FOXM1 肽和包含FOXM1 肽的藥劑制造技術

本發明專利技術的目的是通過如下提供對于日本約30％的以高水平表達叉頭框M1(FOXM1)的各種類型的癌癥患者實現癌癥免疫治療的手段：鑒定可結合于HLA?A2的源自FOXM1的肽以活化可殺死癌細胞的人殺傷T細胞。具體公開的是選自如下(A)或(B)項的肽：(A)包括SEQ?ID?NO:1至3中任一個所示的氨基酸序列的肽，和(B)在包括SEQ?ID?NO:1至3中任一個所示的氨基酸序列的肽中取代、缺失、插入和/或添加一個、兩個或數個氨基酸殘基并且具有誘導細胞毒(殺傷)T細胞的活性的肽。

【技術實現步驟摘要】
本申請是中國申請200880112387.2的分案申請，該母案的國際申請日為2008年8月12日，本分案采用了與該母案一致的專利技術名稱。
本專利技術涉及作為針對高表達叉頭框M1(FOXM1)的癌癥(如膽管癌、肺癌和胰腺癌)的疫苗有用的新肽，和包含這些肽的用于治療和預防腫瘤的藥物。
技術介紹
在日本，膽管癌(膽囊癌和膽管癌)死亡的數目正在增加，在2005年，有16,586人死于此癌。在大多數膽管癌病例中，在早期不存在主觀癥狀。與消化道腔體內形成的癌癥(如胃癌和結腸癌)相比，膽管癌的準確的顯示和診斷顯影(diagnostic?imaging)是困難的。因此，膽管癌難以早期檢測，當膽管癌被發現時，癌癥往往已經發展并無法切除。除外科治療之外，還進行放療和化療以治療膽管癌，但它們療效不佳，因此亟需建立新的治療方法。在日本，肺癌死亡的數目也在增加，在2005年，有62,063人死于此癌。目前日本癌癥死亡中肺癌占19.0％，并已成為2000年以來癌癥死亡的首要原因。吸煙被認為是肺癌發生的最大原因。除吸煙外，吸入石棉或氡氣也被認為引起肺癌。作為預防肺癌的措施，人們倡導戒煙和進行健康檢查。然而，盡管吸煙人群在日本正在減少，但2005年仍估計有大約3千萬人。此外，最近已證明，健康檢查中廣泛進行的簡單胸部X-光顯影和痰液測試對于肺癌的早期檢測無效，而且它們并不導致癌癥死亡的減少。考慮到上述情況，預期肺癌死亡的數目在未來會持續增加。肺癌的癥狀包括咳嗽、血痰、呼吸急促和胸痛，但在大多數情況下，癥狀在早期不存在。在很多病例中當癥狀出現時癌癥已經發展。為此，當最先發現癌癥時，一半以上的患者是不能手術治療的，因此肺癌被看作難治性癌癥中的一種。手術后恢復率不像其他癌癥那么好，而且手術后的總的五年存活率僅不及50％。在近年來，隨著以手術切除為中心，結合放療、化療等的多科性治療的進步，早期肺癌的五年存活率正在增加；然而，晚期肺癌的治療效果沒有很大的改進，而且亟需建立新的治療策略。在日本，胰腺癌死亡的數目正在增加，在2005年，有22,927人死于此癌。目前，日本癌癥死亡中胰腺癌占7.0％，在肺癌、胃癌、結腸癌和肝癌后排名第五位。胰腺癌沒有特異性的癥狀，而且在很多病例中，當癥狀出現時，癌癥已經發展。即使是診斷顯影發展的今天，全日本胰腺癌患者中大約40％屬于具有遠端轉移的晚期病例，而且發現很多患者具有不能切除的局部發展的癌癥。因此，患者總的五年存活率是5％以下，而且診斷后的預后非常差。由于診斷中的難度，胰腺癌發病作為癌癥死亡的原因特別是發達國家中正逐漸增加。當先，雖然以手術切除為中心，結合放療、化療等的多科性治療正在開展，但是在治療效果方面沒有明顯的改進，亟需建立新的治療策略。已顯示胰腺癌的發病要因涉及多種因素，如生活習慣(包括吸煙、肥胖、飲食、飲酒和喝咖啡)，以及慢性胰腺炎、糖尿病、遺傳因素等。在另一個方面，分子生物學和腫瘤免疫學的近期發展闡明，細胞毒性(殺傷)T細胞和輔助T細胞可識別癌細胞中特異性高表達的蛋白質被降解而產生、并經由HLA分子被呈遞到癌細胞或抗原呈遞細胞的表面的肽，并引起免疫反應以破壞癌細胞。此外，已經鑒定了許多源自這些細胞的、能刺激這樣的免疫反應以攻擊癌癥的腫瘤抗原蛋白質和肽，而且抗原特異性腫瘤免疫治療正在得到臨床應用。HLA?I類分子在身體的所有有核細胞的表面上表達。它結合于細胞質或細胞核中產生的蛋白質在胞內降解所產生的肽，并表達在細胞表面。在正常細胞的表面，源自正常自體蛋白質的肽結合于HLA?I類分子，并且不被免疫系統的T細胞識別和破壞。在另一個方面，在形成癌癥的過程中，癌細胞有時大量表達在正常細胞中幾乎不表達或略微表達的蛋白質。此時HLA?I類分子結合于癌細胞內特異性高表達的蛋白質胞內降解而產生的肽，然后在癌細胞的表面上表達肽，于是殺傷T細胞識別并僅破壞癌細胞。通過將所述癌癥-特異性抗原或肽施用于個體，可破壞癌細胞且可抑制癌生長而不傷害正常細胞。這稱為使用癌癥-特異性抗原的癌癥免疫療法。HLA?II類分子主要在抗原呈遞細胞的表面上表達。所述分子結合于源自癌癥-特異性抗原的肽，其通過胞內降解由細胞外并入抗原-呈遞細胞的癌癥-特異性的抗原而產生，然后在細胞的表面上表達肽。識別它們的輔助T細胞被活化，并通過產生活化其他免疫活性細胞的多個細胞因子來誘導或增強針對腫瘤的免疫反應。因此，如果開發靶向在癌癥中特異性高表達的抗原的免疫療法，這樣的療法可有效地僅僅消滅癌癥，而不引起對正常自體組織的任何有害事件。還期望的是療法可用于其他治療均無能為力的任何末期癌癥患者。此外，通過將癌癥特異性抗原和肽作為疫苗預先施用于具有發生癌癥的高風險的個體，可預防癌癥的發生。本專利技術人首先使用cDNA微陣列對27,648個人基因進行了全基因組基因表達分析，以研究這些基因在25個肝內膽管癌病例中和在多個正常器官(包括它們在胚胎期)的表達譜(expression?profile)。結果，本專利技術人發現叉頭框M1(FOXM1)(GenBank登錄號NM_202003)在許多肝內膽管癌病例的組織中非常高度表達。類似于且除肝內膽管癌之外，還發現FOXM1在幾乎所有的肺癌、膀胱癌和胰腺癌病例中高度表達。此外，FOXM1的高表達見于多種癌癥如子宮頸癌(cervical?cancer)、卵巢癌、惡性淋巴瘤(malignant?lymphoma)、乳腺癌、胃癌、食道癌、前列腺癌、肝細胞癌、結腸癌和慢性髓細胞性白血病的40％以上病例中。這些事實提示FOXM1可在多種癌癥中作為癌癥-特異性抗原。FOXM1在胚胎肝中并在正常成人器官中表達，其在消化道如胃、小腸和大腸、胸腺和睪丸中輕微表達；然而，表達水平明顯低于癌部分。提示FOXM1與癌癥發病和細胞增殖調節有關的文件的實例包括非專利文件1至10。然而，這些文件都沒有描述FOXM1作為針對癌癥的疫苗的用途。[非專利文件1]Yoshida?Y,Wang?I-C,Yoder?HM,Davidson?NO,Costa?RH.:The?forkhead?box?M1transcription?factor?contributes?to?the?development?and?growth?of?mouse?colorectal?cancer.Gastroenterology?132:1420-1431,2007.[非專利文件2]Gusarcova?GA,Wang?I-C,Major?本文檔來自技高網...

