一種七葉皂苷鈉的制備方法、包含其的外用制劑及其應用技術

本發明專利技術涉及一種七葉皂苷鈉的制備方法、包含其的外用制劑及其應用。具體而言，涉及一種七葉皂苷鈉的制備方法、外用制劑的制備及其在制備預防或治療外傷導致的組織水腫的藥物中的應用，其特征在于，所述方法包括提取和分離純化步驟，所述提取為將娑羅子粉用0-80％的乙醇或甲醇溶液(優選乙醇)進行提取，所述分離純化包括以無機鈉鹽水溶液為流動相進行離子交換層析。本發明專利技術方法制得產品純度高、生產周期短、成本低及無環境污染等問題，符合制備天然、安全、高純七葉皂苷的發展趨勢。

【技術實現步驟摘要】
一種七葉皂苷鈉的制備方法、包含其的外用制劑及其應用
本專利技術屬于醫藥生物
，涉及一種七葉皂苷鈉的制備方法包含其的外用制劑及其應用。具體而言，本專利技術涉及從中藥娑羅子中提取七葉皂苷鈉的制備技術及用該技術制備的七葉皂苷鈉制備成外用型制劑藥物(氣霧劑/噴霧劑)的技術，并將其外用制劑應用到外傷導致組織水腫等損傷的治療中。
技術介紹
人體輕微外傷，包括各種挫傷、擦傷、扭傷等，常會引起患者傷處的水腫、疼痛和活動受限，給生活、工作帶來不便，有些甚至因傷后處理不當容易引發嚴重后果。傷后24小時內的損傷，會引起局部組織滲出和腫脹、疼痛、制動等，皮膚創面損傷后局部抵抗力下降，容易繼發細菌感染等，后者可以進一步加重病情。因此，損傷后創面的保護、防護感染以及消腫止痛是處理軟組織損傷的基本原則。目前治療這些輕微外傷的方法雖然很多，如使用紅汞、紫藥水、碘伏、乙醇等各種消毒劑；或者云南白藥噴霧劑等。但是這些方法大部分功能單一，只能起到防止創面感染和創面的部分保護作用，止痛消腫效果差，而云南白藥噴霧劑效果雖然較好，但是兩個噴瓶的使用不方便攜帶和操作。七葉皂苷又稱七葉皂苷酸，為七葉樹科植物七葉樹(AesculushippocastanumL.也稱為天師栗(AesculusWilsoniiRehd.)、梭欏樹、梭欏子、猴板栗等)的干燥成熟果實娑羅子中提取得到的總皂苷、β-七葉皂苷或異七葉皂苷等的總稱。目前在臨床中應用最多的為總七葉皂苷(Totalescin)，主要含有七葉皂苷A、B、C和D。在我國根據液相色譜出峰時間的先后，A-D的物質分別對應escinIa、escinIb、isoescinIa及isoescinIb。其中的七葉皂苷A和B是β-型七葉皂苷，其結構式如下式(1)所示。七葉皂苷C和D是七葉皂苷A和B的C21-羥基上乙酸酯轉位到C28-羥基的異構體，是Crypto-型(異型)七葉皂苷，其結構式如下式(2)所示。總七葉皂苷具有抗炎、抗滲出和改善血液循環等生物學特性，因此已經被廣泛應用于治療各種原因引起的腦水腫、創傷或手術所致腫脹、靜脈回流障礙或燒傷等疾病。然而總七葉皂苷對于肌肉和粘膜具有較強的刺激作用，直接用于肌肉注射可見注射部位局部疼痛和腫脹。我們從七葉樹的果實娑羅子中提取了七葉皂苷，用氯化鈉與七葉皂苷成鹽后解決了化合物的溶解性難題并降低了其血管痙攣的毒性，制備的氣霧劑/噴霧劑便于攜帶給藥。目前國內多數廠家均采用有機溶劑法進行提取、再采用非極性溶劑(正丁醇、氯仿等)進行萃取分離或離子交換吸附后用有機溶劑洗脫的方法來制備七葉皂苷鈉。例如:CN101974061A公開了一種從婆羅子中提取純化七葉皂苷的方法，其包括首先將牛蒡子用乙醚回流脫脂，將脫脂藥渣加入8-15倍量95％乙醇超聲提取2-3次，離心分離，活性炭脫色，超濾，將超濾液濃縮至醇濃度為15％-20％，加入大孔吸附樹脂柱吸附，依次用水、60％乙醇洗脫，收集七葉皂苷流分，然后結晶、通過丙酮乙醚重結晶得到七葉皂苷。