免疫誘導劑制造技術

本發明專利技術公開了一種含有特定的多肽作為有效成分的免疫誘導劑。上述多肽，通過使用來自犬睪丸cDNA文庫以及罹癌犬血清的SEREX法，以與抗體相結合的多肽的形式被分離，所述抗體特異性地存在于來自罹癌犬的血清中。上述多肽能夠在生物體內誘導免疫，另外，能夠使罹癌生物體的腫瘤萎縮。因此，上述多肽作為癌癥的治療及/或預防劑特別有用。

【技術實現步驟摘要】
免疫誘導劑本申請是申請日為2008年10月23日、申請號為200880110949.X、專利技術名稱為“免疫誘導劑”的中國專利技術專利申請(PCT/JP2008/069267號PCT國際申請的中國國家階段申請)的分案申請。
本專利技術涉及作為癌的治療和/或預防劑等有用的新型免疫誘導劑。
技術介紹
癌癥是占據所有死亡原因第一位的疾病，目前進行的治療以手術療法為主，組合使用放射療法和化學療法。近年來，盡管開發了新手術方法并發現了新的抗癌劑，但現狀是除了部分癌癥以外，癌的治療效果仍未見提高。近年來，由于分子生物學與癌免疫學的進步，逐漸能夠鑒定出被作用于癌的細胞毒性T細胞所識別的癌抗原及編碼該癌抗原的基因，對抗原特異性免疫療法的期待日漸高漲(參照非專利文獻1)。在免疫療法中，為了減輕副作用，作為其抗原被識別的肽或者蛋白質必須在正常細胞中幾乎不存在，而特異性地存在于癌細胞中。1991年，比利時Ludwig研究所的Boon等人通過使用自身癌細胞株與癌反應性T細胞的cDNA表達克隆法，分離出CD8陽性T細胞識別的人黑色素瘤抗原MAGE1(參照非專利文獻2)。之后，報導了采用基因表達克隆的方法鑒別在癌癥患者體內與自身的癌反應產生的抗體所識別的腫瘤抗原，即SEREX法(serologicalidentificationsofantigensbyrecombinantexpressioncloning)(非專利文獻3；專利文獻1)，逐漸分離出各種癌抗原(參照非專利文獻4-9)。正在開始進行以其一部分作為靶的癌癥免疫療法臨床試驗。另一方面，已知犬與貓與人類相同，有乳腺腫瘤、鱗狀上皮癌等多種腫瘤，并在犬與貓的疾病統計中排名也較高。然而，目前針對犬與貓的癌腫尚無有效的治療藥物、預防藥物以及診斷藥物。大部分犬與貓的腫瘤，幾乎都是在該腫瘤進行性擴大后，方為飼主察覺，入院之后，即使經過外科手術切除并投以人類藥物(抗癌劑等)，多數情況下為時已晚，在處理之后不久即死亡。在上述現狀下，如有可能獲取對犬與貓癌癥有效的治療藥物、預防藥物及診斷藥物，則可以期望開拓其針對犬癌癥的用途。專利文獻1：美國專利第5698396號非專利文獻1：秋吉毅，“癌與化學療法”，1997年，第24卷，551～519頁非專利文獻2：BruggenP，etal.，Science，254：1643-1647(1991)非專利文獻3：Proc.Natl.Acad.Sci.USA，92：11810-11813(1995)非專利文獻4：Int.J.Cancer，72：965-971(1997)非專利文獻5：CancerRes.，58：1034-1041(1998)非專利文獻6：Int.J.Cancer，29：652-658(1998)非專利文獻7：Int.J.Oncol.，14：703-708(1999)非專利文獻8：CancerRes.，56：4766-4772(1996)非專利文獻9：Hum.Mol.Genet6：33-39，1997非專利文獻10：井上直和，山口亮，伊川正人蛋白質核酸酵素vol.50No.111405-1412非專利文獻11：JCellSce.115：1825-35非專利文獻12：Blood.95：1788-96非專利文獻13：MolEndocrinol.9：243-54(1995)非專利文獻14：JCellBiol.145：83-98(1999)
技術實現思路
本專利技術的目的在于提供作為癌的治療和/或預防劑等有用的新型免疫誘導劑。本專利技術的專利技術人經努力研究，結果發現：通過使用來自犬睪丸cDNA文庫以及罹癌犬血清的SEREX法，取得cDNA，所述cDNA編碼與來自罹癌生物體血清中存在的抗體相結合的蛋白質，并以此cDNA為基礎，制作具有序列號2所示氨基酸序列的多肽，具有序列號16所示氨基酸序列的犬鈣鎂蛋白(Calmeginprotein)，具有序列號26所示氨基酸序列的犬中心體蛋白質(centrosomalprotein，以下有時簡稱為CEP)，以及具有序列號39所示氨基酸序列的犬甲狀腺激素受體相互作用因子11(thyroidhormonereceptorinteractor11，以下有時簡稱為“TRIP11”)。另外，以與上述序列號26所示犬CEP具有高同源性的犬注冊基因為基礎，制作具有序列號28所示氨基酸序列的犬CEP。另外，以所得基因的人類同源性基因為基礎，制作具有序列號4所示氨基酸序列的多肽，具有序列號18所示氨基酸序列的人鈣鎂蛋白，具有序列號30所示氨基酸序列的人CEP，以及具有序列號41所示氨基酸序列的人TRIP11。然后，向生物體給與這些多肽，由此可以在生物體內誘導免疫細胞，并使已經生成的腫瘤萎縮，從而完成了本專利技術。即，本專利技術提供一種免疫誘導劑，所述免疫誘導劑含有多肽或重組載體作為有效成分，所述多肽為具有免疫誘導活性的下述(a)至(c)中的任一多肽，所述重組載體含有編碼該多肽的多核苷酸，能夠在生物體內表達該多肽：(a)由序列表中序列號2、4、16、18、26、28、30、39或41所示氨基酸序列中連續7個以上氨基酸組成的多肽，(b)與(a)多肽有80％以上的同源性、由7個以上的氨基酸組成的多肽，(c)包含(a)多肽或(b)多肽作為其部分序列的多肽。另外，本專利技術提供了一種免疫誘導方法，所述免疫誘導方法包括給與個體有效量的多肽或重組載體，所述多肽為具有免疫誘導活性的上述(a)至(c)中的任一多肽，所述重組載體含有編碼該多肽的多核苷酸且能夠在生物體內表達該多肽。進而，本專利技術提供了一種抗原呈遞細胞的處理方法，所述處理方法包括使多肽與抗原呈遞細胞接觸，所述多肽為具有免疫誘導活性的上述(a)至(c)中的任一多肽。進而，本專利技術還提供了多肽或重組載體在免疫誘導劑制備中的應用，所述多肽為具有免疫誘導活性的上述(a)至(c)中的任一多肽，所述重組載體含有編碼該多肽的多核苷酸且能夠在生物體內表達該多肽。通過本專利技術，提供了一種作為癌的治療和/或預防劑等有用的新型免疫誘導劑。如下述實施例中的具體說明所示，向罹癌犬給與本專利技術所用的多肽時，可以在該罹癌犬體內誘導免疫細胞，進而能夠使已經生成的癌縮小或萎縮。因此，該多肽對于癌的治療和預防有用。本專利技術提供下述項：1.一種免疫誘導劑，含有多肽或重組載體作為有效成分，所述多肽為具有免疫誘導活性的下述(a)至(c)中的任一多肽，所述重組載體含有編碼該多肽的多核苷酸且能夠在生物體內表達該多肽，(a)由序列表中序列號2、4、16、18、26、28、30、39或41所示氨基酸序列中連續7個以上氨基酸組成的多肽，(b)與(a)多肽有80％以上的同源性、由7個以上的氨基酸組成的多肽，(c)包含(a)多肽或(b)多肽作為其部分序列的多肽。2.如項1所述的免疫誘導劑，其中，所述(b)多肽為與所述(a)多肽具有95％以上同源性的多肽。3.如項1所述的免疫誘導劑，其中，所述具有免疫誘導活性的多肽為序列表中序列號2、4、16、18、26、28、30、39或41所示氨基酸序列中連續7個以上氨基酸組成的多肽，或包含該多肽作為其部分序列的多肽。4.如項3所述的免疫誘導劑，其中，所述具有免疫誘導活性的多肽為具有序列表中序列號2、4、16、18、26、28、30、39本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種免疫誘導劑，含有多肽或重組載體作為有效成分，所述多肽為具有免疫誘導活性的下述(a)至(c)中的任一多肽，所述重組載體含有編碼該多肽的多核苷酸且能夠在生物體內表達該多肽，(a)由序列表中序列號39或41所示氨基酸序列中連續7個以上氨基酸組成的多肽，(b)與(a)多肽有80％以上的同源性、由7個以上的氨基酸組成的多肽，(c)包含(a)多肽或(b)多肽作為其部分序列的多肽。

