本發(fā)明專利技術(shù)提供三價免疫原性組合物，其包含豬肺炎支原體(M.hyo)全細(xì)胞制備物的可溶性部分；豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)抗原；和豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)病毒抗原，其中M.hyo制備物的可溶性部分基本上不含(i)IgG和(ii)由抗原與免疫球蛋白結(jié)合形成的免疫復(fù)合物。
【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
【國外來華專利技術(shù)】PCV/豬肺炎支原體/PRRS組合疫苗專利
本專利技術(shù)涉及豬圓環(huán)病毒、豬肺炎支原體(Mycoplasmahyopneumoniae(M.hyopneumoniae或M.hyo))和豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)病毒。更具體地，本專利技術(shù)涉及三價免疫原性組合物，其包含M.hyo全細(xì)胞制備物的可溶性部分、PCV2抗原和PRRS病毒抗原，以及所述組合物在用于保護(hù)豬抵抗地方性動物病肺炎和斷奶后多系統(tǒng)衰竭綜合征(PMWS)的疫苗中的應(yīng)用。專利技術(shù)背景豬中的地方性動物病肺炎，也被稱為支原體肺炎，是由M.hyo引起的。該疾病是一種慢性的、非致命性的疾病，影響各種年齡的豬。受感染的豬僅僅表現(xiàn)出咳嗽和發(fā)燒的輕微癥狀，但是這種疾病對經(jīng)濟(jì)有重要的影響，因為飼料轉(zhuǎn)化效率降低并且體重增長減少。地方性動物病肺炎由受感染豬的肺排出的空氣傳播微生物通過鼻道在豬之間傳播。M.hyo的初次感染可能跟隨著其它支原體物種(豬鼻支原體(Mycoplasmahyorhinis)和絮狀支原體(Mycoplasmaflocculare))以及其它細(xì)菌病原體的繼發(fā)感染。M.hyo是小的原核微生物，能夠自由生活地存在，雖然它經(jīng)常被發(fā)現(xiàn)與真核細(xì)胞相聯(lián)系，因為它對外源甾醇和脂肪酸有絕對需求。這些需求通常需要在含血清的培養(yǎng)基中生長。M.hyo由細(xì)胞膜而不是細(xì)胞壁包被。支原體和宿主細(xì)胞表面的物理結(jié)合是地方性動物病肺炎發(fā)生和持續(xù)存在的基礎(chǔ)。M.hyo感染豬的呼吸道，在氣管、支氣管、細(xì)支氣管建群。支原體產(chǎn)生纖毛停滯因子，其導(dǎo)致呼吸道內(nèi)側(cè)的纖毛停止運動。最終纖毛退化，使豬易于受到次級病原體的感染。在感染動物中觀察到紫色到灰色的實變區(qū)域的典型病灶。對屠宰動物的調(diào)查揭示在30-80％的豬中存在病灶。來自13個州的37個畜群的結(jié)果表明99％的畜群有符合地方性動物病肺炎典型特征的肺炎病灶。因此，對有效預(yù)防和治療措施的需求很大。抗生素如硫姆林、甲氧芐氨嘧啶、四環(huán)素和林可霉素有一些益處，但是價格昂貴并且需要長期使用。此外，抗生素尚未被證明有效消除M.hyo的傳播或二次感染。通過維持無病原體畜群來預(yù)防有時是可行的，但是經(jīng)常發(fā)生M.hyo的再次引入。由于豬肺炎的嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)后果，已經(jīng)在尋找針對M.hyo的疫苗。含有在含血清培養(yǎng)基中生長的支原體生物體制備物的疫苗已進(jìn)入市場，但是引起了對于免疫物質(zhì)中存在的血清組分(例如免疫復(fù)合物或非免疫原性特異性蛋白)誘導(dǎo)的副反應(yīng)的關(guān)注。提供M.hyo疫苗的其它嘗試已有成功者，但是這種疾病仍然廣泛流行。M.hyo和豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)是豬產(chǎn)業(yè)中遇到的兩種最為普遍的病原體。被PCV2感染的豬表現(xiàn)出通常被稱為斷奶后多系統(tǒng)衰竭綜合征(PMWS)的綜合征。PMWS的臨床特征是衰弱、皮膚蒼白、瘦弱、呼吸窘迫、腹瀉、黃疸(icterus)和黃疸(jaundice)。