荸薺皮提取槲皮素的方法技術

本發明專利技術的荸薺皮提取槲皮素的方法，屬于天然有機化學領域，其特征在于，以丙酮水溶液為溶劑，提取荸薺皮中的槲皮素，提取物用乙酸乙酯萃取后，萃取物經中壓MCI柱色譜和聚酰胺柱色譜分離，然后用Sephadex?LH-20凝膠和硅膠柱色譜純化，獲得含量在95％以上的槲皮素產品。本發明專利技術開辟了從天然植物中提取分離槲皮素的新途徑，分離效果好，產品純度高，使一貫被視為廢棄物的荸薺皮變廢為寶，所選用的層析材料MCI、聚酰胺和凝膠均可反復使用，原料易得，資源豐富，生產成本低，可進行規模化生產，滿足醫藥工業需要。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術屬于天然有機化學領域，涉及一種槲皮素的提取分離方法，特別是涉及一種從荸薺皮中提取分離槲皮素的方法。
技術介紹
槲皮素(Quercetin)，化學名為3,5,7,3′,4′-五羥基黃酮，又名櫟精、槲皮黃素，是植物界分布最廣泛的黃酮醇類化合物，大約分布在68％的植物中，常存在于植物的花、葉、果實之中。中草藥如槐米、紅八角蓮、紅旱蓮、紅麻葉、銀杏中含有大量的槲皮素；食物中洋蔥、葡萄、蘋果、紅酒以及綠茶中也富含這種成分。槲皮素具有良好的生物活性，如抗腫瘤、抗氧化、抗炎、抗病毒、抗菌等活性和祛痰、止咳、抗血小板聚集、降血壓、降血脂、抗張冠狀動脈等作用，臨床上用于治療慢性支氣管炎，對冠心病及高血壓患者也有輔助治療作用。制備槲皮素的主要方法為提取法和蘆丁水解法，以蘆丁水解法較為常用。公開號為CN?102382093A的中國專利技術專利公開了一種用蘆丁水解制備槲皮素的生產工藝。該方法以蘆丁為原料，經水解，過濾，洗滌和精制等工序，獲得槲皮素，具有生產工藝簡單，轉化率高，生產成本低，產品純度高等特點，但其原料為蘆丁，需要從天然植物中提取，并不容易獲得，且酸水解蘆丁容易產生雜質如山奈酚和異鼠李素，該兩個雜質形成苷元后很難通過精制的方法降低含量。荸薺(Eleocharis?tuberosa)，又稱馬蹄，屬莎草科多年生淺水草本植物荸薺的地下球莖，我國大部分地區都有栽培。其中，廣西荸薺產量占全國70％，賀州荸薺產量占廣西70％。據文獻報道，荸薺有抗菌、抗腫瘤、防治呼吸道疾病、利腸通便和利尿排淋等作用；臨床上可用于治療咽喉疼痛、痰熱咳嗽、熱病煩渴、小便不利、痢疾等癥。研究表明，荸薺的活性物質主要富集在果皮和果肉之間。在荸薺加工過程中，被丟棄的荸薺皮質量約占新鮮荸薺質量的25％，資源非常豐富。我們在研究中發現，荸薺皮中含有豐富的槲皮素，但目前未見從荸薺皮中提取分離該化合物的文獻報道。
技術實現思路
本專利技術的目的在于：提出一種荸薺皮提取槲皮素的方法。本專利技術的荸薺皮提取槲皮素的方法，應用常規提取法和色譜技術從荸薺皮中提取分離槲皮素，具體步驟如下：(1)將新鮮的荸薺皮風干，粉碎，備用；以重量計，稱取荸薺皮粉末1份，加入提取罐中，每次加入4-10份70％體積百分比的丙酮水溶液，在25℃下浸泡24h，浸泡3次，過濾，合并濾液，減壓濃縮至膏狀，獲得提取物。(2)以重量計，將提取物1份分散在5份水中制成懸濁液，用1-2倍水體積的乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液，減壓濃縮至干，獲得萃取物。