一類多氧孕甾烷化合物及用途制造技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)公開了一類多氧孕甾烷化合物及其在制備用于逆轉(zhuǎn)或抑制腫瘤細(xì)胞多藥耐藥性的藥物中的用途。

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
【國外來華專利技術(shù)】一類多氧孕甾烷化合物及用途
本申請涉及藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體地，涉及一類多氧孕甾烷化合物及其醫(yī)藥用途，特別是該類化合物在制備用于逆轉(zhuǎn)或抑制腫瘤細(xì)胞多藥耐藥性的藥物中的用途。
技術(shù)介紹
多藥耐藥性(MutidrugResistance，MDR)是指腫瘤細(xì)胞對一種抗腫瘤藥物出現(xiàn)耐藥的同時，對其他結(jié)構(gòu)不同、作用靶位不同的抗腫瘤藥物也產(chǎn)生抗藥性的現(xiàn)象。MDR是腫瘤化療的一個主要的障礙。通常MDR是由腫瘤細(xì)胞內(nèi)ABC轉(zhuǎn)運(yùn)體的過表達(dá)而將抗腫瘤藥物逆濃度梯度轉(zhuǎn)移出細(xì)胞、導(dǎo)致藥物在腫瘤細(xì)胞積累的下降而引起。ABC轉(zhuǎn)運(yùn)體是一組大的膜結(jié)合蛋白，它是由兩個核苷酸結(jié)合結(jié)構(gòu)域和兩個跨膜區(qū)組成，將藥物底物主動轉(zhuǎn)運(yùn)出細(xì)胞是由跨膜區(qū)所介導(dǎo)。目前在人類基因組中已鑒定的ABC轉(zhuǎn)運(yùn)體有48種，基于序列的相似度，它們被分成了7個亞家族(A-G)。與MDR相關(guān)的3種主要的ABC轉(zhuǎn)運(yùn)體，分別是由ABCB1(或MDR-1)基因編碼的P-gp，由ABCC1(或MRP1)基因編碼的MRP1以及由ABCG2基因編碼的BCRP/ABCG2。它們具有廣泛的底物特異性，能夠轉(zhuǎn)運(yùn)多種藥物，毒物，代謝物和內(nèi)源性物質(zhì)。因此，它們的過表達(dá)常見于化療藥物篩選的腫瘤細(xì)胞系和臨床耐藥性。P-gp可以轉(zhuǎn)運(yùn)包括蒽環(huán)類抗生素(anthracyclines)長春胺類(vincas)、紫杉烷類(taxanes)、依托泊苷(etoposide)和米托蒽醌(mitoxantrone)在內(nèi)的各類化療藥物。P-gp廣泛的表達(dá)在體內(nèi)的不同組織，在腦的毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞和其它器官包括腸、睪丸和皮膚更有顯著地高表達(dá)。P-gp表達(dá)常見于腎癌、結(jié)腸癌、腎上腺癌和畸胎癌。P-gp底物藥物能通過一個或者多個結(jié)合位點(diǎn)與轉(zhuǎn)運(yùn)體結(jié)合，因此其轉(zhuǎn)運(yùn)的機(jī)理擁有一定的適應(yīng)性。維拉帕米(Verapamil)是第一個已知的P-gp抑制劑，研究表明它能夠通過抑制P-gp所介導(dǎo)的向外轉(zhuǎn)運(yùn)來增加抗腫瘤藥物在多藥耐藥細(xì)胞內(nèi)的濃度。這一發(fā)現(xiàn)使得逆轉(zhuǎn)抗腫瘤藥物的耐藥性燃起了希望。目前一些在臨床上使用的藥物，如鈣調(diào)蛋白阻滯劑、免疫抑制劑環(huán)孢菌素A及抗激素類藥物三苯氧胺等，均被發(fā)現(xiàn)具有較強(qiáng)P-gp的抑制活性，但這些藥物因自身具有其它藥理活性而均不能作為P-gp抑制劑與抗腫瘤藥聯(lián)用，來增強(qiáng)抗腫瘤藥物對MDR腫瘤細(xì)胞的敏感性。因此，迫切希望專利技術(shù)一種有效的MDR抑制劑或逆轉(zhuǎn)劑，能夠與抗腫瘤藥聯(lián)用逆轉(zhuǎn)惡性腫瘤的多藥耐藥性。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的是提供一種新型MDR抑制劑或逆轉(zhuǎn)劑，能夠與抗腫瘤藥聯(lián)用有效逆轉(zhuǎn)惡性腫瘤的多藥耐藥性。