除了PMWS之外，PCV2與幾種其它的感染包括假狂犬病、豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)、格雷舍氏病(Glasser’sdisease)、鏈球菌腦膜炎、沙門氏菌病、斷奶后大腸桿菌病、飲食肝病和化膿性支氣管肺炎相關(guān)。M.hyo與地方性動物病肺炎相關(guān)，而且已被顯示是豬圓環(huán)病毒相關(guān)疾病(PCVAD)的發(fā)生中的主要輔因子。豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)由動脈炎病毒引起，該病毒與巨噬細(xì)胞，特別是存在于肺中的巨噬細(xì)胞(肺泡巨噬細(xì)胞)有特別的親和力。這些巨噬細(xì)胞攝取并除去入侵的細(xì)菌和病毒，但在PRRS病毒(PRRSV)的情況中并非如此。在PRRS病毒的情況中，它在巨噬細(xì)胞內(nèi)部繁殖，產(chǎn)生更多的病毒并殺死巨噬細(xì)胞。一旦PRRSV進(jìn)入畜群，它便會無限期地存在并有活性。高達(dá)40％的巨噬細(xì)胞被破壞，這使得細(xì)菌和其它病毒增殖并進(jìn)行破壞。這種事件的一個常見的實例是在幼年/老年團(tuán)體(grower/finisherunits)中，當(dāng)它們受到PRRS病毒感染時，地方性動物病肺炎的嚴(yán)重程度顯著增加。超過一半的斷奶期PRRS病毒陰性的豬在進(jìn)入市場之前被感染。所需要的是針對豬中PCV2、支原體和PRRSV感染的PCV2/M.hyo/PRRS三價疫苗。提供單次劑量(singledose)的三價疫苗將會是合乎需要的。優(yōu)選地，疫苗的PCV2/M.hyo組分以即用型單瓶液體組合物的形式提供，其可以容易地與PRRSV組分組合以使得所有抗原被同時給藥給豬。專利技術(shù)簡述本專利技術(shù)提供三價免疫原性組合物，其包含豬肺炎支原體(M.hyo)全細(xì)胞制備物的可溶性部分；豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)抗原；和豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)病毒抗原，其中M.hyo制備物的可溶性部分基本上不含(i)IgG和(ii)由抗原與免疫球蛋白結(jié)合形成的免疫復(fù)合物。在一個方面，M.hyo全細(xì)胞制備物的可溶性部分在被加入到免疫原性組合物之前已用蛋白-A或蛋白-G進(jìn)行處理。在另一個方面，M.hyo制備物的可溶性部分和PCV2抗原是即用型液體組合物的形式。在一個實施方案中，PRRS病毒抗原是基因修飾的活病毒。在另一個實施方案中，基因修飾的活PRRS病毒是凍干組合物的形式。在一個實施方案中，M.hyo制備物的可溶性部分包含至少一種M.hyo蛋白抗原。在另一個實施方案中，M.hyo制備物的可溶性部分包含兩種或更多種M.hyo蛋白抗原。在一個實施方案中，PCV2抗原是嵌合1型-2型圓環(huán)病毒的形式，嵌合病毒包含滅活的表達(dá)豬圓環(huán)病毒2型ORF2蛋白的重組豬圓環(huán)病毒1型。在另一個實施方案中，PCV2抗原是重組ORF2蛋白的形式。在又一個實施方案中，重組ORF2蛋白從桿狀病毒載體表達(dá)。在一些實施方案中，本專利技術(shù)的三價組合物引發(fā)針對M.hyo、PCV2和PRRS病毒的保護(hù)性免疫反應(yīng)。在其它實施方案中，本專利技術(shù)的免疫原性組合物進(jìn)一步包含至少一種其它抗原。在一個實施方案中，至少一種其它抗原針對在豬中可能引起疾病的微生物提供保護(hù)。在一個實施方案中、微生物包括細(xì)菌、病毒或原生動物。在另一個實施方案中，微生物選自但不限于下列種類：豬細(xì)小病毒(PPV)、副豬嗜血桿菌(Haemophilusparasuis)、多殺巴斯德菌(Pasteurellamultocida)、豬鏈球菌(Streptococcumsuis)、豬葡萄球菌(Staphylococcushyicus)、胸膜肺炎放線桿菌(Actinobacillluspleuropneumoniae)、支氣管炎博德特菌(Bordetellabronchiseptica)、豬霍亂沙門氏菌(Salmonellacholeraesuis)、腸炎沙門氏菌(Salmonellaenteritidis)、豬紅斑丹毒絲菌(Erysipelothrixrhusiopathiae)、豬鼻支原體(Mycoplamahyorhinis)、豬滑液支原體(Mycoplasmahyosynoviae)、鉤端螺旋體細(xì)菌、胞內(nèi)勞森氏菌(Lawsoniaintracellularis)、豬流感病毒(SIV)、大腸桿菌抗原、豬痢疾短螺旋體(Brachyspirahyodysenteriae)、豬呼吸道冠狀病毒、豬流行性腹瀉(PED)病毒、輪狀病毒、細(xì)環(huán)病毒(TTV)、豬巨細(xì)胞病毒、豬腸病毒、腦心肌炎病毒、奧杰士基氏病、典型性豬瘟(CSF)的致病原和豬傳染性腸胃炎的致病原，或其組合。