本發明專利技術涉及微生物和新型醫藥農藥領域，具體為一種海洋異壁放線菌及其應用。異壁放線菌為Actinoalloteichus?sp.SHA6，于2014年2月20日保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏編號：CCTCC?M2014041。以海洋異壁放線菌產生的maclafungin類化合物如(I)所示。本發明專利技術所得如(I)所示的maclafungins類化合物具有顯著的抗真菌和殺蟲作用，可作為抗菌和殺蟲的理想候選化合物。所述的化合物能通過微生物發酵生產，其制備方法簡單、高效，所得產物純度高。該發明專利技術具有良好的應用前景。其中，R1為H或CH3；R2為H或CH3。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及微生物和新型醫藥農藥領域，具體為一種異壁放線菌和三種新的抗真 菌maclafungins類化合物及其制備和應用。
技術介紹
異壁放線菌屬（Actinoalloteichus)是2000年日本科學家Tomohiko Tamura發現的一個新屬。迄今為止一共報道了 4個新種，分別為Actinoalloteichus cyanogriseus, Actinoalloteichus hymeniacidonis, Actinoalloteichus spitiensis和 Actinoalloteichus nanshanensis。異壁放線菌含有豐富的次生代謝產物基因簇，從其中 已經發現了新骨架生物堿cyanogrisides A-D，新化合物caerulomycins F-I和一些新的環 戊烯酮。因此異壁放線菌是發現新穎活性產物的新資源。本專利技術提供了一個新的異壁放線 菌株，具有非常強的抗菌和殺蟲活性，且其能產生新穎的抗真菌和殺蟲maclafungins類化 合物。 Maclafungin 是由印度學者 Triptikumar Mukhopadhyay 于 1998 年報道一個具有 寡霉素骨架結構的新型抗真菌先導化合物，其具有極強的抗真菌活性。對Trichophyton mentagrophytes、Fusarium culmorum、Botrytis cinerea、Pyricularia oryzae、 Alternaria solani 抑制作用最強，Cercospora beticola、 Microsporum gvpseum、 Aspergillus nige;r、Penicillium digitatum 抑制作用次之，對 Candida albicans 有較弱 的抑制作用。Maclafungin類抗生素較為罕見，目前，該類化合物僅發現一個，因此其抗菌機 理和生物合成機理尚未報道。 Maclafungin是一類在C6-C12和C24的連接基團明顯不同于寡霉素，但它們均為與 寡霉素相似的具有二十六元環和螺環結構的大環內酯類抗生素，因此其可能具有類似于寡 霉素的功能。寡霉素（oligomycins)由典型的I型聚酮合酶催化合成，它們具有多樣的生 物活性，包括包括抗腫瘤活性、抗真菌活性及殺蟲活性等。目前作為ATP合酶抑制劑，已被 廣泛應用于科學研究當中。它們作為化學試劑，價格昂貴，具有一定經濟價值。因此可推測 maclafungin也應該具有抗真菌、抗腫瘤和殺蟲等多樣的生物活性。
技術實現思路
本專利技術目的在于提供一種海洋異壁放線菌和以海洋異壁放線菌產生的 maclafungin類化合物及其制備和應用。 為了實現上述目的，本專利技術采用的技術方案為： -種異壁放線菌，異壁放線菌為異壁放線菌SHA6 (Actinoalloteichus sp. SHA6)，于2014年2月20日保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏編號：CCTCC N0:M2014041。 一種以海洋異壁放線菌產生的maclafungin類化合物，其特征在于：maclafungin 類化合物如（I)所示，【主權項】1. 一種異壁放線菌，其特征在于：異壁放線菌為Actinoalloteichus SP.SHA6,于2014 年2月20日保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏編號：CCTCC M2014041。