(3)往萃取物中加入甲醇至完全溶解，用2-4倍萃取物質量的聚酰胺拌樣，將甲醇揮發至干，裝柱，連接MCI柱進行中壓分離，以40-100％體積百分比的甲醇水溶液為流動相梯度洗脫，薄層色譜法檢測，收集合并流動相濃度為65-69％百分比的洗脫液，減壓濃縮，獲得粗品A。(4)往粗品A中加入甲醇至完全溶解，用2-4倍質量的聚酰胺拌樣，將甲醇揮發至干，轉入聚酰胺色譜柱進行分離，用體積比為3:1-1:1的氯仿-甲醇溶液洗脫，薄層色譜法檢測，收集合并含有槲皮素的洗脫液，減壓濃縮，獲得粗品B。(5)以重量計，將粗品B1份溶于4-8份甲醇中，加入等量甲醇體積的水制成懸濁液，用Sephadex?LH-20凝膠色譜柱純化，用甲醇洗脫，薄層色譜法檢測，收集合并含有槲皮素的洗脫液，減壓濃縮，獲得粗品C。(6)將所得粗品C經硅膠柱色譜純化，用體積比為9:1-7:3的氯仿-丙酮洗脫，收集合并含有槲皮素的洗脫液，減壓濃縮，干燥，獲得含量達95％以上的槲皮素產品。2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(3)中的所述的MCI柱規格為70×460mm，填充材料為MCI-gel?CHP-20P，柱色譜條件為：柱壓為80Psi，流動相流速為50mL/min，檢測波長為245nm；所述的流動相為40-100％體積百分比的甲醇水溶液。3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(4)中所述的聚酰胺，規格為200-300目；所用洗脫液為體積比為3:1-1:1的氯仿-甲醇溶液。本專利技術與現有技術相比其有益效果是：設計科學合理，明開辟了從天然植物中提取分離槲皮素的新途徑，分離效果好，產品純度高，使一貫被視為廢棄物的荸薺皮變廢為寶，所選用的層析材料MCI、聚酰胺和凝膠均可反復使用，原料易得，資源豐富，生產成本低，可進行規模化生產，滿足醫藥工業需要。具體實施方式下面結合實施例對本專利技術作進一步說明，但本專利技術的實施方式不限于此。本專利技術的荸薺皮提取槲皮素的方法，應用常規提取法和色譜技術從荸薺皮中提取分離槲皮素，具體步驟如下：(1)將新鮮的荸薺皮風干，粉碎，備用。稱取一定質量(g)的荸薺皮粉末加入提取罐中，再加入4-10倍體積(mL)的70％體積百分比的丙酮水溶液，在25℃下浸泡24h，浸泡3次，過濾，合并濾液，減壓濃縮至膏狀，獲得提取物。(2)將提取物(g)分散在5倍體積(mL)的水中制成懸濁液，用1-2倍水體積的乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液，減壓濃縮至干，獲得萃取物。(3)往萃取物中加入甲醇至完全溶解，用2-4倍萃取物質量的聚酰胺拌樣，將甲醇揮發至干，裝柱，連接MCI柱進行中壓分離，柱規格為70mm×460mm，填充材料為日本三菱化學公司生產的MCI-gel?CHP-20P，柱色譜條件為：柱壓為80Psi，流動相流速為50mL/min，檢測波長為254nm，以40-100％體積百分比的甲醇水溶液為流動相梯度洗脫，根據檢測峰變化情況調節洗脫液濃度，按每份500mL收集，薄層色譜法檢測，收集合并流動相濃度為65-69％百分比的洗脫液，減壓濃縮，獲得粗品A。(4)往粗品A中加入甲醇至完全溶解，用2-4倍質量的聚酰胺拌樣，將甲醇揮發至干，轉入聚酰胺色譜柱進行分離，用體積比為3:1-1:1的氯仿-甲醇溶液洗脫，薄層色譜法檢測，收集合并含有槲皮素的洗脫液，減壓濃縮，獲得粗品B。