一種提高奶牛產(chǎn)奶量的微生態(tài)制劑，屬于提高奶牛產(chǎn)奶量的制劑。該微生態(tài)制劑采用免培養(yǎng)技術(shù)結(jié)合統(tǒng)計(jì)學(xué)的方法篩選高產(chǎn)奶量奶牛瘤胃的優(yōu)勢菌，利用純培養(yǎng)技術(shù)獲得優(yōu)勢菌的純種菌株，經(jīng)發(fā)酵培養(yǎng)配伍組合成微生態(tài)制劑；具體步驟為：(1)測序、(2)篩選、(3)分離純化菌種、(4)培養(yǎng)、(5)發(fā)酵、(6)組合(7)包裝。本微生態(tài)制劑包含幫助分解多糖和纖維素的擬桿菌和瘤胃球菌，可以提高奶牛瘤胃擬桿菌和瘤胃球菌含量，保證其優(yōu)勢地位，提高對纖維素和多糖的利用率，進(jìn)而提高奶牛對飼料中營養(yǎng)成分的吸收利用，提高產(chǎn)奶量，帶來經(jīng)濟(jì)效益。擬桿菌幫助宿主吸收多糖、提高營養(yǎng)利用率和宿主的免疫力，維持胃腸道微生態(tài)平衡，針對性、專一性強(qiáng)。
【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及一種提高奶牛產(chǎn)奶量的制劑，特別是一種提高奶牛產(chǎn)奶量的微生態(tài)制 劑。
技術(shù)介紹
微生態(tài)制劑是一種綠色、安全的飼料添加劑，無毒副作用、無耐藥性，能夠調(diào)整或 維持動(dòng)物胃腸道內(nèi)微生態(tài)平衡，增強(qiáng)機(jī)體免疫，促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收。 目前，國內(nèi)外反芻動(dòng)物普遍使用的飼用微生態(tài)制劑有乳酸菌類（乳酸桿菌、雙歧 桿菌等）、芽孢桿菌類（枯草芽孢桿菌、蠟樣芽孢桿菌等）等細(xì)菌類，曲霉類（黑曲霉、米曲 霉）和酵母類（啤酒酵母、和石油酵母及其培養(yǎng)物）等單一菌制劑及復(fù)合菌制劑。這些市 場上銷售的微生態(tài)制劑針對性、專一性不強(qiáng)，影響了飼用微生態(tài)制劑在動(dòng)物上的應(yīng)用效果。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的是要提供一種提高奶牛產(chǎn)奶量的微生態(tài)制劑，解決現(xiàn)有微生態(tài)制劑 針對性、專一性不強(qiáng)的問題。 本專利技術(shù)是按如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：采用免培養(yǎng)技術(shù)結(jié)合統(tǒng)計(jì)學(xué)的方法篩選高產(chǎn)奶 量奶牛瘤胃的優(yōu)勢菌，利用純培養(yǎng)技術(shù)獲得優(yōu)勢菌的純種菌株，經(jīng)發(fā)酵培養(yǎng)配伍組合成微 生態(tài)制劑；按如下操作步驟制備： (1)測序：抽提荷斯坦奶牛瘤胃液DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，經(jīng)基因組測序儀高通量測序 和分類學(xué)分析獲得奶牛瘤胃微生物群落組分； (2)篩選：經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析篩選出高產(chǎn)奶牛瘤胃優(yōu)勢菌，即擬桿菌和瘤胃球菌； (3)分離純化菌種：提取奶牛瘤胃液，利用亨蓋特滾管法培養(yǎng)瘤胃微生物，選取擬 桿菌和瘤胃球菌，進(jìn)一步提純并獲得大量菌種； (4)培養(yǎng)：將擬桿菌和瘤胃球菌菌種分別接種于亨蓋特滾管法的滾管中37°C恒溫 培養(yǎng)2-3天； (5)發(fā)酵：將滾管中擬桿菌和瘤胃球菌分別接種于相對應(yīng)的厭氧發(fā)酵罐37°C恒溫 培養(yǎng)3-5天后，使發(fā)酵液降溫至20°C ; (6)組合：收集擬桿菌和瘤胃球菌的發(fā)酵菌懸液混合均勻； (7)包裝：根據(jù)需要加入其他營養(yǎng)成分后密封包裝或直接密封包裝。 所述的擬桿菌培養(yǎng)基配方：葡萄糖lg/L、蛋白胨10g/L、牛肉膏3g/L、NaCl 5g/L、 維生素 B 10ug/L、抗壞血酸lg/L,并調(diào)節(jié)PH至7. 0-7. 