一種利用纖維化纖維微細菌制備微生物絮凝劑的方法，屬于微生物絮凝劑。其工藝如下：A.將菌種纖維化纖維微細菌(Cellulosimicrobiumcellulans)接種到斜面培養基上，并4℃保存；B.將菌種接種到種子液培養基中，37℃搖床培養制備種子液；C.將種子液按1％比例轉接到以玉米秸稈為唯一碳源的發酵培養基中，37℃，180r/min搖床培養48小時；D.將發酵培養基在4℃，10000r/min離心10min，去除沉淀，上清液即為液體生物絮凝劑；E.向液體發酵液中加入2倍體積預冷的無水乙醇，離心收集沉淀物并冷凍干燥得到純品生物絮凝劑。本發明專利技術的特點是利用廉價的玉米秸稈直接發酵生產微生物絮凝劑，能有效降低微生物絮凝劑的生產成本，適應大規模生產及工業化應用，具有很好的推廣應用前景。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及一種微生物絮凝劑的制備方法，特別是一種。
技術介紹
我國是農業大國，每年農業生產過程中產生大量農業廢棄物，如玉米秸桿，玉米芯，甘蔗渣，薯渣等，這些殘渣中含有豐富的纖維素類物質，這些纖維素可以被微生物分解成糖類，從而轉化為其他有價值的產品。如何有效將這些廢棄物中的纖維素轉化成有價值的產品具有重要的經濟意義。絮凝劑是一類可以凝聚沉降溶液中不易沉降的懸浮顆粒的物質，主要分為無機絮凝劑、有機高分子絮凝劑和微生物絮凝劑。微生物絮凝劑是第三代絮凝劑，是由微生物產生的代謝產物，如糖蛋白、粘多糖、蛋白質、纖維素和DNA等，具有無毒無害，安全性高，生物易降解，無二次污染的特點，因此微生物絮凝劑可以被廣泛應用于污水處理，尤其是在食品和發酵工業的后處理等工藝中具有獨特的優勢，其研宄日益受到重視。不同的菌株能夠合成不同種類的生物絮凝劑，已報道的產微生物絮凝劑的菌株有幾十種，如Bacillus SP.F19所產的絮凝劑主要有中性糖、糖醛酸、氨基糖和蛋白質等組成，其最佳發酵培養基:鹿糖20g/L，酵母粉2.5g/L ；Proteus mirabilis TJl能產生一種有多糖和蛋白質組成的生物絮凝劑，其培養基組成:葡萄糖10g/L，蛋白胨lg/L ；Bacillusfirmus能產生一種多糖絮凝劑，其發酵培養基:葡萄糖20g/L，蛋白胨5g/L ;這些菌種所用培養基組分昂貴，造成生物絮凝劑生產成本高，目前未見有關本專利技術所用菌種纖維化纖維微細菌(Cellulosimicrobiumcellulan)生產微生物絮凝劑的報道。專利檢索未發現利用玉米秸桿直接發酵生產微生物絮凝的專利。
技術實現思路
本專利技術的目的是要提供一種能夠有效降低微生物絮凝劑的生產成本的。本專利技術的目的是這樣實現的:該絮凝劑方法的工藝步驟如下:步驟1、將菌種纖維化纖維微細菌(Cellulosimicrobiumcellulans)接種到斜面培養基上，并4°C保存；步驟2、將菌種接種到種子液培養基中，37°C搖床培養制備種子液；步驟3、將種子液按I %比例轉接到以玉米秸桿為唯一碳源的發酵培養基中，370C，180r/min搖床培養48小時；步驟4、將發酵培養基在4°C，10000r/min離心lOmin，去除沉淀，上清液即為液體生物絮凝劑；步驟5、向液體發酵液中加入2倍體積預冷的無水乙醇，離心收集沉淀物并冷凍干燥得到純品生物絮凝劑。所述的步驟I中:將纖維化纖維微細菌種子液接種于發酵培養基中，搖瓶發酵48小時，提取微生物絮凝劑純品。所述的步驟2中，所述種子液接于發酵培養中的接種量為1% ;所述發酵培養條件為:發酵液初始pH 8-10 ;所用菌種為纖維化纖維微細菌Cellulosimicrobiumcellulans ；所述的步驟5中，向上清液中加入2倍體積預冷的無水乙醇，10000r/min離心1min收集沉淀，70 %乙醇洗滌沉淀后冷凍干燥，獲得微生物絮凝劑純品。