免疫原性WT-1肽及其使用方法技術

本發明專利技術提供肽、免疫原性組合物和疫苗，以及治療表達WT-1的癌癥、降低表達WT-1的癌癥的發病率和誘導針對表達WT-1的癌癥的免疫應答的方法，包括來源于WT-1蛋白的肽。

【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】免疫原性WT-1肽及其使用方法政府支持本工作得到國立衛生研究院基金CA23766，CA59350和CA08748的支持。美國政府享有本專利技術的某些權利。專利
本專利技術提供肽，包括所述肽的組合物和疫苗，以及治療表達WT-1的癌癥、降低表達WT-1的癌癥的發病率和誘導針對表達WT-1的癌癥的免疫應答的方法，包括施用所述肽、組合物或疫苗。專利技術背景維爾姆斯瘤(WT)，在新生兒中以1/10000頻率發生的小兒腎母細胞瘤，數年來已成為大量臨床和基礎研究的內容。該腫瘤是胚胎來源的；其通常在5歲之前的兒童中檢測到，可以在單側或雙側發生。當發育中腎的致密后腎間充質細胞不能正確分化時，WT出現。維爾姆斯瘤1(WT-1)腫瘤抑制基因在WT病因學中的參與顯示遺傳變異可以對發育和腫瘤發生均產生影響。維爾姆斯瘤蛋白I(WT-1)是在正常個體發育期間在諸如胎兒腎、睪丸和卵巢中表達的鋅指轉錄因子。在成人中，WT-1限于造血干細胞、肌上皮祖細胞、腎足細胞以及睪丸和卵巢中的一些細胞中的低水平表達。最近證實了WT-1在數種白血病類型中過表達，表明WT-1將成為各種癌癥免疫療法的有吸引力的靶標。專利技術概述本專利技術提供肽、組合物和免疫原性組合物諸如包括免疫原性肽的疫苗，以及治療表達WT-1的癌癥、降低表達WT-1的癌癥的發病率，和誘導針對表達WT-1的癌癥的免疫應答的方法，包括施用免疫原性肽。在一個實施方案中，本專利技術提供一種分離的WT-1肽，其具有由序列SEQIDNO:1-160，162-185，190，191和193中任一項組成的氨基酸(AA)序列。在一個實施方案中，本專利技術提供一種分離的HLAI類結合WT-1肽，其具有由序列SEQIDNO:142，143，144，145，146，147，148，149，150，151，152，153，154，155，156，157，158，159，160，162，163，164，165，166，167，168，169，170，171，173，174，175，176，177，178，179，180，181，182，183，184，185，190，191和193中任一項組成的氨基酸(AA)序列。在一個實施方案中，本專利技術提供一種分離的HLAII類結合WT-1肽，其具有由序列SEQIDNO:149，156，173，174和180中任一項組成的氨基酸(AA)序列。在一個實施方案中，本專利技術提供一種分離的WT-1肽，其具有由序列SEQIDNO:1-160，162-185，190，191和193任一項組成的氨基酸(AA)序列，或上述任一項的片段。在一個實施方案中，本專利技術提供一種分離的HLAI類結合WT-1肽，其具有由序列SEQIDNO:142，143，144，145，146，147，148，149，150，151，152，153，154，155，156，157，158，159，160，162，163，164，165，166，167，168，169，170，171，173，174，175，176，177，178，179，180，181，182，183，184，185，190，191和193中任一項組成的氨基酸(AA)序列。在一個實施方案中，本專利技術提供一種分離的HLAII類結合WT-1肽，其具有由序列SEQIDNO:149，156，173，174和180中任一項組成的氨基酸(AA)序列。在另一個實施方案中，本專利技術提供一種包括(a)抗原呈遞細胞和(b)選自SEQIDNO:1-160，162-185，190，191和193的肽的組合物。