本發(fā)明專利技術(shù)公開(kāi)一種檢測(cè)血樣離子鈣含量的方法，屬于鈣離子檢測(cè)領(lǐng)域。本發(fā)明專利技術(shù)利用聚四氟乙烯、合成植物酯、四苯硼鈉、月桂酸酯、N-丁基吡啶六氟磷酸鈣、N，N，N′，N′-四環(huán)己基-3-氧雜戊二酰胺作為溶質(zhì)，與溶劑四氫呋喃制成鈣離子感應(yīng)膜，裝入玻碳電極基體上，得到鈣離子選擇電極；使用自制鈣離子選擇電極用離子選擇電極法測(cè)定血樣離子鈣。本發(fā)明專利技術(shù)能快速測(cè)出血樣中的鈣離子含量，測(cè)量精度高，穩(wěn)定性好，特異性高，測(cè)量步驟簡(jiǎn)單，測(cè)試成本低。
【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及鈣離子檢測(cè)領(lǐng)域，具體是。
技術(shù)介紹
血鈣幾乎全部存在于血漿中，可分為擴(kuò)散鈣和非擴(kuò)散鈣兩大類。非擴(kuò)散鈣是指與蛋白質(zhì)(主要是白蛋白)結(jié)合的鈣，約占血漿總鈣的40%。60%為可擴(kuò)散鈣。這兩類鈣以三種形式存在:①擴(kuò)散性離子鈣，為具有生理活性的部分。②擴(kuò)散性非離子鈣(約占血清總鈣量的15% )為與枸櫞酸、重碳酸根結(jié)合而成復(fù)合鈣。③非擴(kuò)散鈣為與血漿白蛋白結(jié)合的鈣，其含量和血漿白蛋白濃度有關(guān)，這部分鈣不易透過(guò)血管壁，亦無(wú)生理活性，如血漿白蛋白明顯下降，非擴(kuò)散性鈣也減少，以致血清總鈣量下降，但因游離鈣不減少，所以臨床上不出現(xiàn)缺鈣癥狀。非擴(kuò)散性鈣和擴(kuò)散性非離子鈣為結(jié)合性鈣，非擴(kuò)散性鈣和離子鈣之間可以互相轉(zhuǎn)變，呈動(dòng)態(tài)平衡，當(dāng)游離鈣濃度降低時(shí)，非擴(kuò)散性鈣可以逐漸釋放成游離鈣。血鈣的測(cè)定方法很多，一般可分為總鈣測(cè)定和離子鈣測(cè)定法。前者包括同位素稀釋質(zhì)譜法(isotopediluting mass spectrometry)、原子吸收光譜法(atomic absorpt1n spectroscopy,AAS)、分光光度法(spectrophotography)和絡(luò)合滴定法(chelating titrat1n)等。AAS是最常用的準(zhǔn)確測(cè)定血漿總鈣含量的參考方法，但費(fèi)用昂貴，不適于常規(guī)工作；分光光度法中以甲基百里香酸藍(lán)比色法(methyl thymol blue colorimetry)和偶氮胂III比色法(Arsenazo III colorimetry)最常用。絡(luò)合滴定法簡(jiǎn)便易行，但判斷終點(diǎn)受主觀因素影響，有被淘汰趨勢(shì)，但不少基層實(shí)驗(yàn)室仍延用。國(guó)際臨床化學(xué)聯(lián)合會(huì)(IFCC)推薦同位素稀釋質(zhì)譜法(IDMS)為決定性方法，原子吸收分光光度法為參考方法。世界衛(wèi)生組織(WHO)推薦的一般實(shí)驗(yàn)室常規(guī)測(cè)定方法為鄰甲酚酞絡(luò)合銅法(OCPC)。離子選擇電極法測(cè)定離子鈣已在臨床應(yīng)用，雖然電極法測(cè)定過(guò)程無(wú)化學(xué)污染、快速方便，但相對(duì)其他方法來(lái)說(shuō)穩(wěn)定性和特異性較差。CN102735736B公開(kāi)一種用于鈣離子選擇電極的感應(yīng)膜，該膜的選擇性有待提高，其離子選擇性載體為月桂酸酯。專利技術(shù)專利CN102507696B公開(kāi)了一種基于石墨烯電極的離子選擇性電極，包括電極基體和涂敷在電極基體表面的離子選擇性聚合物膜，所述的電極基體為電極中摻雜有石墨稀或通過(guò)電沉積在電極表面修飾有石墨稀膜的電極。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，提供，該方法快速方便、穩(wěn)定性和特異性好。