5 ;瘤胃球菌培養(yǎng)基的配方：尿素5g/ L、KH2P041g/L、K2HP041g/L、FeS04 · 7H20 0· 05g/L、MnS04 · H20 0· 02g/L、MgS04 · 7H20 0· 5g/L、酵母浸出液0· 2g/L、稻草桿20g/L，并調(diào)節(jié)PH至6. 0-7. 0 ; 擬桿菌和瘤胃球菌量達(dá)I. 0X108cfu/ml - 2. 5X108cfu/ml，并且比例在0· 5-1. 5 之間組合。 有益效果，由于采用了上述方案，本微生態(tài)制劑包含幫助分解多糖和纖維素的擬 桿菌和瘤胃球菌，可以提高奶牛瘤胃擬桿菌和瘤胃球菌含量，保證其優(yōu)勢地位，提高對纖維 素和多糖的利用率，進(jìn)而提高奶牛對飼料中營養(yǎng)成分的吸收利用，提高產(chǎn)奶量，帶來經(jīng)濟(jì)效 益。同時(shí)，解決了微生態(tài)制劑針對性、專一性不強(qiáng)的問題，實(shí)現(xiàn)了本專利技術(shù)的目的。 優(yōu)點(diǎn)：本專利技術(shù)所含的擬桿菌和瘤胃球菌能夠幫助宿主分解纖維素和多糖。擬桿菌 幫助宿主吸收多糖、提高營養(yǎng)利用率和宿主的免疫力，維持腸道微生態(tài)平衡。擬桿菌在對多 糖的利用方面的作用尤其突出，其在代謝多糖過程中產(chǎn)生的中間產(chǎn)物，可以為宿主提供營 養(yǎng)，減少對營養(yǎng)源的競爭。瘤胃球菌對纖維素有很強(qiáng)的附著力，能夠附著于飼料顆粒上，通 過粘附、穿透等一系列作用，并分泌一系列纖維素酶，實(shí)現(xiàn)對纖維物質(zhì)的降解。與現(xiàn)有微生 態(tài)制劑相比，僅針對奶牛瘤胃微生態(tài)，針對性、專一性強(qiáng)。【附圖說明】： 圖1是本專利技術(shù)的工藝流程圖。【具體實(shí)施方式】 下面結(jié)合實(shí)例對本專利技術(shù)進(jìn)一步描述 實(shí)施例1 :采用免培養(yǎng)技術(shù)結(jié)合統(tǒng)計(jì)學(xué)的方法篩選高產(chǎn)奶量奶牛瘤胃的優(yōu)勢菌， 利用純培養(yǎng)技術(shù)獲得優(yōu)勢菌的純種菌株，經(jīng)發(fā)酵培養(yǎng)配伍組合成微生態(tài)制劑；按如下操作 步驟制備： (1)測序：抽提荷斯坦奶牛瘤胃液DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，經(jīng)基因組測序儀高通量測序 和分類學(xué)分析獲得奶牛瘤胃微生物群落組分；所述的基因組測序儀英文表達(dá)Miseq ; (2)篩選：經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析篩選出高產(chǎn)奶牛瘤胃優(yōu)勢菌，即擬桿菌和瘤胃球菌； (3)分離純化菌種：提取奶牛瘤胃液，利用亨蓋特滾管法培養(yǎng)瘤胃微生物，選取擬 桿菌和瘤胃球菌，進(jìn)一步提純并獲得大量菌種；所述的亨蓋特滾管法英文表達(dá)為Hungate 氏滾管法； (4)培養(yǎng)：將擬桿菌和瘤胃球菌菌種分別接種于亨蓋特滾管法的滾管中37°C恒溫 培養(yǎng)2-3天； (5)發(fā)酵：將滾管中擬桿菌和瘤胃球菌分別接種于相對應(yīng)的厭氧發(fā)酵罐37°C恒溫 培養(yǎng)3-5天后，使發(fā)酵液降溫至20°C ; (6)組合：收集擬桿菌和瘤胃球菌的發(fā)酵菌懸液混合均勻； (7)包裝：根據(jù)需要加入其他營養(yǎng)成分后密封包裝或直接密封包裝。 所述的擬桿菌培養(yǎng)基配方：葡萄糖lg/L、蛋白胨10g/L、牛肉膏3g/L、NaCl 5g/L、 維生素 B 10ug/L、抗壞血酸lg/L,并調(diào)節(jié)PH至7. 0-7. 5 ;瘤胃球菌培養(yǎng)基的配方：尿素5g/ L、KH2P041g/L、K2HP041g/L、FeS04 · 7H20 0· 05g/L、MnS04 · H20 0· 02g/L、MgS04 · 7H20 0· 5g/L、酵母浸出液0· 2g/L、稻草桿20g/L，并調(diào)節(jié)PH至6. 0-7. 0 ; 擬桿菌和瘤胃球菌量達(dá)I. 0X108cfu/ml - 2. 5X108cfu/ml，并且比例在0. 5-1. 5 之間組合。 