CN102532241A公開了一種提純七葉皂苷鈉的方法，其包括以下步驟:將娑羅子粉用5-15倍量80-95％乙醇回流提取2-3次，加入大孔樹脂柱吸附，50-70％乙醇溶液洗脫，洗脫液濃縮，得濃縮液；將濃縮液加入陽離子交換樹脂柱，下柱液加入丙酮溶液充分攪拌，過濾得沉淀物；上述沉淀物用乙醇溶液溶解，過氧化鋁短柱，過柱液減壓回收乙醇，結晶，干燥即得七葉皂苷鈉產品，含量不低于95％。CN102659897A公開了一種七葉皂苷鈉的制備方法，包括:將娑羅子粉與體積百分比為10％的乙醇溶液按料液比1:(3～12)千克/升的比例混合浸泡后提取，然后層析分離，層析時使用體積百分比為95％的乙醇溶液洗脫，流速80ml/min～100ml/min，然后濃縮、精制、結晶。但是，采用上述方法，在加工過程中使用有機溶劑的量較大，殘留較多，生產成本高。且易造成有機溶劑殘留，可能會對環境造成一定的污染。
技術實現思路
為了解決上述問題，本專利技術提供了一種工藝簡單的七葉皂苷鈉的制備方法，僅用水或醇提取，純化選用無機鹽水溶液為流動相的離子交換層析(色譜)，富集七葉皂苷，使洗脫體積減少，后期操作簡單省時，降低成本，解決傳統七葉皂苷鈉制備方法中存在的成本高及環境污染等問題，符合制備天然、安全、高純七葉皂苷的發展趨勢。具體而言，本專利技術的一個目的在于提供一種七葉皂苷鈉的制備方法，所述方法包括提取步驟和分離純化步驟，所述提取為將娑羅子粉用0-80％的乙醇或甲醇進行提取，和所述分離純化包括以無機鈉鹽水溶液為流動相進行離子交換層析。此處需要指出的是，當濃度為0％時，使用水進行提取。當使用低濃度醇時，濃度優選為5～20％。當使用中濃度醇時，濃度優選為20～50％。當使用高濃度醇時，濃度優選為50～80％。其中，所述提取為上述醇溶液進行多次提取，并且所述醇溶液的濃度不變或逐次遞減。另外，在第一次提取后的提取的料液比可以比第一次提取的料液比低，以降低作為有機溶劑的乙醇的使用量。從產率和提取效率的角度出發，所述提取優選進行三次。第一次提取時使用0～80％的乙醇溶液，料液比為1:3-1:8千克/升，優選1:5千克/升；第二次提取時使用0～80％的乙醇溶液，料液比為1:2-1:5千克/升；第三次提取時使用0～80％的乙醇溶液，料液比為1:1-1:4千克/升，其中如果第一、二次提取時料液比中液體量偏大時第三次提取可省略。優選的是，作為實例，如用低濃度醇(20％)提取，第一次提取時使用15～20％的乙醇溶液，料液比為1:3-1:8千克/升，優選1:5千克/升；第二次提取時使用5～10％的乙醇溶液，料液比為1:2-1:5千克/升；第三次提取時使用0％～5％的乙醇溶液，料液比為1:1-1:3千克/升。但本領域技術人員也可以使用其它濃度和料液比。作為實例，優選的是，所述提取包括下述步驟:將娑羅子粉與20％的乙醇溶液按料液比1:3-1:8重量體積比、優選1:5千克/升浸泡0.5-1.5小時、常規回流提取1-2小時；過濾后得到的濾渣再按料液比1:3加入10％的乙醇溶液常規回流提取1小時，過濾得濾渣，再按料液比1:2加入5％的乙醇溶液常規回流提取0.5小時，過濾、棄渣；提取的溫度控制在45℃-80℃；合并三次濾液。對于中濃度醇(50％)提取包括下述步驟:粉碎娑羅子，將其粉與50％的乙醇溶液按料液比1:5-1:8重量體積比混合浸泡0.5-1.5小時、常規回流提取1-2小時，過濾，留濾液；得到的濾渣再按料液比1:3-1:5加入50％的乙醇溶液常規回流提取1小時，過濾，留濾液；得到的濾渣再按料液比1:3加入20％的乙醇溶液常規回流提取0.5小時，過濾；棄渣。提取的溫度控制在45℃-80℃。合并三次濾液，濃縮回收乙醇。