一種星油藤的組織培養快繁方法技術

本發明專利技術公開了一種星油藤的組織培養快繁方法，星油藤（Plukenetia?volubilis?L.）又名南美油藤、印加果、印加花生等，是大戟科一種多年生木質藤本油料植物，原產于南美洲安第斯山脈地區熱帶雨林。從星油藤種子中榨取的植物油被認為是世界上最好的植物油，可用于食品、保健、制藥、化妝品等方面。目前，星油藤種苗主要通過種子和扦插方式繁育，存在周期長、成本高、效率低下等問題。因此，本發明專利技術以星油藤帶節莖段為外植體，通過不定芽誘導、增殖、生根、煉苗移栽等過程成功獲得了星油藤離體再植株，建立星油藤組織培養快速繁殖技術體系，對于進行星油藤優良品種的快速繁殖和大面積推廣、促進星油藤的產業化發展具有重要意義。

【技術實現步驟摘要】
一種星油藤的組織培養快繁方法
本專利技術涉及農業生物技術中植物組織培養的方法，具體地說，涉及一種星油藤的組織培養快繁方法。
技術介紹
星油藤（PlukenetiavolubilisL.）又名南美油藤、印加果、印加花生等，是大戟科一種多年生木質藤本油料植物，原產于南美洲安第斯山脈地區熱帶雨林。從星油藤種子中榨取的植物油，由于其富含多元不飽和脂肪酸且以Omega脂肪酸為主，ω-3,ω-6,ω-9三種不飽和脂肪酸高達92%以上，因此被認為是世界上最好的植物油，可用于食品、保健、制藥、化妝品等方面，對調整血脂、預防心血管疾病、保養肌膚等也有顯著的作用。星油藤被引進中國科學院西雙版納熱帶植物園，由于應用前景廣泛，云南、貴州等省市大力發展星油藤產業。但是，星油藤為新引進作物，資源較少,價格昂貴，不利于其大面積推廣種植。目前，星油藤種苗主要通過種子和扦插方式繁育，種子播種雖然可在短時間內獲得大量幼苗，但因星油藤為雌雄同株異花授粉植物，后代易發生性狀分離，遺傳性狀不穩定，易丟失親本的優良性狀。而扦插方式繁育需要大量的枝條，且從扦插到移栽大田需2個月，耗時較長。因此，釆用植物組織培養技術來緩解其種苗緊張壓力、進行可持續開發利用是十分必要的。因此，本專利技術以星油藤帶節莖段為外植體，通過不定芽誘導、增殖、生根、煉苗移栽等過程成功獲得了星油藤離體再植株，建立星油藤組織培養快速繁殖技術體系，對于進行星油藤優良品種的快速繁殖和大面積推廣、促進星油藤的產業化發展具有重要意義。
技術實現思路
本專利技術的目的在于提供一種星油藤的組織培養快繁方法，通過誘導不定芽、叢生芽增殖、試管苗生根、煉苗移栽等階段成功獲得了星油藤離體再植株，建立星油藤組織培養快速繁殖技術體系，從而實現了本專利技術的目的。本專利技術的一種星油藤的組織培養快繁方法，包括以下的工藝步驟：（1）誘導不定芽：選取星油藤當年生帶節藤莖為外植體,經75%酒精消毒5～20秒種后，用無菌水沖洗2～5次后置于0.1%的升汞溶液中消毒10～30分鐘，然后用無菌水沖洗3～6次，經無菌濾紙吸干水分后剪切成2～4cm左右的帶節藤莖，并接種到誘導培養基上,于25～28℃條件下全暗培養，直至誘導形成不定芽。（2）繼代培養：將步驟（1）獲得的不定芽從基部切下，接種到增殖培養基上進行繼代培養，接種后置于每天光照12～15小時，光照強度為1500～2000lx，培養溫度為25～28℃的條件下培養，20～30天轉接一次。（3）生根培養：將步驟（2）繼代培養長至2～4cm的不定芽分切并接種到生根培養基上進行誘導生根，接種后先在25～28℃條件下全暗培養3～5天，然后置于每天光照12～15小時，光照強度為2000～3000lx，培養溫度為25～28℃的條件下培養至生根。