在另一個實施方案中，本專利技術提供一種包括(a)抗原呈遞細胞和(b)HLAI類結合肽的組合物，所述HLAI類結合肽選自SEQIDNO:142，143，144，145，146，147，148，149，150，151，152，153，154，155，156，157，158，159，160，162，163，164，165，166，167，168，169，170，171，173，174，175，176，177，178，179，180，181，182和183。在另一個實施方案中，本專利技術提供一種包括(a)抗原呈遞細胞和(b)HLAII類結合肽的組合物，所述HLAII類結合肽選自SEQIDNO:149，156，173，174和180。在另一個實施方案中，本專利技術提供一種疫苗，其包括SEQIDNO：1-160，162-185，190，191和193中的一或多種肽。在另一個實施方案中，本專利技術提供一種疫苗，其包括選自SEQIDNO:142，143，144，145，146，147，148，149，150，151，152，153，154，155，156，157，158，159，160，162，163，164，165，166，167，168，169，170，171，173，174，175，176，177，178，179，180，181，182和183的一或多種HLAI類結合肽。在另一個實施方案中，本專利技術提供一種疫苗，其包括選自SEQIDNO:149，156，173，174和180的一或多種HLAII類結合肽。在另一個實施方案中，本專利技術提供一種疫苗，其包括選自SEQIDNO:142，143，144，145，146，147，148，149，150，151，152，153，154，155，156，157，158，159，160，162，163，164，165，166，167，168，169，170，171，173，174，175，176，177，178，179，180，181，182和183的一或多種HLAI類結合肽，和選自SEQIDNO:149，156，173，174和180的一或多種HLAII類結合肽。在另一個實施方案中，本專利技術提供一種治療患有表達WT-1的癌癥的對象的方法，所述方法包括給對象施用本專利技術的WT-1肽或疫苗，從而治療患有表達WT-1的癌癥的對象。在另一個實施方案中，本專利技術提供一種在對象中降低表達WT-1的癌癥的發病率或其復發的方法，所述方法包括給對象施用本專利技術的WT-1肽或疫苗，從而在對象中降低表達WT-1的癌癥的發病率或其復發。在另一個實施方案中，本專利技術提供一種誘導WT-1蛋白特異性CTL的形成和增殖的方法，所述方法包括將淋巴細胞群與本專利技術的肽或組合物接觸，從而誘導WT-1蛋白特異性CTL的形成和增殖。該方法可以在體外、離體或體內進行。當在體外或離體進行時，這些CTL繼而可以被輸注入患者以達到治療效果。在另一個實施方案中，本專利技術提供一種誘導(a)WT-1蛋白特異性CD8+淋巴細胞；或(b)對WT-1蛋白特異的CD4+淋巴細胞、或其組合的形成和增殖的方法，所述方法包括將淋巴細胞群與本專利技術的肽或組合物接觸，從而誘導(a)WT-1蛋白特異性CD8+淋巴細胞；或(b)對WT-1蛋白特異的CD4+淋巴細胞、或其組合的形成和增殖。該方法可以在體外、離體或體內進行。當在體外或離體進行時，這些CTL繼而可以被輸注入患者以達到治療效果。在另一個實施方案中，本專利技術提供一種誘導對象的抗癌免疫應答的方法，所述方法包括將對象與免疫原性組合物接觸的步驟，所述免疫原性組合物包括(a)WT-1蛋白；(b)WT蛋白的片段；(c)編碼WT-1本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種分離的WT?1肽，其由選自以下的氨基酸序列組成：AILDFLLLQ(SEQ?ID?NO:147)，RQRPHPGAL(SEQ?ID?NO:142)，GALRNPTAC(SEQ?ID?NO:143)，THSPTHPPR(SEQ?ID?NO:146)，ASGSEPQQM(SEQ?ID?NO:151)，WNQMNLGATLK(SEQ?ID?NO:173)，PGCLQQPEQQG(SEQ?ID?NO:149)和LDFAPPGASAY(SEQ?ID?NO:156)。

