難題。 隨著科技的發展和腫瘤細胞信號傳導途經研宄的不斷深入，以生物靶分子為基礎 的腫瘤生物治療成為研宄抗腫瘤藥物的熱點；腫瘤的生物療法以分子生物學、細胞生物學 和分析免疫學為基礎，與手術放療化療三大常規療法作用相互補充，大幅提高腫瘤的治療 療效；將生物技術與放療化療結合起來，引入促凋亡的分子可以逆轉腫瘤細胞產生的耐藥 性，增強腫瘤細胞對抗腫瘤藥物的敏感性，從而避免了傳統的放療化療方法引起的耐藥性 和毒副作用的缺點，達到治療腫瘤的效果。本領域迫切需要了解促腫瘤細胞凋亡相關的因 子，將其作為藥物治療的靶分子應用于臨床的治療中，因此尋找與促腫瘤細胞凋亡相關的 因子與放療化療結合治療腫瘤疾病，具有廣闊的前景。 通常，IncRNA是指大于200個核苷酸的非編碼RNA，與其他非編碼RNA相比較， IncRNA具有類型多、作用模式多和數量多的特點；IncRNA可以通過改變染色質的結構來調 節基因的表達，也可以通過順式或反式方法來沉默或激活一個基因或一個基因家族，甚至 整條染色體。由于IncRNA功能很廣泛，所以IncRNA與疾?。ㄌ貏e是腫瘤）的關系已經引 起了人們的重視。
技術實現思路
： 本專利技術的目的在于克服現有技術存在的缺點，尋求制備一種能夠促進腫瘤細胞凋 亡的含LncRNA核苷酸序列的藥物組合物及其在治療腫瘤中的用途。 為了實現上述目的，本專利技術涉及的藥物組合物包括LncRNA核苷酸序列重組質粒 載體或重組病毒，其LncRNA核苷酸序列如下列SEQ ID NO: 1所示： SEQ ID NO: 1: UUACAAGUGAACUUUCUUUCCUGUUUUAAAGCCUUUUAAAUAAACUUCCACUCCUGUGCUGAAACUUGC CUUAGUCUUUUUUUCUGCUUUAUGCCCCUCA⑶CGAAUUCUUUCAUCUGAGGAGGCAAGAAUUGAAGUUGCUGCAGA CGCCUGUGGAUUCACCACAAGUACAUUGGAGUAACCACUGGGAACAACAGGUUGCCUUAGAAGCUUUGCAGGUUGUU UUGUUUUUUUGUUUGUUUGUUUUUUUGAGACGGG⑶CUCACUU腳CGCCCAGGUUUGUUGCCCAGGCUGGAGUGCA GUGGCGCAAUCUCGGCUCUCCGCAACCUCUGCCUCCCGGGCUCAAGUGAUCCUCCCACCUCGGCUUCCCGAGUACCU GGGACUACAGGCAUGCACCACCACACCCGGCUAAUUUUAAUUUUUAUUUUGUAUUUUUAGUAGAGUUGGGGUUUCAC CAUGUUCCCAGCUG⑶CUUGAACUCUUGAGGUGAAGCAAUCCGCCCACCUCAGCCUCCCAAAGUGCUGAGAUUACAG ACGUGAGCCAUCGCGCCUAGCCUUGCAAGUUGUUUUUUGUUGAACAGAAGAAGCUAUUCAAAAAUGUCCAGGACUCU GUUAUUUAUUCAGCAAGCUUACAAAGCCAUCUUUGAUUGACUGAUUCUUUGACAAUGACUAUCUGGAUGACACAGGA AGGAUGCAAUUCUGGCCUUGGAGAGAAAACUUGCAAGGAAAGGAACAUGUUUGAAUUUCAGAUGUGUUCCUCAAUGA AUCACGAUCUUCAGGGAAUGUUUCAGGUGGAGGAAGGGGCUCUUGGUCAAUGAGCCUGAAGACUGCAUGGCAACCUU UGCCAGCUUUUGGCCUGAAAA⑶CAACUU⑶UCAUUUGAGAUAAUUCCUGUUUUAUAUACUUUCAUUUGAGAUAUUC