（4）煉苗移栽：將長至6～8cm的生根試管苗的培養瓶瓶蓋打開并置于自然光照下煉苗5～7天后，將試管苗從培養瓶中取出，洗掉根部培養基，栽入由泥炭土:農家肥:河沙（8：1：1）混合成的基質中并定植于大田中。上述步驟（1）所述的誘導培養基為：MS+0.1～0.5mg/LTDZ+1.0～2.0mg/L6-BA+0.1～0.5mg/LNAA+15～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L瓊脂，pH為5.4～5.8;上述步驟（2）所述的增殖培養基為：MS+1.0～2.0mg/L6-BA+0.1～0.5mg/LNAA+15～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L瓊脂，pH為5.4～5.8；上述步驟（3）所述的生根培養基為：1/2MS+0.1～0.5mg/LIBA+1.0～2.0mg/LGGR（注：雙吉爾-GGR，購自北京艾比蒂研究開發中心）+15～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L瓊脂，pH為5.4～5.8。本專利技術的優點是：星油藤（PlukenetiavolubilisL.）又名南美油藤、印加果、印加花生等，是大戟科一種多年生木質藤本油料植物，原產于南美洲安第斯山脈地區熱帶雨林。從星油藤種子中榨取的植物油被認為是世界上最好的植物油，可用于食品、保健、制藥、化妝品等方面。目前，星油藤種苗主要通過種子和扦插方式繁育，存在周期長、成本高、效率低下等問題。因此，本專利技術以星油藤帶節莖段為外植體，通過不定芽誘導、增殖、生根、煉苗移栽等過程成功獲得了星油藤離體再植株，建立星油藤組織培養快速繁殖技術體系，對于進行星油藤優良品種的快速繁殖和大面積推廣、促進星油藤的產業化發展具有重要意義。本專利技術組織培養快繁方法，具有簡單、易行、經濟的特點。通過本專利技術育成的星本專利技術利用植物組織培養技術進行星油藤種苗規模化生產，建立了星油藤油藤組培苗移栽成活率達到98%以上，可以為星油藤規模化種植提供優質種苗保障。具體實施方式以下實施例是對本專利技術的進一步說明，不是對本專利技術的限制。實施例1（1）誘導不定芽：選取星油藤當年生帶節藤莖為外植體,經75%酒精消毒12秒種后，用無菌水沖洗3次后置于0.1%的升汞溶液中消毒15分鐘，然后用無菌水沖洗5次，經無菌濾紙吸干水分后剪切成2～4cm左右的帶節藤莖，并接種到誘導培養基上,于25℃條件下全暗培養18天即可誘導形成不定芽，污染率低至5%以下，不定芽誘導率可達92.7%。所述的誘導培養基為：MS+0.2mg/LTDZ+1.2mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+20g/L蔗糖+4.5g/L瓊脂，pH為5.5;（2）繼代培養：將步驟（1）獲得的不定芽從基部切下，接種到增殖培養基上進行繼代培養，接種后置于每天光照13小時，光照強度為1500lx，培養溫度為25℃的條件下培養，20天轉接一次，增殖系數為7.84。所述的增殖培養基為：MS+1.5mg/L6-BA+0.2mg/LNAA+25g/L蔗糖+5.0g/L瓊脂，pH為5.5；（3）生根培養：將步驟（2）繼代培養長至2～4cm的不定芽分切并接種到生根培養基上進行誘導生根，接種后先在25℃條件下全暗培養3天，然后置于每天光照14小時，光照強度為2500lx，培養溫度為25℃的條件下培養10天即開始生根，生根率可達96.2%。所述的生根培養基為：1/2MS+0.3mg/LIBA+1.0mg/LGGR（注：雙吉爾-GGR，購自北京艾比蒂研究開發中心）+15g/L蔗糖+3.5g/L瓊脂，pH為5.5。