一種器官組織的快速染色方法技術

本發明專利技術公開了一種器官組織的快速染色方法，包括如下步驟：將組織切片放入染色架依次置于100％二甲苯I和100％二甲苯II中各8min；取出后按100％二甲苯I?5min、100％二甲苯II?5min、95％的酒精5min、85％的酒精5min、75％的酒精5min的梯度進行復水后，用自來水中流水沖洗，置于0.2％蘇木素染液中染色后，流水沖洗；置于1％鹽酸酒精中分化，快速拿起，放入燒杯中，流水水洗；將分化后的組織切片置于1％氨水中藍化，快速拿起，流水水洗；將藍化后的組織切片放入1％伊紅染液中染色后，放入盛有自來水的燒杯中，輕微震蕩，洗去切片上多余伊紅染液；脫水、透明處理后，進行中性樹脂封片。本發明專利技術染色效果好，染色所需的時間短，且穩定性高。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及器官組織染色領域，具體涉及。
技術介紹
目前，植物制片前需要進行前處理，將植物材料進行切成便于觀察的薄片才行，有兩種方法進行:一種為徒手切片法、另一種為石蠟切片法。徒手切片是用手持雙面刀片或剃刀，將新鮮材料或預先固定好的材料(切前水洗)切成薄片，不經染色或經簡單染色后，用水封片作臨時裝片觀察。徒手切片法的優點是不需要復雜的設備，方法簡便，制片迅速，而且能觀察到植物組織的自然色澤和活體結構，常用于研宄植物解剖結構、細胞組織化學成分，植物資源鑒定等。同時，它具有利于臨時觀察、能夠較快的得到結果的優點。缺點是對于體積過小、太軟、太硬的材料則難于切片，而且不能制成連續切片。切片法是最常用的一種制片法。其制作過程是:取材一固定一沖洗一脫水一透明—浸錯一包埋一切片一貼片一烤片一脫錯一復水一染色一脫水一透明一封臧。石錯制片是一個連續的操作過程，往往要連續幾天才能完成，容易與其它工作發生沖突，也會因前后順序顛倒或超過了規定的時間，給科研工作帶來不小的損失。制片的各個步驟都是互相關聯的，如脫水不徹底就會影響到透明的程度，以至影響蠟塊的質量，同時還存在染色效果差、穩定性差，速度慢的缺點。
技術實現思路
為解決上述問題，本專利技術提供了，染色效果好，染色所需的時間短，且穩定性高。為實現上述目的，本專利技術采取的技術方案為:，包括如下步驟:S1、脫蠟:將組織切片放入染色架依次置于100%二甲苯I和100%二甲苯II中各8min ；S2、復水:將組織切片按濃度為100%的二甲苯I 5min、濃度為100%二甲苯II5min、濃度為95 %的酒精5min、濃度為85 %的酒精5min、濃度為75 %的酒精5min的梯度進行復水，將復水后的切片置于自來水中流水沖洗5min ；S3、將步驟S2所得的組織切片置于0.2%蘇木素染液中染色12分鐘，流水沖洗組織切片至組織顏色透亮、切片干凈；S4、將步驟S3所得的組織切片置于I %鹽酸酒精中分化5s，快速拿起，放入燒杯中，流水水洗3min ；S5、將分化后的組織切片置于I %氨水中藍化5s，快速拿起，流水水洗3min ；S6、將藍化后的組織切片放入I %伊紅染液中染色3min后，放入盛有自來水的燒杯中，輕微震蕩，洗去切片上多余伊紅染液；S7、脫水:按濃度為75%的酒精1s濃度為85%的酒精30s、濃度為95%的酒精2min、濃度為100%的二甲苯I 5min、濃度為100%的二甲苯II 5min的梯度對組織切片進行脫水，脫水完后將切片放入烘箱5min，加速酒精揮發；S8、透明、封片:將烘干的切片依次置于100%二甲苯1、100%二甲苯II各8min，進行透明處理后，進行中性樹脂封片。本專利技術的染色結果為肉眼觀察組織切片呈紫紅色，光鏡下觀察細胞質呈紅色，細胞核呈藍紫色。本專利技術具有以下有益效果:染色效果好，染色所需的時間短，且穩定性高。【具體實施方式】為了使本專利技術的目的及優點更加清楚明白，以下結合實施例對本專利技術進行進一步詳細說明。應當理解，此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本專利技術，并不用于限定本專利技術。本專利技術實施例提供了，包括如下步驟:S1、脫蠟:將組織切片放入染色架依次置于100%二甲苯I和100%二甲苯II中各8min ；S2、復水:將組織切片按濃度為100%的二甲苯I 5min、濃度為100%二甲苯II5min、濃度為95 %的酒精5min、濃度為85 %的酒精5min、濃度為75 %的酒精5min的梯度進行復水，將復水后的切片置于自來水中流水沖洗5min ；S3、將步驟S2所得的組織切片置于0.2%蘇木素染液中染色12分鐘，流水沖洗組織切片至組織顏色透亮、切片干凈；S4、將步驟S3所得的組織切片置于I %鹽酸酒精中分化5s，快速拿起，放入燒杯中，流水水洗3min ；S5、將分化后的組織切片置于I %氨水中藍化5s，快速拿起，流水水洗3min ；S6、將藍化后的組織切片放入I %伊紅染液中染色3min后，放入盛有自來水的燒杯中，輕微震蕩，洗去切片上多余伊紅染液；S7、脫水:按濃度為75%的酒精1s濃度為85%的酒精30s、濃度為95%的酒精2min、濃度為100%的二甲苯I 5min、濃度為100%的二甲苯II 5min的梯度對組織切片進行脫水，脫水完后將切片放入烘箱5min，加速酒精揮發；S8、透明、封片:將烘干的切片依次置于100%二甲苯1、100%二甲苯II各8min，進行透明處理后，進行中性樹脂封片。其染色效果更穩定。以上所述僅是本專利技術的優選實施方式，應當指出，對于本