本專利技術(shù)的第一方面提供了一類結(jié)構(gòu)如下式所示的多氧孕甾烷化合物：其中，S2為S3為Ra為Rb為Tig為mBu為Bz為Ac為本專利技術(shù)的第二方面提供了一種制備如上第一方面所述多氧孕甾烷化合物的方法，該方法包括如下步驟：1、通光散干燥藤莖粉碎后，在室溫條件下，使用95％的工業(yè)酒精對通光散的干燥藤莖提取三次，每次三天，將每次的乙醇提取液合并，蒸除溶劑后，得乙醇提取物。該提取物懸浮于蒸餾水，然后相繼用乙酸乙酯和正丁醇萃取，蒸去溶劑后，分別得到乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物。2、將乙酸乙酯提取物進(jìn)行硅膠柱層析，依次用石油醚∶乙酸乙酯10∶3，2∶1，4∶3，1∶1(分別對應(yīng)組分A、B、C、D)，乙酸乙酯(對應(yīng)組分E)，然后乙酸乙酯∶甲醇20∶1，20∶3，20∶1(分別對應(yīng)組分F、G、H)洗脫，按薄層同一斑點(diǎn)合并，得A-H共8個組分。這8個組分經(jīng)硅膠柱層析、小孔樹脂柱層析、制備型高效液相色譜分離純化，得到上述化合物。本專利技術(shù)的第三方面提供了如上第一方面所述多氧孕甾烷化合物在制備用于逆轉(zhuǎn)或抑制腫瘤細(xì)胞多藥耐藥性的藥物中的用途，更具體地，所述多氧孕甾烷化合物能夠逆轉(zhuǎn)或抑制至少一種ABC轉(zhuǎn)運(yùn)體所介導(dǎo)的多藥耐藥性，優(yōu)選能夠逆轉(zhuǎn)或抑制選自P-gp、MRP1和ABCG2中的一種、兩種或三種轉(zhuǎn)運(yùn)體所介導(dǎo)的多藥耐藥性，更優(yōu)選能夠同時逆轉(zhuǎn)或抑制選自P-gp、MRP1和ABCG2中的兩種或三種轉(zhuǎn)運(yùn)體所介導(dǎo)的多藥耐藥性。優(yōu)選地，所述腫瘤細(xì)胞指的是結(jié)腸癌細(xì)胞、乳腺癌細(xì)胞、肝癌細(xì)胞、肺癌細(xì)胞、胃癌細(xì)胞、大腸癌細(xì)胞、骨肉瘤細(xì)胞、宮頸癌細(xì)胞。更優(yōu)地所述腫瘤細(xì)胞指的是結(jié)腸癌細(xì)胞或乳腺癌細(xì)胞，更佳地為人結(jié)腸癌耐藥亞細(xì)胞系SW620/Ad300，人乳腺癌耐藥亞細(xì)胞系MCF-7/VP和MCF-7/FLV1000。在如上述第一方面所述的多氧孕甾烷化合物中，作為一種與已知腫瘤細(xì)胞多藥耐藥逆轉(zhuǎn)劑的化學(xué)結(jié)構(gòu)不同的腫瘤細(xì)胞多藥耐藥逆轉(zhuǎn)劑，可以與抗腫瘤藥物或其他腫瘤細(xì)胞多藥耐藥逆轉(zhuǎn)劑藥物共同使用，提高抗腫瘤療效。優(yōu)選地化合物POP52、86、87和88能夠逆轉(zhuǎn)選自P-gp、MRP1和ABCG2中一種或多種的ABC轉(zhuǎn)運(yùn)體所介導(dǎo)的MDR，更優(yōu)選地，化合物POP86和87能夠同時逆轉(zhuǎn)P-gp、MRP1和ABCG2三種ABC轉(zhuǎn)運(yùn)體所介導(dǎo)的MDR。所述多氧孕甾烷化合物可以與選自烷化劑類、紫杉烷類、抗生素類、蒽環(huán)類、鬼臼毒素類、長春堿類、喜樹堿類、替尼類藥物中的一種或多種組合使用。更具體地，所述多氧孕甾烷化合物可以與順鉑、多西他賽、阿霉素、米托蒽醌、替尼泊苷、長春新堿、拓?fù)涮婵怠⒓翘婺岬嚷?lián)合使用。在如上述第一方面所述的多氧孕甾烷化合物中，作為一類結(jié)構(gòu)已知的多氧孕甾烷化合物，這類化合物至少能夠逆轉(zhuǎn)有一種ABC轉(zhuǎn)運(yùn)體所介導(dǎo)的MDR，可以與抗腫瘤藥物或其他腫瘤細(xì)胞多藥耐藥逆轉(zhuǎn)劑藥物共同使用，提高抗腫瘤療效。優(yōu)選地POP53，55，63和65能夠同時逆轉(zhuǎn)由兩種或多種ABC轉(zhuǎn)運(yùn)體P-gp和MRP1所介導(dǎo)的MDR，更優(yōu)地POP65能夠同時逆轉(zhuǎn)由三種轉(zhuǎn)運(yùn)體P-gp、MRP1和ABCG2所介導(dǎo)的MDR。本專利技術(shù)的第四方面提供了一種在體外細(xì)胞模型上測試多氧孕甾烷化合物逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞多藥耐藥性的方法。