為了達(dá)到上述目的，本專利技術(shù)采用以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn):，具體步驟包括:⑴自制鈣離子選擇電極:將按質(zhì)量百分比計(jì)的聚四氟乙烯33-35%、合成植物酯62-65%、四苯硼鈉0.5-1.0 %、月桂酸酯1-1.5 %、N- 丁基吡啶六氟磷酸鈣1-1.5 %、N，N，N'，N'-四環(huán)己基-3-氧雜戊二酰胺0-0.5%作為溶質(zhì)，與溶劑四氫呋喃混合攪拌均勻，其中溶劑質(zhì)量是溶質(zhì)的4-8倍，在常溫下混合攪拌16h，然后揮發(fā)60h后制得膜厚為0.4-0.6mm感應(yīng)膜，將感應(yīng)膜裝入玻碳電極基體上，得到1?離子選擇電極；⑵配制鈣離子標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，在室溫下，通過(guò)鈣離子選擇性電極及參比電極建立兩電極體系，具體包括指示電極和飽和甘汞電極，鈣離子選擇性電極連接到指示電極上，飽和甘汞電極做參比電極，測(cè)量不同濃度的鈣離子在含有氯化鈉和Tris-NaAc緩沖溶液的測(cè)量液中的電位響應(yīng)值，繪制濃度_電位響應(yīng)值工作曲線，在測(cè)量液中，氯化鈉的摩爾濃度為0.10mol/L，Tris-NaAc 緩沖溶液的 pH = 7.4 ；⑶測(cè)量待測(cè)血樣鈣離子的電位響應(yīng)值，將電位響應(yīng)值代入濃度_電位響應(yīng)值工作曲線，得到待測(cè)血樣鈣離子濃度。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本專利技術(shù)的有益效果:能快速測(cè)出血樣中的鈣離子含量，測(cè)量精度高，穩(wěn)定性好，特異性高，測(cè)量步驟簡(jiǎn)單，測(cè)試成本低?！揪唧w實(shí)施方式】下面實(shí)施例用于進(jìn)一步說(shuō)明本專利技術(shù)，但并不以任何形式限制本專利技術(shù)涉及的內(nèi)容。實(shí)施例，具體步驟包括:⑴自制鈣離子選擇電極:將按質(zhì)量百分比計(jì)的聚四氟乙烯33.5%、合成植物酯63%、四苯硼鈉0.8%、月桂酸酯1.2%、N-丁基吡啶六氟磷酸鈣1.2%、N，N，f , Nr -四環(huán)己基-3-氧雜戊二酰胺0.3%作為溶質(zhì)，與溶劑四氫呋喃混合攪拌均勻，其中溶劑質(zhì)量是溶質(zhì)的6倍，在常溫下混合攪拌16h，然后揮發(fā)60h后制得膜厚為0.5_感應(yīng)膜，將感應(yīng)膜裝入玻碳電極基體上，得到鈣離子選擇電極；⑵配制鈣離子標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，在室溫下，通過(guò)鈣離子選擇性電極及參比電極建立兩電極體系，具體包括指示電極和飽和甘汞電極，鈣離子選擇性電極連接到指示電極上，飽和甘汞電極做參比電極，測(cè)量不同濃度的鈣離子在含有氯化鈉和Tris-NaAc緩沖溶液的測(cè)量液中的電位響應(yīng)值，繪制濃度_電位響應(yīng)值工作曲線，在測(cè)量液中，氯化鈉的摩爾濃度為0.10mol/L，Tris-NaAc 緩沖溶液的 pH = 7.4 ；⑶測(cè)量待測(cè)血樣鈣離子的電位響應(yīng)值，將電位響應(yīng)值代入濃度-電位響應(yīng)值工作曲線，得到待測(cè)血樣鈣離子濃度。經(jīng)測(cè)定，本實(shí)施例的鈣離子選擇性電極的電極電位達(dá)到平衡穩(wěn)定的響應(yīng)時(shí)間不超過(guò)25s，其中鈣離子在摩爾濃度為1.00X10_5-1.00X10_2mol/L的范圍內(nèi)呈現(xiàn)能斯特響應(yīng)。按實(shí)施例的方法對(duì)無(wú)任何急慢性疾病的正常人血漿進(jìn)行20次重復(fù)性檢測(cè)，結(jié)果顯示，血樣離子鈣平均為1.18mmol/Lo進(jìn)行加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，測(cè)得平均回收率為99.6%。以上所述的實(shí)施例為本專利技術(shù)的較佳實(shí)施例，并非是對(duì)本專利技術(shù)作其它形式的限制，任何熟悉本專業(yè)的技術(shù)人員可能利用上述揭示的
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