【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】2012.01.13 US 61/586,177;2012.05.15 US 61/647,2071.一種分離的WT-1肽，其由選自以下的氨基酸序列組成：AILDFLLLQ(SEQIDNO:147)，RQRPHPGAL(SEQIDNO:142)，GALRNPTAC(SEQIDNO:143)，THSPTHPPR(SEQIDNO:146)，PGCLQQPEQQG(SEQIDNO:149)，PLPHFPPSL(SEQIDNO:144)，HFPPSLPPT(SEQIDNO:145)，LLAAILDFL(SEQIDNO:184)，和ALRNPTACPL(SEQIDNO:191)。2.權利要求1的分離的WT-1肽，其中所述分離的肽結合HLAI類分子、HLAII類分子、或HLAI類分子和HLAII類分子二者。3.一種藥物組合物，其包括權利要求1或2的肽和藥學上可接受的載體。4.權利要求3的藥物組合物，其進一步包括細胞群。5.權利要求4的藥物組合物，其中所述細胞群獲自外周血、分離血液制品、外周淋巴結、腸相關淋巴組織、脾、胸腺、臍帶血、腸系膜淋巴結、肝、免疫病變部位、胰、腦脊液、腫瘤樣本或肉芽腫組織。6.權利要求5的藥物組合物，其中所述分離血液制品是白細胞分離血液制品。7.權利要求4的藥物組合物，其中所述細胞群獲自供體、患者或人類來源。8.權利要求4的藥物組合物，其中所述細胞群是淋巴細胞、單核細胞、巨噬細胞、樹突狀細胞、內皮細胞、干細胞或其任意組合，并且其中所述細胞群是自體的、同基因的或異基因的，其中所述干細胞不是胚胎干細胞。9.權利要求3-8中任一項的藥物組合物，用于治療患有表達WT-1的癌癥的對象，或者用于降低表達WT-1的癌癥的發病率或其復發。10.權利要求9的藥物組合物，其中所述表達WT-1的癌癥是白血病，促結締組織增生的小圓細胞瘤，胃癌，結腸癌，肺癌，乳腺癌，生殖細胞瘤，卵巢癌，子宮癌，甲狀腺癌，肝癌，腎癌，肉瘤，維爾姆斯氏瘤，脊髓發育不良綜合征(MDS)，或間皮瘤。11.權利要求10的藥物組合物，其中白血病是急性髓性白血病(AML)，肺癌是非小細胞肺癌(NSCLC)，肝癌是肝細胞癌，或者肉瘤是卡波西氏肉瘤。12.一種疫苗，其包括(a)一或多種權利要求1或2的分離的WT-1肽和(b)佐劑或載體。13.權利要求12的疫苗，其中所述佐劑是QS21，弗氏不完全佐劑，磷酸鋁，氫氧化鋁，BCG，明礬，生長因子，細胞因子，趨化因子，白介素，Montanide或GM-CSF。14.權利要求12的疫苗，其進一步包括細胞群。15.權利要求14的疫苗，其中所述細胞群獲自外周血、分離血液制品、外周淋巴結、腸相關淋巴組織、脾、胸腺、臍帶血、腸系膜淋巴結、肝、免疫病變部位、胰、腦脊液、腫瘤樣本或肉芽腫組織。16.權利要求15的疫苗，其中所述分離血液制品是白細胞分離血液制品。17.權利要求14的疫苗，其中所述細胞群獲自供體、患者或人類來源。18.權利要求14的疫苗，其中所述細胞群是淋巴細胞、單核細胞、巨噬細胞、樹突狀細胞、內皮細胞、干細胞或其任意組合，并且其中所述細胞群是自體的、同基因的或異基...

【專利技術屬性】
技術研發人員：R·J·奧賴利，E·道布羅維納，A·塞爾瓦庫馬爾，
申請(專利權)人：紀念斯隆凱特林癌癥中心，
類型：發明
國別省市：美國;US