對于高濃度醇(80％)提取包括下述步驟:粉碎娑羅子，將其粉與80％的乙醇溶液按料液比1:5-1:8重量體積比混合浸泡0.5-1.5小時、常規回流提取1-2小時，過濾，留濾液；得到的濾渣再按料液比1:4-1:6加入50％的乙醇溶液常規回流提取1小時，過濾，留濾液、棄渣。若第一、二次提取液醇濃度大于50％，則不必提取第三次，因為實驗證明，第三次提取的目標物含量很低。提取的溫度控制在45℃-80℃。合并二次濾液。提取后，對提取液進行分離本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種七葉皂苷鈉的制備方法，其特征在于，所述方法包括提取和分離純化步驟，所述提取是將娑羅子粉用0?80％的乙醇或甲醇溶液(優選乙醇)進行提取，所述分離純化包括以無機鈉鹽水溶液為流動相進行的離子交換層析。

【技術特征摘要】
1.一種七葉皂苷鈉的制備方法，其特征在于，所述方法包括提取和分離純化步驟，所述提取是將娑羅子粉用0-80%的乙醇或甲醇溶液進行提取，所述分離純化依次包括脫色、以無機鈉鹽水溶液為流動相進行的離子交換層析、精制和結晶步驟；所述離子交換層析中，以pH4～7的5～100mMNa2HPO4-NaH2PO4緩沖液作為樣品緩沖液和平衡液A，以0.5～2MNaCl-5～100mMNa2HPO4-NaH2PO4緩沖液作為洗脫液B;線性梯度洗脫，A液從100%開始洗脫，逐步遞減到洗脫完變成0%；B液從0%開始洗脫，逐步遞加到洗脫完變為100%，洗脫體積為柱床體積的2～5倍。2.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述提取是使用0-80%的乙醇或甲醇溶液進行多次提取，并且所述乙醇或甲醇溶液的濃度不變或逐次遞減。3.如權利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述提取進行三次，第一次提取時使用0～80%的乙醇溶液作為提取液，料液比為1:3-1:8千克/升；第二次提取時使用0～80%的乙醇溶液作為提取液，料液比為1:2-1:5千克/升；第三次提取時使用0～80%的乙醇溶液作為提取液，料液比為1:1-1:4千克/升，其中如果第一、二次提取時料液比中液體量大第三次提取可省略。4.如權利要求3所述的制備方法，其特征在于，第一次提取時使用0～80%的乙醇溶液作為提取液，料液比為1:5千克/升。5.如權利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述提取包括下述步驟:將娑羅子粉與提取液按料液比1:3-1:8千克/升浸泡0.5-1.5小時、常規回流提取1-2小時；過濾后得到的濾渣再按料液比1:3千克/升加入同第一次的提取液或比第一次醇濃度低的提取液常規回流提取1小時，過濾后的濾渣再按料液比1:3千克/升加入同第二次的提取液或比第二次醇濃度低的提取液常規回流提取0.5小時，過濾、棄渣；提取的溫度控制在45℃-80℃；合并三次濾液。6.如權利要求5所述的制備方法，其特征在于，將娑羅子粉與提取液按1:5千克/升浸泡0.5-1.5小時。7.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述脫色為活性炭脫色或中性氧化鋁脫色。8.如權利要求7所述的制備方法，其特征在于，脫色后將脫色液離心去沉淀或靜置澄清，上清過濾，濃...

【專利技術屬性】
技術研發人員：王增祿，王多寧，于愛華，張伯慶，
申請(專利權)人：西安藍綠卓生物科技有限公司，
類型：發明
國別省市：陜西;61