一種石斛培育新方法技術

本發明專利技術提供了一種石斛培育新方法，包括胚培養、莖尖培養和幼嫩莖段培養，本發明專利技術屬于石斛的組織塊繁殖技術，通過石斛的胚體、芽幼嫩莖段進行大規模培養，通過培養條件以及培養基的優化，可以實現石斛的工業化生產，可以有效的推動我國石斛植物資源的開發和利用，同時將產生良好的經濟效益和生態效益。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及石斛的培養方法，特別是涉及一種石斛培育新方法。
技術介紹
石斛，又名萬丈須、吊蘭、林蘭、金釵華等。莖直立，肉質狀肥厚，稍扁的圓柱形，長10-60厘米，粗達1.3厘米。藥用植物，性味甘淡微咸，寒，歸胃、腎，肺經。益胃生津，滋陰清熱。用于陰傷津虧，口干煩渴，食少干嘔，病后虛熱，目暗不明。石斛花姿優雅，玲瓏可愛，花色鮮艷，氣味芳香，被喻為“四大觀賞洋花”之一。石斛喜在溫暖、潮濕、半陰半陽的環境中生長，以年降雨量1000毫米以上、空氣濕度大于80％、1月平均氣溫高于8℃的亞熱帶深山老林中生長為佳，對土肥要求不甚嚴格，野生多在疏松且厚的樹皮或樹干上生長，有的也生長于石縫中。
技術實現思路
本專利技術提供了一種石斛培育新方法，包括胚培養、莖尖培養和幼嫩莖段培養。一種石斛培育新方法，其特征在于，所述培養方法包括胚培養、莖尖培養和幼嫩莖段培養，每種培養的方法如下：(1)胚培養：取人工授粉的石斛果實，用體積分數為70-75％的酒精表面消毒25-30s，再用質量分數為0.1％的升汞消毒8-10min，無菌水沖洗4-6次后在無菌條件下把果實切成小方塊，之后接種到胚體培養基中，每瓶3-5塊；(2)莖尖培養：取石斛當年萌發的嫩芽尖，用質量分數為10-12％的次氯酸鈉消毒10-15min，之后用無菌水沖洗4-6次，之后接入莖尖培養基中培養30-35d，待長出白色顆粒狀愈傷組織后再培養18-20d，形成不定芽后，將愈傷?組織和不定芽切割開，在上述培養基中繼續繼代培養，之后將不定芽移到生根培養基中進行生根培養，30-35d發育成完整植株；(3)幼嫩莖段培養：剪取石斛嫩莖段，滅菌后切成2-3cm的切段，每段必須有一個莖節，將其接種到芽增值培養基中，培養30-50d后長出新芽，將新芽切下，接入上述培養基，培養30-35d生成叢生芽，切割后轉入無激素的MS培養基中進行壯苗培養，40-50d后可發育成完整株。優選的，所述步驟(1)中胚體培養基為N6培養基，附加0.2＝0.5mg/L?NAA和質量分數為2-5％的蔗糖。優選的，所述步驟(1)中培養溫度控制在25-28度，光照強度為1600-2000lx。優選的，所述步驟(2)中莖尖培養基為MS培養基，其中加入0.2-0.3mg/L的NAA和0.5-0.7mg/L的6-BA。優選的，所述步驟(3)中芽增值培養基為MS培養基，其中加入0.1-0.5mg/L的NAA和0.5-2mg/L的6-BA。優選的，所述步驟(3)中芽增值培養基中需要加入5％的生長調節劑，所述調節劑為0.1mg/L的2,4-D和1mg/L的ZT組成。有益效果：本專利技術提供了一種石斛培育新方法，包括胚培養、莖尖培養和幼嫩莖段培養，本專利技術屬于石斛的組織塊繁殖技術，通過石斛的胚體、芽幼嫩莖段進行大規模培養，通過培養條件以及培養基的優化，可以實現石斛的工業化生產，可以有效的推動我國石斛植物資源的開發和利用，同時將產生良好的經濟效益和生態效益。具體實施方式為使本專利技術實現的技術手段、創作特征、達成目的與功效易于明白了解，下面結合具體實施方式，進一步闡述本專利技術。實施例1：一種石斛培育新方法，其特征在于，所述培養方法包括胚培養、莖尖培養和幼嫩莖段培養，每種培養的方法如下：(1)胚培養：取人工授粉的石斛果實，用體積分數為70％的酒精表面消毒25s，再用質量分數為0.1％的升汞消毒8min，無菌水沖洗4次后在無菌條件下把果實切成小方塊，之后接種到胚體培養基中，每瓶3塊；(2)莖尖培養：取石斛當年萌發的嫩芽尖，用質量分數為10％的次氯酸鈉消毒10min，之后用無菌水沖洗4次，之后接入莖尖培養基中培養30d，待長出白色顆粒狀愈傷組織后再培養18d，形成不定芽后，將愈傷組織和不定芽切割開，在上述培養基中繼續繼代培養，之后將不定芽移到生根培養基中進行生根培養，30d發育成完整植株；(3)幼嫩莖段培養：剪取石斛嫩莖段，滅菌后切成2cm的切段，每段必須有一個莖節，將其接種到芽增值培養基中，培養30d后長出新芽，將新芽切下，接入上述培養基，培養30d生成叢生芽，切割后轉入無激素的MS培養基中進行壯苗培養，40d后可發育成完整株。其中，所述步驟(1)中胚體培養基為N6培養基，附加0.2mg/L?NAA和質量分數為2％的蔗糖，所述步驟(1)中培養溫度控制在25度，光照強度為1600lx，所述步驟(2)中莖尖培養基為MS培養基，其中加入0.2mg/L的NAA和0.5mg/L的6-BA，所述步驟(3)中芽增值培養基為MS培養基，其中加入0.1mg/L的NAA和0.5-2mg/L的6-BA，所述步驟(3)中芽增值培養基中需要加入5％的生長調節劑，所述調節劑為0.1mg/L的2,4-D和1mg/L的ZT組成。實施例2：一種石斛培育新方法，其特征在于，所述培養方法包括胚培養、莖尖培養和幼嫩莖段培養，每種培養的方法如下：(1)胚培養：取人工授粉的石斛果實，用體積分數為72％的酒精表面消毒28s，再用質量分數為0.1％的升汞消毒9min，無菌水沖洗5次后在無菌條件下把果實切成小方塊，之后接種到胚體培養基中，每瓶4塊；(2)莖尖培養：取石斛當年萌發的嫩芽尖，用質量分數為11％的次氯酸鈉消毒12min，之后用無菌水沖5次，之后接入莖尖培養基中培養32d，待長出白色顆粒狀愈傷組織后再培養19d，形成不定芽后，將愈傷組織和不定芽切割開，在上述培養基中繼續繼代培養，之后將不定芽移到生根培養基中進行生根培養，32d發育成完整植株；(3)幼嫩莖段培養：剪取石斛嫩莖段，滅菌后切成2cm的切段，每段必須有一個莖節，將其接種到芽增值培養基中，培養40d后長出新芽，將新芽切下，接入上述培養基，培養32d生成叢生芽，切割后轉入無激素的MS培養基中進行壯苗培養，45d后可發育成完整株。其中，所述步驟(1)中胚體培養基為N6培養基，附加0.3mg/L?NAA和質量分數為3％的蔗糖，所述步驟(1)中培養溫度控制在27度，光照強度為1800lx，所述步驟(2)中莖尖培養基為MS培養基，其中加入0.2mg/L的NAA和0.6mg/L的6-BA，所述步驟(3)中芽增值培養基為MS培養基，其中加入0.3mg/L的NAA和1mg/L的6-BA，所述步驟(3)中芽增值培養基中需要加入5％的生長調節劑，所述調節劑為0.1mg/L的2,4-D和1mg/L的ZT組成。實施例3：一種石斛培育新方法，其特征在于，所述培養方法包括胚培養、莖尖培養和幼嫩莖段培養，每種培養的方法如下：(1)胚培養：取人工授粉的石斛果實，用體積分數為75％的酒精表面消毒30s，再用質量分數為0.1％的升汞消毒10min，無菌水沖洗6次后在無菌條件下把果實切成小方塊，之后接種到胚體培養基中，每瓶5塊；(2)莖尖培養：取石斛當年萌發的嫩芽尖，用質量分數為12％的次氯酸鈉?消毒15min，之后用無菌水沖洗6次，之后接入莖尖培養基中培養35d，待本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種石斛培育新方法，其特征在于，所述培養方法包括胚培養、莖尖培養和幼嫩莖段培養，每種培養的方法如下：（1）胚培養：取人工授粉的石斛果實，用體積分數為70?75%的酒精表面消毒25?30s，再用質量分數為0.1%的升汞消毒8?10min，無菌水沖洗4?6次后在無菌條件下把果實切成小方塊，之后接種到胚體培養基中，每瓶3?5塊；（2）莖尖培養：取石斛當年萌發的嫩芽尖，用質量分數為10?12%的次氯酸鈉消毒10?15min，之后用無菌水沖洗4?6次，之后接入莖尖培養基中培養30?35d，待長出白色顆粒狀愈傷組織后再培養18?20d，形成不定芽后，將愈傷組織和不定芽切割開，在上述培養基中繼續繼代培養，之后將不定芽移到生根培養基中進行生根培養，30?35d發育成完整植株；（3）幼嫩莖段培養：剪取石斛嫩莖段，滅菌后切成2?3cm的切段，每段必須有一個莖節，將其接種到芽增值培養基中，培養30?50d后長出新芽，將新芽切下，接入上述培養基，培養30?35d生成叢生芽，切割后轉入無激素的MS培養基中進行壯苗培養，40?50d后可發育成完整株。