在一些實施方案中，本專利技術(shù)的組合物本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點】
一種三價免疫原性組合物，其包含豬肺炎支原體(M.hyo)全細(xì)胞制備物的可溶性部分；豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)抗原；和豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)病毒抗原，其中M.hyo制備物的可溶性部分基本上不含(i)IgG和(ii)由抗原與免疫球蛋白結(jié)合形成的免疫復(fù)合物。
【技術(shù)特征摘要】
【國外來華專利技術(shù)】2012.04.04 US 61/620,1891.一種三價免疫原性組合物，其包含：豬肺炎支原體(M.hyo)培養(yǎng)物的上清；豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)抗原；豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)病毒抗原；和SP-油佐劑，其中M.hyo培養(yǎng)物的上清包含M.hyo-特異的抗原，且已從不可溶細(xì)胞物質(zhì)分離，且不含IgG和抗原/免疫球蛋白免疫復(fù)合物，其中所述M.hyo培養(yǎng)物的上清在被加入到免疫原性組合物之前已用蛋白-A或蛋白-G進(jìn)行處理。2.權(quán)利要求1的組合物，其中所述M.hyo培養(yǎng)物的上清和所述PCV2抗原是即用型液體組合物的形式。3.權(quán)利要求1的組合物，其中所述PRRS病毒抗原是基因修飾的活病毒。4.權(quán)利要求3的組合物，其中所述基因修飾的活PRRS病毒是凍干組合物的形式。5.權(quán)利要求1的組合物，其中所述組合物在豬中引發(fā)針對M.hyo、PCV2和PRRS病毒的保護(hù)性免疫反應(yīng)。6.權(quán)利要求1的組合物，其中所述PCV2抗原是嵌合1型-2型圓環(huán)病毒的形式，所述嵌合病毒包含滅活的表達(dá)豬圓環(huán)病毒2型ORF2蛋白的重組豬圓環(huán)病毒1型。7.權(quán)利要求1的組合物，其中所述PCV2抗原是重組ORF2蛋白的形式。8.權(quán)利要求7的組合物，其中所述重組ORF2蛋白從桿狀病毒載體表達(dá)。9.權(quán)利要求1的組合物，其中所述組合物進(jìn)一步包含藥學(xué)可接受的載體。10.權(quán)利要求1至9之任一項的組合物，其中所述組合物當(dāng)以單次劑量給藥的形式進(jìn)行給藥時，引發(fā)針對M.hyo、PCV2和PRRS病毒的保護(hù)性免疫反應(yīng)。11.權(quán)利要求1的組合物在制備用于保護(hù)豬以抵抗豬肺炎支原體(M.hyo)、PCV2和PRRS病毒的藥物中的用途。12.權(quán)利要求11的用途，其中所述藥物被肌內(nèi)、皮內(nèi)、經(jīng)皮或皮下給藥。13.權(quán)利要求11的用途，其中所述藥物以單次劑量的形式給藥。14.權(quán)利要求11的用途，其中所述藥物被給藥給具有來自母體的針對M.hyo、PCV2和...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：G·P·尼采爾，J·E·高爾文，J·K·加勒特，J·R·II·庫拉維克，T·L·里克，M·M·斯馬茨爾，
申請(專利權(quán))人：碩騰有限責(zé)任公司，
類型：發(fā)明
國別省市：美國;US
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