（4）煉苗移栽：將長至6～8cm的生根試管苗的培養瓶瓶蓋打開并置于自然光照下煉苗5天后，將試管苗從培養瓶中取出，洗掉根部培養基，栽入由泥炭土:農家肥:河沙（8：1：1）混合成的基質中并定植于大田中，移栽成活率為100%。實施例2（1）誘導不定芽：選取星油藤當年生帶節藤莖為外植體,經75%酒精消毒15秒種后，用無菌水沖洗4次后置于0.1%的升汞溶液中消毒15分鐘，然后用無菌水沖洗6次，經無菌濾紙吸干水分后剪切成2～4cm左右的帶節藤莖，并接種到誘導培養基上,于26℃條件下全暗培養14天即可誘導形成不定芽，污染率低至7%以下，不定芽誘導率可達95.4%。所述的誘導培養基為：MS+0.4mg/LTDZ+1.6mg/L6-BA+0.3mg/LNAA+20g/L蔗糖+4.0g/L瓊脂，pH為5.8。（2）繼代培養：將步驟（1）獲得的不定芽從基部切下，接種到增殖培養基上進行繼代培養，接種后置于每天光照14小時，光照強度為2000lx，培養溫度為本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種星油藤的組織培養快繁方法，其特征在于包括以下工藝步驟：（1）誘導不定芽：選取星油藤當年生帶節藤莖為外植體,經75%酒精消毒5～20秒種后，用無菌水沖洗2～5次后置于0.1%的升汞溶液中消毒10～30分鐘，然后用無菌水沖洗3～6次，經無菌濾紙吸干水分后剪切成2～4cm左右的帶節藤莖，并接種到誘導培養基上,于25～28℃條件下全暗培養，直至誘導形成不定芽；（2）繼代培養：將步驟（1）獲得的不定芽從基部切下，接種到增殖培養基上進行繼代培養，接種后置于每天光照12～15小時，光照強度為1500～2000lx，培養溫度為25～28℃的條件下培養，20～30天轉接一次；（3）生根培養：將步驟（2）繼代培養長至2～4cm的不定芽分切并接種到生根培養基上進行誘導生根，接種后先在25～28℃條件下全暗培養3～5天，然后置于每天光照12～15小時，光照強度為2000～3000lx，培養溫度為25～28℃的條件下培養至生根；（4）煉苗移栽：將長至6～8cm的生根試管苗的培養瓶瓶蓋打開并置于自然光照下煉苗5～7天后，將試管苗從培養瓶中取出，洗掉根部培養基，栽入由泥炭土:農家肥:河沙（8：1：1）混合成的基質中并定植于大田中。...

【技術特征摘要】
1.一種星油藤的組織培養快繁方法，其特征在于包括以下工藝步驟：（1）誘導不定芽：選取星油藤當年生帶節藤莖為外植體,經75%酒精消毒5～20秒種后，用無菌水沖洗2～5次后置于0.1%的升汞溶液中消毒10～30分鐘，然后用無菌水沖洗3～6次，經無菌濾紙吸干水分后剪切成2～4cm的帶節藤莖，并接種到誘導培養基上,于25～28℃條件下全暗培養，直至誘導形成不定芽，所述的誘導培養基為：MS+0.1～0.5mg/LTDZ+1.0～2.0mg/L6-BA+0.1～0.5mg/LNAA+15～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L瓊脂，pH為5.4～5.8；（2）繼代培養：將步驟（1）獲得的不定芽從基部切下，接種到增殖培養基上進行繼代培養，接種后置于每天光照12～15小時，光照強度為1500～2000lx，培養溫度為25～28℃的條件下培養，20～30天轉接一次。所述的增殖...

【專利技術屬性】
技術研發人員：梁鈞淞，莫昭展，
申請(專利權)人：玉林師范學院，
類型：發明
國別省市：廣西;45