加以變更或改型為等同變化的等效實(shí)施例。但是凡是未脫離本專利技術(shù)技術(shù)方案內(nèi)容，依據(jù)本專利技術(shù)的技術(shù)實(shí)質(zhì)對(duì)以上實(shí)施例所作的任何簡(jiǎn)單修改、等同變化與改型，仍屬于本專利技術(shù)技術(shù)方案的保護(hù)范圍?！局鳈?quán)項(xiàng)】1.，其特征在于:具體步驟包括: ⑴自制鈣離子選擇電極:將按質(zhì)量百分比計(jì)的聚四氟乙烯33-35 %、合成植物酯。62-65%、四苯硼鈉0.5-1.0 %、月桂酸酯1-1.5 %、N- 丁基吡啶六氟磷酸鈣1-1.5 %、N，N，N'，N'-四環(huán)己基-3-氧雜戊二酰胺0-0.5%作為溶質(zhì)，與溶劑四氫呋喃混合攪拌均勻，其中溶劑質(zhì)量是溶質(zhì)的4-8倍，在常溫下混合攪拌16h，然后揮發(fā)60h后制得膜厚為。0.4-0.6mm感應(yīng)膜，將感應(yīng)膜裝入玻碳電極基體上，得到媽離子選擇電極； ⑵配制鈣離子標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，在室溫下，通過(guò)鈣離子選擇性電極及參比電極建立兩電極體系，具體包括指示電極和飽和甘汞電極，鈣離子選擇性電極連接到指示電極上，飽和甘汞電極做參比電極，測(cè)量不同濃度的鈣離子在含有氯化鈉和Tris-NaAc緩沖溶液的測(cè)量液中的電位響應(yīng)值，繪制濃度-電位響應(yīng)值工作曲線，在測(cè)量液中，氯化鈉的摩爾濃度為。0.10mol/L，Tris-NaAc 緩沖溶液的 pH = 7.4 ； ⑶測(cè)量待測(cè)血樣鈣離子的電位響應(yīng)值，將電位響應(yīng)值代入濃度-電位響應(yīng)值工作曲線，得到待測(cè)血樣鈣離子濃度?！緦＠勘緦＠夹g(shù)公開(kāi)，屬于鈣離子檢測(cè)領(lǐng)域。本專利技術(shù)利用聚四氟乙烯、合成植物酯、四苯硼鈉、月桂酸酯、N-丁基吡啶六氟磷酸鈣、N，N，N′，N′-四環(huán)己基-3-氧雜戊二酰胺作為溶質(zhì)，與溶劑四氫呋喃制成鈣離子感應(yīng)膜，裝入玻碳電極基體上，得到鈣離本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種檢測(cè)血樣離子鈣含量的方法，其特征在于：具體步驟包括：⑴自制鈣離子選擇電極：將按質(zhì)量百分比計(jì)的聚四氟乙烯33?35％、合成植物酯62?65％、四苯硼鈉0.5?1.0％、月桂酸酯1?1.5％、N?丁基吡啶六氟磷酸鈣1?1.5％、N，N，N′，N′?四環(huán)己基?3?氧雜戊二酰胺0?0.5％作為溶質(zhì)，與溶劑四氫呋喃混合攪拌均勻，其中溶劑質(zhì)量是溶質(zhì)的4?8倍，在常溫下混合攪拌16h，然后揮發(fā)60h后制得膜厚為0.4?0.6mm感應(yīng)膜，將感應(yīng)膜裝入玻碳電極基體上，得到鈣離子選擇電極；⑵配制鈣離子標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，在室溫下，通過(guò)鈣離子選擇性電極及參比電極建立兩電極體系，具體包括指示電極和飽和甘汞電極，鈣離子選擇性電極連接到指示電極上，飽和甘汞電極做參比電極，測(cè)量不同濃度的鈣離子在含有氯化鈉和Tris?NaAc緩沖溶液的測(cè)量液中的電位響應(yīng)值，繪制濃度?電位響應(yīng)值工作曲線，在測(cè)量液中，氯化鈉的摩爾濃度為0.10mol/L，Tris?NaAc緩沖溶液的pH＝7.4；⑶測(cè)量待測(cè)血樣鈣離子的電位響應(yīng)值，將電位響應(yīng)值代入濃度?電位響應(yīng)值工作曲線，得到待測(cè)血樣鈣離子濃度。
【技術(shù)特征摘要】
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：李宏奎，鞏曉東，趙斌，趙喜平，賈繼芳，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：李宏奎，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：甘肅;62
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