(5)將粗品B(g)溶于4-8倍體積(mL)的甲醇中，加入等體積的水制成懸濁液，用瑞典Amersham?Pharmacia?Biotech公司生產的Sephadex?LH-20凝膠色譜柱純化，用甲醇洗脫，薄層色譜法檢測，收集合并含有槲皮素的洗脫液，減壓濃縮，獲得粗品C。(6)將所得粗品C經硅膠柱色譜純化，用體積比為9:1-7:3的氯仿-甲醇洗脫，收集合并含有槲皮素的洗脫液，減壓濃縮，干燥，獲得含量達95％以上的槲皮素產品。實施例1將8kg新鮮荸薺皮粉末加入在提取罐中，加本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種荸薺皮提取槲皮素的方法，其具體步驟如下：(1)將新鮮的荸薺皮風干，粉碎，備用；以重量計，稱取荸薺皮粉末1份，加入提取罐中，每次加入4?10份70％體積百分比的丙酮水溶液，在25℃下浸泡24h，浸泡3次，過濾，合并濾液，減壓濃縮至膏狀，獲得提取物。(2)以重量計，將提取物1份分散在5份水中制成懸濁液，用1?2倍水體積的乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液，減壓濃縮至干，獲得萃取物。(3)往萃取物中加入甲醇至完全溶解，用2?4倍萃取物質量的聚酰胺拌樣，將甲醇揮發至干，裝柱，連接MCI柱進行中壓分離，以40?100％體積百分比的甲醇水溶液為流動相梯度洗脫，薄層色譜法檢測，收集合并流動相濃度為65?69％百分比的洗脫液，減壓濃縮，獲得粗品A。(4)往粗品A中加入甲醇至完全溶解，用2?4倍質量的聚酰胺拌樣，將甲醇揮發至干，轉入聚酰胺色譜柱進行分離，用體積比為3:1?1:1的氯仿?甲醇溶液洗脫，薄層色譜法檢測，收集合并含有槲皮素的洗脫液，減壓濃縮，獲得粗品B。(5)以重量計，將粗品B1份溶于4?8份甲醇中，加入等量甲醇體積的水制成懸濁液，用Sephadex?LH?20凝膠色譜柱純化，用甲醇洗脫，薄層色譜法檢測，收集合并含有槲皮素的洗脫液，減壓濃縮，獲得粗品C。(6)將所得粗品C經硅膠柱色譜純化，用體積比為9:1?7:3的氯仿?丙酮洗脫，收集合并含有槲皮素的洗脫液，減壓濃縮，干燥，獲得含量達95％以上的槲皮素產品。...

【技術特征摘要】
1.一種荸薺皮提取槲皮素的方法，其具體步驟如下：
(1)將新鮮的荸薺皮風干，粉碎，備用；以重量計，稱取荸薺皮粉末1份，加
入提取罐中，每次加入4-10份70％體積百分比的丙酮水溶液，在25℃下浸泡24h，
浸泡3次，過濾，合并濾液，減壓濃縮至膏狀，獲得提取物。
(2)以重量計，將提取物1份分散在5份水中制成懸濁液，用1-2倍水體積的
乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液，減壓濃縮至干，獲得萃取物。
(3)往萃取物中加入甲醇至完全溶解，用2-4倍萃取物質量的聚酰胺拌樣，將
甲醇揮發至干，裝柱，連接MCI柱進行中壓分離，以40-100％體積百分比的甲醇水
溶液為流動相梯度洗脫，薄層色譜法檢測，收集合并流動相濃度為65-69％百分比的
洗脫液，減壓濃縮，獲得粗品A。
(4)往粗品A中加入甲醇至完全溶解，用2-4倍質量的聚酰胺拌樣，將甲醇揮
發至干，轉入聚酰胺色譜柱進行分離，用體積比為3:1-1:1的氯仿-甲醇溶液洗脫，
薄層色譜法檢測，收集合并含有槲皮...

【專利技術屬性】
技術研發人員：劉珊，羅楊合，李行任，商飛飛，楊杰龍，
申請(專利權)人：賀州學院，
類型：發明
國別省市：廣西;45