【技術特征摘要】
1.一種石斛培育新方法，其特征在于，所述培養方法包括胚培養、莖尖培養和幼嫩莖段培養，每種培養的方法如下：
（1）胚培養：取人工授粉的石斛果實，用體積分數為70-75%的酒精表面消毒25-30s，再用質量分數為0.1%的升汞消毒8-10min，無菌水沖洗4-6次后在無菌條件下把果實切成小方塊，之后接種到胚體培養基中，每瓶3-5塊；
（2）莖尖培養：取石斛當年萌發的嫩芽尖，用質量分數為10-12%的次氯酸鈉消毒10-15min，之后用無菌水沖洗4-6次，之后接入莖尖培養基中培養30-35d，待長出白色顆粒狀愈傷組織后再培養18-20d，形成不定芽后，將愈傷組織和不定芽切割開，在上述培養基中繼續繼代培養，之后將不定芽移到生根培養基中進行生根培養，30-35d發育成完整植株；
（3）幼嫩莖段培養：剪取石斛嫩莖段，滅菌后切成2-3cm的切段，每段必須有一個莖節，將其接種到芽增值培養基中，培養30-50d后長出新芽，將新芽切下，接入上述培養基，培養30-35d生成叢生芽，切割后轉入無激素的M...

【專利技術屬性】
技術研發人員：吳功利，
申請(專利權)人：霍山縣眾康堂中藥材開發有限公司，
類型：發明
國別省市：安徽;34