【技術保護點】
下面(A)或(B)的肽：(A)包含SEQ?ID?NO:2或3氨基酸序列的肽；(B)包含SEQ?ID?NO:2或3氨基酸序列的肽，其中取代、缺失、插入和/或添加一個、兩個或數個氨基酸，并且其中所述肽顯示細胞毒性(殺傷)T細胞誘導活性。

【技術特征摘要】
2007.08.20 JP 214001/071.下面(A)或(B)的肽：
(A)包含SEQ?ID?NO:2或3氨基酸序列的肽；
(B)包含SEQ?ID?NO:2或3氨基酸序列的肽，其中取代、缺失、插入和
/或添加一個、兩個或數個氨基酸，并且其中所述肽顯示細胞毒性(殺傷)T細
胞誘導活性。
2.權利要求1的肽，其中自N末端起第二個氨基酸是亮氨酸或甲硫氨
酸。
3.權利要求1或2的肽，其中C-末端氨基酸是纈氨酸或亮氨酸。
4.一種用于誘導針對癌癥的免疫力的試劑，其包含一種或多種權利要求
1的肽作為活性成分。
5.一種用于治療和/或預防癌癥的藥劑，其包含一種或多種權利要求1
的肽作為活性成分。
6.一種用于誘導顯示細胞毒性(殺傷)T細胞誘導活性的抗原呈遞細胞
的藥劑，其中所述藥劑包含一種或多種權利要求1的肽作為活性成分。
7.一種用于誘導顯示細胞毒性(殺傷)T細胞誘導活性的抗原呈遞細胞
的藥劑，其中所述藥劑包含一種或多種編碼權利要求1的肽的多核苷酸作為
活性成分。
8.一種用于誘導細胞毒性(殺傷)T細胞的藥劑，其中所述藥劑包含一種
或多種權利要求1的肽作為活性成分。
9.針對權利要求1的肽的抗體。
10.使用權利要求1的肽誘導的細胞毒性(殺傷)T細胞、輔助T細胞或
包含它們的免疫細胞群體。
11.一種抗原呈遞細...

【專利技術屬性】
技術研發人員：西村泰治，橫峰和典，角田卓也，中村佑輔，
申請(專利權)人：腫瘤療法科學股份有限公司，
類型：發明
國別省市：日本;JP