CUGGUGUAUCAACUGAAACAAAAUCUAUGAAAUAUCAGAUUCACAAAAAUACAUUUUGAAUAUUGAACGUGGAAAAA AAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA ； ^AS @ 組為模板，PCR擴增得到LncRNA序列，亞克隆連入腺病毒載體系統，構建LncRNA過表達病 毒；所述PCR的引物序列為： 上游引物：5, -UTACAAGTGAACTTTCTTTCCTGTT-3,， 下游引物：5' -TTCCACGTTCAATATTCAAAATGTA-3'。 本專利技術所述腺病毒載體系統使用Ambion公司的pSilencer Adeno I. O-CMV系統。 本專利技術涉及的重組病毒載體或重組質粒載體能在治療宮頸癌降低腫瘤細胞的成 瘤能力的藥物中應用；所述重組病毒為含有LncRNA序列的重組腺病毒載體。 本專利技術涉及的藥物組合物為LncRNA重組病毒載體或重組質粒載體包括水溶性填 充劑、pH調節劑、穩定劑、注射用水和滲透壓調節劑； 本專利技術所述水溶性填充劑包括甘露醇、低分子右旋糖苷、山梨醇、聚乙二醇、葡萄 糖、乳糖和半乳糖中的一種或多種； 本專利技術所述pH調節劑為生理可接受的酸、堿和/或鹽；所述酸選自枸櫞酸、磷酸、 乳酸、酒石酸和/或鹽酸中的一種或多種；所述堿選自氫氧化鉀、氫氧化鈉和/或氫氧化銨 中的一種或多種；所述鹽選自碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸銨鹽、碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、碳酸氫銨鹽 中的一種或多種。 本專利技術所述穩定劑為EDTA_2Na、硫代硫酸鈉、焦亞硫酸鈉、亞硫酸鈉、磷酸氫二鉀、 碳酸氫鈉、碳酸鈉、精氨酸、谷氨酸、聚乙二醇6000、聚乙二醇4000和十二烷基硫酸鈉或三 羥甲基氨基甲烷中的一種或多種；所述滲透壓調節劑為氯化鈉和/或氯化鉀。 本專利技術所述的藥物組合物為片劑、分散片、腸溶片、咀嚼片、口崩片、膠囊、糖衣劑、 顆粒劑、干粉劑、口服溶液劑、注射用小水針劑、注射用凍干粉針、大輸液或小輸液。 本專利技術涉及的藥物組合物構成的試劑盒中包括感染滴度IO16PFU的過表達LncRNA 的重組腺病毒、生理鹽水和磷酸鹽緩沖液。 本專利技術所述的藥物組合物用于預防和/或治療腫瘤、本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種含LncRNA的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物包括LncRNA核苷酸序列重組質粒載體或重組病毒，其LncRNA核苷酸序列是序列表中SEQ?ID?NO:1所示的序列，其重組病毒的制備以人基因組為模板，PCR擴增得到LncRNA序列，亞克隆連入腺病毒載體系統，構建LncRNA過表達病毒；所述PCR的引物序列為：上游引物：5'?UTACAAGTGAACTTTCTTTCCTGTT?3'，下游引物：5'?TTCCACGTTCAATATTCAAAATGTA?3'；所述腺病毒載體系統使用Ambion公司的pSi?lencer?Adeno?1.0?CMV系統；所述重組病毒為含有LncRNA序列的重組腺病毒載體；所述藥物組合物為LncRNA重組病毒載體或重組質粒載體包括水溶性填充劑、pH調節劑、穩定劑、注射用水和滲透壓調節劑。

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：王昆，李培峰，
申請(專利權)人：青島大學，
類型：發明
國別省市：山東;37