4N雜環化合物作為Th17細胞分化抑制劑的應用制造技術

本發明專利技術公開了4N雜環化合物作為Th17細胞分化抑制劑的應用，發明專利技術人通過基于轉錄因子活性的熒光素酶活性篩選系統，發現通式為???????????????????????????????????????????????的4N雜環連苯化合物具有抑制Th17細胞分化的關鍵轉錄因子RORγt的能力，抑制能力EC50在0.2-1.5uM之間，在利用體外Th17細胞分化實驗驗證這些化合物具有抑制Th17分化的的功能，包括能夠顯著降低RORγt的轉錄表達，能夠抑制Th17的效應分子IL17A和IL17F的轉錄表達，IL17A細胞因子在培養物中的分泌水平也得到明顯抑制，有望開發成為治療自免疫疾病，特別是牛皮癬，系統性紅斑狼瘡,多發性硬發癥，風濕性關節炎，哮喘或炎癥性腸道病的藥物。

【技術實現步驟摘要】
4N雜環化合物作為Th17細胞分化抑制劑的應用
本專利技術涉及化合物的新應用，特別涉及4N雜環化合物作為Th17細胞分化抑制劑的應用。
技術介紹
自免疫疾病大約影響了5%的人口，包括牛皮癬，多發性硬發癥，風濕性關節炎，哮喘和炎癥性腸道病在內的大約70多種人類疾病都和自免疫失調有關(Goodnowetal.,2005)。目前自免疫疾病的治療主要依賴于一些非選擇性的免疫抑制劑，其療效有限且副作用大，因而在臨床中還沒有非常特效的治療自免疫疾病的藥物。因此開發新型的高療效低副作用的自免疫藥物成為一種急切的臨床需要。最新研究表明一種新的T細胞亞群Th17細胞和人類自免疫疾病和相關動物模型的發生相關(Linden2006;Kiklyetal.,2006)。在風濕性關節炎、牛皮癬、哮喘、炎癥性腸炎等自免疫疾病中，Th17細胞的特征細胞因子IL17表達上調，而抑制IL17表達和Th17細胞形成可以減輕自免疫疾病的發生或臨床嚴重程度(Bowmanetal.,2006;Kiklyetal.,2006)。現有研究表明Th17細胞的分化形成受到轉錄因子RORγt的控制，而RORγt基因敲除的小鼠中Th17細胞的分化能力下降，數量減少，同時誘導發生的小鼠EAE自免疫疾病概率和臨床打分指標均有顯著的降低(Ivanovetal.,2006)。這意味著RORγt的功能抑制劑可以做為開發Th17介導的自免疫疾病治療藥物的定向靶標。RORγt是類固醇類核受體家族成員，蛋白分子中包括一個保守的DNA結合域和有12個螺旋構成的配體結合域，而配體結合域是結合配體、核定位和二聚體形成的重要區域。類固醇類受體共激活分子SRCs能夠通過結合配體結構域的AF2區域來解聚轉錄抑制復合物，招募轉錄激活分子，啟動相關基因轉錄(GlassandRosenfeld,2000)。目前RORγt的天然配體還沒有找到，但最近兩個研究找到了人工合成分子地高辛及其衍生物(Huhetal.,20011;Fujita-Satoetal.,2011)和SR1001(Soltetal.,2011)能夠特異性的結合到RORγt的配體結構域，抑制RORγt的功能并降低Th17細胞的分化能力，減弱小鼠自免疫疾病EAE的臨床癥狀。然而地高辛及其衍生物具有很強的毒性(Paulaetal.,2005)，而SR1001分子盡管在體外能夠有效抑制Th17細胞分化，但在體內實驗中即使在高濃度給藥下(40mg/kg)，也只能略微減輕EAE的臨床癥狀。此外，SR1001能夠同其他的RORs作用，選擇性較差(Soltetal.,2011)。這些研究一方面表明抑制RORγt的功能來治療自免疫疾病是一個可行的方案，但目前還沒有找到一個理想的靶標藥物。因此尋找高效低毒且有較強特異性的RORγt功能抑制劑將是開發Th17介導的自免疫疾病藥物的一個重要方向。參考文獻：BowmanEP,ChackerianAA,CuaDJ.Rationaleandsafetyofanti-interleukin-23andanti-interleukin-17Atherapy.CurrOpinInfectDis2006;19:245-52.Fujita-SatoS,ItoS,IsobeT,OhyamaT,WakabayashiK,MorishitaK,AndoO,IsonoF.StructuralbasisofdigoxinthatantagonizesRORγtreceptoractivityandsuppressesTh17celldifferentiationandinterleukin(IL)-17production.JBiolChem2011;286:31409-17.Glass,C.K.,andRosenfeld,M.G.