制備方法如圖1所示 (1)分離純化菌種：提取奶牛瘤胃液，利用Hungate氏滾管法培養(yǎng)瘤胃微生物，選 取擬桿菌和瘤胃球菌，進(jìn)一步提純并獲得大量菌種； (2)培養(yǎng)：將擬桿菌和瘤胃球菌菌種分別接種于Hungate氏滾管中37°C恒溫培養(yǎng) 2-3天；（3)發(fā)酵：將滾管中擬桿菌和瘤胃球菌分別接種于相對應(yīng)的厭氧發(fā)酵罐37°C恒溫培 養(yǎng)3-5天后，使發(fā)酵液降溫至20°C ; (4)組合：收集擬桿菌和瘤胃球菌的發(fā)酵菌懸液按1:1的比例混合均勻； (5)包裝：根據(jù)需要加入其他營養(yǎng)成分后密封包裝或直接密封包裝。 含擬桿菌和瘤胃球菌各 1.0 X 108cfu/ml - 2· 5X 108cfu/ml。 應(yīng)用效果試驗(yàn) 為了更好地了解本復(fù)合微生態(tài)制劑的作用功效，選取的60頭體況、泌乳年齡，胎 次等相似荷斯坦奶牛進(jìn)行喂養(yǎng)試驗(yàn)，試驗(yàn)周期為30天，試驗(yàn)相關(guān)情況如下。 1材料與方法 I. 1 材料 供試動(dòng)物：荷斯坦奶牛 供試微生態(tài)制劑：本復(fù)合微生態(tài)制劑 L 2試驗(yàn)設(shè)計(jì) 60頭荷斯坦奶牛平均分為2組，分別為實(shí)驗(yàn)組和對照組，再將對照組和實(shí)驗(yàn)組各 分為3小組，記錄實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。奶牛基礎(chǔ)日糧由羊草、青貯飼料、混合精料組成，每頭牛每天喂 30kg青貯飼料、20kg羊草和IOkg混合精料。對照組的飼料中不添加微生態(tài)制劑，實(shí)驗(yàn)組的 飼料中按精料的〇. 5%添加復(fù)合微生態(tài)制劑，添加時(shí)加少量水與精料混合均勻后添加到供 試牛日糧中，確保奶牛完全采食。每日于9:00和15:00飼喂2次，喂料結(jié)束后散放到運(yùn)動(dòng) 場自由運(yùn)動(dòng)，飲水槽保證足夠清潔的飲水。每日于7:00和17:00人工擠奶2次，測定產(chǎn)奶 量。 2試驗(yàn)結(jié)果與分析 2. 1本復(fù)合微生態(tài)制劑對荷斯坦奶牛產(chǎn)奶量的影響，結(jié)果見表1。 表1復(fù)合微生態(tài)制劑對荷斯坦奶牛產(chǎn)奶量的影響【主權(quán)項(xiàng)】1. 一種提高奶牛產(chǎn)奶量的微生態(tài)制劑，其特征本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種提高奶牛產(chǎn)奶量的微生態(tài)制劑，其特征是：采用免培養(yǎng)技術(shù)結(jié)合統(tǒng)計(jì)學(xué)的方法篩選高產(chǎn)奶量奶牛瘤胃的優(yōu)勢菌，利用純培養(yǎng)技術(shù)獲得優(yōu)勢菌的純種菌株，經(jīng)發(fā)酵培養(yǎng)配伍組合成微生態(tài)制劑；按如下操作步驟制備：（1）測序：抽提荷斯坦奶牛瘤胃液DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，經(jīng)基因組測序儀高通量測序和分類學(xué)分析獲得奶牛瘤胃微生物群落組分；（2）篩選：經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析篩選出高產(chǎn)奶牛瘤胃優(yōu)勢菌，即擬桿菌和瘤胃球菌；（3）分離純化菌種：提取奶牛瘤胃液，利用亨蓋特滾管法培養(yǎng)瘤胃微生物，選取擬桿菌和瘤胃球菌，進(jìn)一步提純并獲得大量菌種；（4）培養(yǎng)：將擬桿菌和瘤胃球菌菌種分別接種于亨蓋特滾管法的滾管中37℃恒溫培養(yǎng)2?3天；（5）發(fā)酵：將滾管中擬桿菌和瘤胃球菌分別接種于相對應(yīng)的厭氧發(fā)酵罐37℃恒溫培養(yǎng)3?5天后，使發(fā)酵液降溫至20℃；（6）組合：收集擬桿菌和瘤胃球菌的發(fā)酵菌懸液混合均勻；（7）包裝：根據(jù)需要加入其他營養(yǎng)成分后密封包裝或直接密封包裝。
【技術(shù)特征摘要】
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：季烽，王秀穎，溫洪宇，
申請(專利權(quán))人：江蘇師范大學(xué)，
類型：發(fā)明
國別省市：江蘇;32
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