的普通技術人員來說，在不脫離本專利技術原理的前提下，還可以作出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應視為本專利技術的保護范圍。【主權項】1.，其特征在于，包括如下步驟: S1、脫蠟:將組織切片放入染色架依次置于100%二甲苯I和100% 二甲苯II中各.8min ； S2、復水:將組織切片按濃度為100%的二甲苯I5min、濃度為100%二甲苯II 5min、濃度為95%的酒精5min、濃度為85%的酒精5min、濃度為75%的酒精5min的梯度進行復水，將復水后的切片置于自來水中流水沖洗5min ； S3、將步驟S2所得的組織切片置于0.2%蘇木素染液中染色12分鐘，流水沖洗組織切片至組織顏色透亮、切片干凈； S4、將步驟S3所得的組織切片置于I%鹽酸酒精中分化5s，快速拿起，放入燒杯中，流水水洗3min ； S5、將分化后的組織切片置于I%氨水中藍化5s，快速拿起，流水水洗3min ； S6、將藍化后的組織切片放入1%伊紅染液中染色3min后，放入盛有自來水的燒杯中，輕微震蕩，洗去切片上多余伊紅染液； S7、脫水:按濃度為75%的酒精1s濃度為85%的酒精30s、濃度為95%的酒精2min、濃度為100%的二甲苯I 5min、濃度為100%的二甲苯II 5min的梯度對組織切片進行脫水，脫水完后將切片放入烘箱5min，加速酒精揮發； S8、透明、封片:將烘干的切片依次置于100%二甲苯1、100%二甲苯II各8min，進行透明處理后，進行中性樹脂封片。【專利摘要】本專利技術公開了，包括如下步驟：將組織切片放入染色架依次置于100％二甲苯I和100％二甲苯II中各8min；取出后按100％二甲苯I 5min、100％二甲苯II 5min、95％的酒精5min、85％的酒精5min、75％的酒精5min的梯度進行復水后，用自來水中流水沖洗，置于0.2％蘇木素染液中染色后，流水沖洗；置于1％鹽酸酒精中分化，快速拿起，放入燒杯中，流水水洗；將分化后的組織切片置于1％氨水中藍化，快速拿起，流水水洗；將藍化后的組織切片放入1％伊紅染液中染色后，放入盛有自來水的燒杯中，輕微震蕩，洗去切片上多余伊紅染液；脫水、透明處理后，進行中性樹脂封片。本專利技術染色效果好，染色所需的時間短，且穩定性高。【IPC分類】G01N1/30【公開號】CN104897453【申請號】CN201510296929【專利技術人】何敏, 梁曉霞, 劉寧 【申請人】四川農業大學【公開日】2015年9月9日【申請日】2015年5月27日本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種器官組織的快速染色方法，其特征在于，包括如下步驟：S1、脫蠟：將組織切片放入染色架依次置于100％二甲苯I和100％二甲苯II中各8min；S2、復水：將組織切片按濃度為100％的二甲苯I?5min、濃度為100％二甲苯II?5min、濃度為95％的酒精5min、濃度為85％的酒精5min、濃度為75％的酒精5min的梯度進行復水，將復水后的切片置于自來水中流水沖洗5min；S3、將步驟S2所得的組織切片置于0.2％蘇木素染液中染色12分鐘，流水沖洗組織切片至組織顏色透亮、切片干凈；S4、將步驟S3所得的組織切片置于1％鹽酸酒精中分化5s，快速拿起，放入燒杯中，流水水洗3min；S5、將分化后的組織切片置于1％氨水中藍化5s，快速拿起，流水水洗3min；S6、將藍化后的組織切片放入1％伊紅染液中染色3min后，放入盛有自來水的燒杯中，輕微震蕩，洗去切片上多余伊紅染液；S7、脫水：按濃度為75％的酒精10s濃度為85％的酒精30s、濃度為95％的酒精2min、濃度為100％的二甲苯I?5min、濃度為100％的二甲苯II?5min的梯度對組織切片進行脫水，脫水完后將切片放入烘箱5min，加速酒精揮發；S8、透明、封片：將烘干的切片依次置于100％二甲苯I、100％二甲苯II各8min，進行透明處理后，進行中性樹脂封片。...

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：何敏，梁曉霞，劉寧，
申請(專利權)人：四川農業大學，
類型：發明
國別省市：四川;51