所述的種子液培養基組份為:葡萄糖2g/L，可溶性淀粉2g/L，酵母粉2g/L，胰蛋白胨2g/L，水解酪蛋白2g/L，硫酸鎂0.2g/L，磷酸氫二鉀1.2g/L。所述的發酵培養基組份如下:玉米秸桿粉為碳源20g/L、酵母粉為氮源3g/L、七水硫酸鎂0.2g/L、磷酸氫二鉀1.2g/L、碳酸鈉0.4g/L。有益效果，由于采用了上述方案，本專利技術首次提出利用纖維化纖維微細菌Cellulosimicrobiumcellulans生產生物絮凝劑，該菌種能產生較高的纖維素酶活和木聚糖酶活，分解玉米秸桿中的纖維素組分，直接發酵轉化玉米秸桿生產微生物絮凝劑，降低微生物絮凝劑成本，安全性更高。利用纖維化纖維微細菌轉化玉米秸桿直接發酵生產微生物絮凝劑，有效降低微生物絮凝劑的生產成本，實現玉米秸桿的資源化利用。優點:利用纖維化纖維微細菌Cellulosimicrobiumcellulans在堿性條件下轉化纖維素殘渣產生高活性的生物絮凝劑的方法。該菌株具有生長速度快，高度耐堿性，發酵周期短，絮凝劑產量高等優點，能夠有效降低微生物絮凝劑的生產成本。a、本專利技術從秸桿還田土中分離得到一株纖維化纖維微細菌，該菌株生長速度快，發酵周期短，微生物絮凝劑產量高，以前的報道中未見關于纖維化纖維微細菌產生微生物絮凝劑的報道。b、本專利技術所用菌種纖維化纖維微細菌具有很好的纖維素酶活和木聚糖酶活，能降解玉米秸桿中纖維素組分，直接生產微生物絮凝劑，避免了現有技術利用高溫強酸水解秸桿產生的有毒物質；生產工藝相對簡化，有利于進一步降低微生物絮凝劑成本。C、本專利技術所用菌種纖維化纖維微細菌具有很好的耐堿性能，能在堿性條件下(PH8-10)生長，分解玉米秸桿。堿性條件下有利于玉米秸桿的膨脹，提高玉米秸桿中纖維素的分解轉化生產微生物絮凝劑的效率。【具體實施方式】該絮凝劑方法的工藝步驟如下:步驟1、將菌種纖維化纖維微細菌(Cellulosimicrobiumcellulans)接種到斜面培養基上，并4°C保存；步驟2、將菌種接種到種子液培養基中，37°C搖床培養制備種子液；步驟3、將種子液按I %比例轉接到以玉米秸桿為唯一碳源的發酵培養基中，370C，180r/min搖床培養48小時；步驟4、將發酵培養基在4°C，10000r/min離心lOmin，去除沉淀，上清液即為液體生物絮凝劑；步驟5、向液體發酵液中加入2倍體積預冷的無水乙醇，離心收集沉淀物并冷凍干燥得到純品生物絮凝劑。所述的步驟I中:將纖維化纖維微細菌種子液接種于發酵培養基中，搖瓶發酵48小時，提取微生物絮凝劑純品。所述的步驟2中，所述種子液轉接于發酵培養中的接種量為I % ;所述發酵培養條件為:發酵液當前第1頁1 2 本文檔來自技高網...
【技術保護點】
一種利用纖維化纖維微細菌制備微生物絮凝劑的方法，其特征是：該絮凝劑方法的工藝步驟如下：步驟1、將菌種纖維化纖維微細菌接種到斜面培養基上，并4?℃保存；步驟2、將菌種接種到種子液培養基中，37?℃搖床培養制備種子液；步驟3、將種子液按1%比例轉接到以玉米秸稈為唯一碳源的發酵培養基中，37?℃，180?r/min搖床培養48小時；步驟4、將發酵培養基在4℃，10000?r/min離心10?min，去除沉淀，上清液即為液體生物絮凝劑；步驟5、向液體發酵液中加入2倍體積預冷的無水乙醇，離心收集沉淀物并冷凍干燥得到純品生物絮凝劑。
【技術特征摘要】
【專利技術屬性】
技術研發人員：劉偉杰，
申請(專利權)人：江蘇師范大學，
類型：發明
國別省市：江蘇;32
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