2. -種權利要求1所述的以海洋異壁放線菌產生的maclafungin類化合物，其特征在 于：maclafungin類化合物如（I)所示，其中，R1為H或CH3 ;R2為H或CH3。3. -種權利要求2所述的以海洋異壁放線菌產生的maclafungin類化合物的制備方 法，其特征在于 ： 1) 將異壁放線菌Actinoalloteichus sp. SHA6接種于含人工海鹽的PSB培養基中發酵 2-5天作為發酵種子；然后將發酵種子液于28°C培養5-10天，待用； 2) 將發酵液和菌絲體固液分離，其中發酵液用大孔吸附樹脂HP20吸附，吸附后經乙醇 解吸回收乙醇溶劑后得maclafungin的粗提物A ;菌絲體經丙酮浸提，將浸泡液減壓濃縮為 浸膏使用甲醇精制得到maclafungin的粗提物B ; 3) 將maclafungin的粗提物A和B合并，采用快速硅膠柱色譜法分離，按照二氯甲燒： 甲醇（v/v)比為10:0-0:10梯度洗脫，收集體積比為10:0-2:8的二氯甲烷-甲醇（v/v)的 洗脫組分，上述所得色譜流分再采用反相ODS快速色譜進行分離，按照甲醇：水（v/v)比為 3:2-1:0梯度洗脫，收集體積百分比為85%-100%的甲醇水溶液洗脫液，將收集的組分再以 反相HPLC進行純化，流動相為含0. 05%TFA的體積百分比85%的甲醇水溶液等度洗脫，流速 為2-5ml/min;于保留時間13-23min收集組分即為如（I)所示m的aclafungin類化合物。4. 按權利要求3所述的以海洋異壁放線菌產生的maclafungin類化合物的制備 方法，其特征在于：所述步驟3)反相HPLC進行純化保留時間17. 0-18. 2min即為純的 111已(313；1!\11^;^(313；1!\11^;[118〇(313)和保留時 間 20. 0-21. Omin 即為純的 maclafungins D (3c)。5. 按權利要求3所述的以海洋異壁放線菌產生的maclafungin類化合物的制備方法， 其特征在于：所述步驟1)將發酵種子與含人工海鹽的PSB培養基按照體積比1:8-1:20的 比例混合于28°C培養5-10天進行發酵。6. 按權利要求3所述的以海洋異壁放線菌產生的maclafungin類化合物的制備方 法，其特征在于：所述步驟2)發酵液用大孔吸附樹脂HP20吸附，樹脂與發酵液體積比為 1:15-1:30混合，混合后吸附2- ? h吸附后，先用蒸餾水洗滌樹脂，10-15%乙醇除去雜質， 再用100%乙醇解吸，回收乙醇溶劑后得maclafungin的粗提物A ;菌絲體經丙酮浸提3次， 將浸泡液減壓濃縮為浸膏使用甲醇精制得到maclafungin的粗提物B。7. -種權利要求2所述的以海洋異壁放線菌產生的maclafungin類化合物的應用，其 特征在于：所述化合物可作為制備成醫用、獸用或農用非治療目的的抗真菌劑。8. -種權利要求2所述的以海洋異壁放線菌產生的maclafungin類化合物的應用，其 特征在于：所述化合物可作為制備成醫用、獸用或農用非治療目的的殺蟲劑。9. 權利要求7所述的以海洋異壁放線菌產生的maclafungin類化合物的應用，其特征 在于：所述化合物可作為立枯絲核菌或鐮刀菌的抑菌劑。10. 權利要求8所述的以海洋異壁放線菌產生的maclafungin類化合物的應用，其特征 在于：所述化合物可作為殺鹵蟲劑。【專利摘要】本專利技術涉及微生物和新型醫藥農藥領域，具體為一種海洋異壁放線菌及其應用。異壁放線菌為Actinoalloteichus sp.SHA6，于2014年2月20日保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏編號：CCTCC M2014041。以海洋異壁放線菌產生的maclaf本文檔來自技高網...
【技術保護點】
一種異壁放線菌，其特征在于：異壁放線菌為Actinoalloteichus?sp.SHA6，于2014年2月20日保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏編號：CCTCC?M2014041。
【技術特征摘要】
【專利技術屬性】
技術研發人員：潘華奇，胡江春，王雪梅，王書錦，
申請(專利權)人：中國科學院沈陽應用生態研究所，
類型：發明
國別省市：遼寧;21
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