【技術實現步驟摘要】
【技術保護點】
一種獲得邳半夏轉基因愈傷組織的遺傳轉化方法，其特征在于利用邳半夏葉柄作為外植體誘導愈傷組織，并經過培養獲得愈傷，用根癌農桿菌介導，將帶有GUS基因的pCAMBIA1301質粒導入邳半夏愈傷組織，PCR檢測外緣潮霉素磷酸轉移酶基因的整合情況，用組織化學方法檢測GUS基因在組織中的表達情況，獲得邳半夏的轉基因愈傷組織；具體步驟為：??（1）邳半夏愈傷組織的誘導培養：選擇幼嫩的葉柄為愈傷組織誘導用外植體，在愈傷組織誘導培養基上進行培養，在葉柄被切開的部位逐漸產生白色的愈傷組織，葉柄不斷膨大；上述愈傷組織誘導培養基是以MS培養基為基礎，再添加激素6?BA和NAA而組成；??（2）邳半夏愈傷組織的誘導培養：將葉柄誘導的白色愈傷轉接入胚性愈傷誘導培養基上，獲得致密的、硬度增加的胚性愈傷組織；該胚性愈傷誘導培養基是以MS培養基為基礎，再添加激素2，4?D、6?BA和KT而組成；??（3）遺傳轉化：利用根癌農桿菌介導法，將含GUS基因的植物表達載體pCAMBIA1301轉化根癌農桿菌，以邳半夏胚性愈傷組織為受體進行遺傳轉化；??（4）抗性胚性愈傷組織的脫菌、篩選和增殖培養：經過遺傳轉化，然后在恢復培養...
【技術特征摘要】
【專利技術屬性】
技術研發人員：曹小迎，蔣繼宏，張文娟，張盼盼，陳集雙，
申請(專利權)人：江蘇師范大學，
類型：發明
國別省市：江蘇;32
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