(2000).Thecoregulatorexchangeintranscriptionalfunctionsofnuclearreceptors.GenesDev14,121-141GoodnowCC,SprentJ,FazekasdeStGrothB,VinuesaCG.Cellularandgeneticmechanismsofselftoleranceandautoimmunity.Nature2005;435:590-7.HuhJR,LeungMWL,HuangPX,RyanDA,KroutMR,MalapakaRRV,ChowJ,ManelN,CiofaniM,KimSV,CuestaA,SantoriFR,LafailleJJ,XuHE,GinDY,RastinejadF,LittmanDR.DigoxinanditsderivativessuppressTH17celldifferentiationbyantagonizingRORγtactivity.Nature2011;472:486-90.IvanovII,McKenzieBS,ZhouL,TadokoroCE,LepelleyA,LafailleJJ,CuaDJ,LittmanDR.TheorphannuclearreceptorRORgammatdirectsthedifferentiationprogramofproinflammatoryIL-17+Thelpercells.Cell2006;126:1121-33.KidlyK,LiuL,NaS,SedgwickJD.TheIL-23/Th(17)axis:therapeutictargetsforautoimmuneinflammation.CurrOpinImmunol2006;18:670-5..PaulaS,TabetMR,BallWJJ.Interactionsbetweencardiacglycosidesandsodium/potassium-ATPase:three-dimentionalstructure-activityrelationshipmodelsforligandbindingtotheE2-Piformoftheenzymeversusactivityinhibition.Biochemistry2005;44:498-510.SoltLA,KumarN,NuhantP,WangYJ,LauerJL,LiuJ,IstrateMA,KameneckaM,RoushWR,Vidovi?R,Sch?rerSC,XuJH,WagonerG,DrewPD,GriffinPR,BurrisTP.SuppressionofTh17differentiationandautoimmunitybyasyntheticRORligand.Nature2011;472:491-4。
技術實現思路
本專利技術的目的在于提供4N雜環化合物作為Th17細胞分化抑制劑的應用。專利技術人通過基于轉錄因子活性的熒光素酶活性篩選系統，發現4N雜環連苯化合物具有抑制Th17細胞分化的關鍵轉錄因子RORγt的能力，抑制能力EC50在0.2-1.5μM之間，在利用體外Th17細胞分化實驗驗證這些化合物具有抑制Th17分化的的功能，包括能夠顯著降低RORγt的轉錄表達，能夠抑制T本文檔來自技高網...

【技術保護點】
4N雜環化合物作為RORγt抑制劑或自免疫疾病藥物的應用，4N雜環化合物的通式為，式中，R1、R2獨立為H或C1～C3的飽和烴基，位于苯環1～5位中的兩個上；R3為含有至少一個N的雜苯并二環基團。

【技術特征摘要】
1.4N雜環化合物在制備RORγt抑制劑或自免疫疾病藥物的應用，其中，4N雜環化合物選自、或。2.根據權利要求...

【專利技術屬性】
技術研發人員：黃朝峰，柏川，丁慶峰，
申請(專利權)人：中山大學，
類型：發明
國別省市：廣東;44