【技術特征摘要】
2007.10.25 JP 2007-277578;2007.10.25 JP 2007-277611.一種免疫誘導劑，含有多肽或重組載體作為有效成分，所述多肽為具有免疫誘導活性的下述(a)的多肽，所述重組載體含有編碼該多肽的多核苷酸且能夠在生物體內表達該多肽，(a)由序列表中序列號39或41所示氨基酸序列組成的多肽。2.如權利要求1所述的免疫誘導劑，所述免疫誘導劑含有多肽作為有效成分。3.如權利要求2所述的免疫誘導劑，所述免疫誘導劑是抗原呈遞細胞的處理劑。4.如權利要求1或2所述的免疫誘導劑，所述免疫誘導劑是癌癥的治療劑和/或預防劑。5.如權利要求4所述的免疫誘導劑，所述免疫誘導劑用于人、犬或貓。6.如權利要求4所述的免疫誘導劑，所述免疫誘導劑還含有免疫增強劑。7.如權利要求6所述的免疫誘導劑，其中，所述免疫增強劑為選自由弗氏不完全佐劑，Montanide，多聚IC及其衍生物、CpG寡核苷酸、白細胞介素12、白細胞介素18、干擾素α，干擾素β，干擾素ω，干擾素γ以及Flt3配體構成...

【專利技術屬性】
技術研發人員：石橋正樹，岡野文義，
申請(專利權)人：東麗株式會社，
類型：發明
國別省市：日本;JP