優(yōu)選地腫瘤細(xì)胞多藥耐藥是與選自P-gp、MRP1和ABCG2中的一種或多種轉(zhuǎn)運(yùn)體相關(guān)的。本專利技術(shù)的第四方面中，提供了一種藥物組合物，包含：(1)選自化合物POP52、化合物POP53、化合物POP55、化合物POP56、化合物POP62、化合物POP63、化合物POP65、化合物POP66、化合物POP86、化合物POP87、化合物POP88、化合物POP73、化合物POP74、化合物POP75、化合物POP76、化合物POP77、化合物POP81的一個或多個化合物；以及(2)藥學(xué)上可接受的鹽。本專利技術(shù)的第五方面中，提供了如本專利技術(shù)第四方面所述的藥物組合物的用途，(a)用作用于逆轉(zhuǎn)或抑制腫瘤細(xì)胞多藥耐藥性的藥物；和/或(b)用作P-gp和/或MRP1和/或ABCG2的抑制劑。在本專利技術(shù)的第六方面中，提供了如通式V所示的化合物的用途，所述化合物用于制備：(i)用于逆轉(zhuǎn)或抑制腫瘤細(xì)胞多藥耐藥性的藥物組合物；和/或(ii)P-gp抑制劑；其中，Ra和Rb各自獨(dú)立地為氫、乙酰基(Ac)、異丙酰基、苯甲酰基(Bz)、2-甲基丁酰基(mBu)或者巴豆酰基(Tig)；n為1～5的整數(shù)。在另一優(yōu)選例中，n為1～2的整數(shù)。在另一優(yōu)選例中，所述化合物選自下組：化合物RaRbnPOP68mBuAc1POP69BzAc1POP70TigAc1POP71BzmBu1POP82BzAc2POP83TigTig2POP84mBuAc2POP85TigAc2。本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
PCT國內(nèi)申請，權(quán)利要求書已公開。

【技術(shù)特征摘要】
【國外來華專利技術(shù)】2012.06.14 CN 20121019710091.一種通式V所示的化合物的用途，其特征在于，所述化合物用于制備：(i)用于逆轉(zhuǎn)或抑制腫瘤細(xì)胞多藥耐藥性的藥物組合物；和/或(ii)P-gp抑制劑；其中，Ra和Rb各自獨(dú)立地為氫、乙酰基、異丙酰基、苯甲酰基、2-甲基丁酰基或巴豆酰基；n為2～5的整數(shù)。2.一種通式V所示的化合物的用途，其特征在于，所述化合物用于制備：(i)用于逆轉(zhuǎn)或抑制腫瘤細(xì)胞多藥耐藥性的藥物組合物；和/或(ii)P-gp抑制劑；且通式V所示的化合物選自下組：化合物RaRbnPOP68mBuAc1POP69BzAc1POP70TigAc1POP71BzmBu1POP82BzAc2POP83TigTig2POP84mBuAc2POP85TigAc2。3.如權(quán)利要求2所述的用途，其特征在于，所述藥物組合物或抑制劑包含化合物POP68、69、70、71、82、83、84和85；且以所述藥物組合物的總重量計(jì)，所述化合物POP68、69、70的含量之和不低于50重量％。4.如權(quán)利要求2所述的用途，其特征在于，所述藥物組合物或抑制劑包含化合物POP68、69、70、71、82、83、84和85；且以所述藥物的總重量計(jì)，所述化合物POP68、69、70的含量之和不低于85重量％。5.如權(quán)利要求2所述的用途，其特征在于，所述藥物組合物或抑制劑包含化合物POP68、69和70；且以所述藥物組合物的總重量計(jì)，所述化合物的含量之和為100重量％。6.如權(quán)利要求1或2所述的用途，其特征在于，所述化合物用于制備用于逆轉(zhuǎn)或抑制腫瘤細(xì)胞由P-gp轉(zhuǎn)運(yùn)體所介導(dǎo)的多藥耐藥性的藥物組合物。7.如權(quán)利要求1或2所述的用途，其特征在于...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：葉陽，林革，姚勝，杜健華，馬良，蔡若涓，唐春萍，銀春，柯昌強(qiáng)，王亞周，
申請(專利權(quán))人：中國科學(xué)院上海藥物研究所，香港中文大學(xué)，
類型：發(fā)明
國別省市：上海;31