一種微生物快速檢測測試片的制作制造技術

本發明專利技術公開一種微生物快速檢測測試片的制作方法，涉及微生物快速檢測技術領域。本發明專利技術通過以下技術方案實現。菌落凝膠采用吸液量大和吸液量快、易形成網絡結構的混合冷水可溶性凝膠，吸液材料選用吸液和分散快的無紡布，有效解決吸液速度慢和容易測流的問題；混合凝膠比例為吸液量大凝膠/吸液量快且易形成網絡結構凝膠：1:2—1:10。采用預凝膠方式形成凝膠；2×—4×的培養基分點均勻滴加2—5mL，培養基區至少為7cm×7cm，保證了微生物生長所需營養，且培養基分布均勻，易于形成規則菌落，避免菌落拖尾；標簽采用可寫字的防水彩色膠帶，用于區別不同檢測片，操作者可在彩色膠帶上寫實驗記錄(樣品號、檢測時間和編號等)，易于操作(產品結構見附圖)。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及一種微生物快速檢測試紙片的制作，所屬
是微生物學檢測。背景目前，我國微生物的檢驗采用傳統檢測技術，即平板法、MPN法和生化鑒定法。操作步驟有配置培養基、清洗培養器皿、滅菌、增菌、生化鑒定等，對實驗室環境、設備要求高，所需空間大。傳統檢測技術難以滿足現場即時檢測鑒定微生物的需求，難以實現對微生物的實時監控，延后了污染品的處理時間，污染暴露人群難以得到有效控制，所以微生物快速檢測試紙片正是市場亟需的技術產品。目前，此類微生物檢測的產品涉及的專利有美國3M公司的“ USRFACE COLONYCOUNTING DEVICE AND METHOD OF USE (US005681712A) ”、廣東省微生物研宄所的“一種快速檢測微生物的測試片及其制備方法和應用(ZL200910009717.3) ”和“冷水可凝的培養基固定劑及其制備方法(ZL200910039835.7) ”、盧新的“食品中病原微生物的測試片(ZL200520120355.0) ”、廣州綠洲生化科技有限公司的“利用商品培養基干粉直接制作微生物測試片的方法(ZL200710028489.3) ”和廣州天河綠洲生物化學研宄中心的“霉菌和酵母菌的快速檢驗紙片(ZL03274715.2) ”。美國3M公司的Petrif i Im微生物試紙片系列產品吸液速率低，容易造成樣品的側流，國內此類產品有廣州綠洲生化科技有限公司的微生物快速檢測試紙片系列產品，該系列產品一致性差，容易產生假陰性結果，準確度低。此專利技術技術產品克服了以上產品缺點。
技術實現思路
本專利技術提供了一種易于操作、檢測效果優、準確率高的微生物快速檢測測試片，解決了目前市場上已有微生物快速檢測技術產品所存在的問題。本專利技術提供的微生物快速檢測測試片可檢測菌落總數、大腸菌群、大腸桿菌、沙門氏菌、阪崎腸桿菌、金黃色葡萄球菌、李斯特氏菌、霉菌和酵母菌等微生物。本專利技術還提供了上述所述微生物快速檢測測試片的技術方案，具體如下:本專利技術采用吸液量大的冷水可溶性凝膠(如甲基纖維素鈉、乙基纖維素鈉和聚丙烯酸鈉、)和吸液量快且容易形成凝膠網絡結構的冷水可溶性凝膠(如刺槐豆膠、黃原膠和瓜爾膠等)的混合物作為形成菌落所需的凝膠支撐，選用吸液和分散快的無紡布作為吸液材料，這樣有效解決了吸液速度慢和容易測流的問題。微生物生長形成肉眼可見的菌落所需條件為凝膠結構良好、營養充分、培養環境合適等，本專利技術采用的冷水可凝凝膠為吸液量大的冷水可溶性凝膠和吸液量快且容易形成網絡結構的冷水可溶性凝膠的比例為1:2—I: 10的混合物，且采用預形成凝膠的方式，即液體培養基滴加于冷水可溶性凝膠形成凝膠，再晾干的方式，此種方式形成的凝膠結構好，液體培養基為2X — 4X的培養基分點均勻的滴加2 — 5mL，培養基區至少為7cmX7cm。此專利技術保證了微生物生長所需營養，且培養基分布均勻，易于形成規則菌落，避免菌落拖尾。本專利技術的標簽采用可寫字的防水彩色膠帶，此專利技術易于區別不同的微生物試紙片，操作者可在彩色膠帶上方做實驗記錄，如樣品號、檢測時間、檢測編號等數據，此專利技術易于實驗者操作。本專利技術還提供上述所述微生物快速檢測測試片的使用方法，具體如下:(I)將試紙片平放于超凈工作臺的臺面上，用滅菌移液器吸取樣品原液或稀釋液ImL，揭起蓋膜，滴加于無紡布上，緩慢蓋上蓋膜。(2)將不多于12片試紙片裝于一自封袋，平放于合適溫度的培養箱。(3)培養規定時間后，根據菌落顏色判定菌落數。本專利技術的微生物快速檢測測試片，可替代傳統檢測技術，大大提高了微生物檢測效率。本專利技術的微生物快速檢測測試片隨用隨取，所需空間少，節省了實驗人員配置培養基、清洗玻璃器皿、廢液處理等操作，加大標簽的可書寫面積，更便于實驗人員操作。本專利技術的微生物快速檢測測試片采用的凝膠、培養基、標簽制備方法使微生物快速檢測更準確、操作更簡單、檢測效果更優，產品一致性更好。【附圖說明】圖1 一種微生物快速檢測測試片的產品圖。圖2微生物快速檢測測試片的雙面印刷的底板圖。圖3微生物快速檢測測試片的培養基區立體圖。圖4微生物快速檢測測試片的透明薄膜印刷圖。【具體實施方式】下面結合實施例對本專利技術作進一步的描述。實施例1:菌落總數快速測試片的制作方法稱取甲基纖維素鈉2g，黃原膠10g，混合均勻，均勻黏于雙面膠的一面，上面覆蓋一層無紡布，切割成7cmX7cm的方塊，貼于已印好公司標和方形的底片(9cmX9cm)正中間。配4X菌落總數培養基分數點均勻滴加與無紡布上方，平方晾干。用可寫字的防水彩色膠帶(1.5cm寬)將菲林片(9cmX9cm)固定于底板的一邊，菲林片固定邊的對邊多出底板邊的0.5cm。將做好的快速測試片裝于自封袋中，先不封口，采用50°C氣體滅菌5h。封好口后置于冰箱保存。實施例2:菌落總數快速測試片的測試取幾種菌株稀釋液接種到菌落總數快速測試片上，接種量為lmL，37°C培養15h，所有菌株都呈現紅色菌落。實施例3:大腸桿菌快速測試片的制作方法稱取乙基纖維素鈉2g，瓜爾膠5g，黃原膠5g，刺槐豆膠5g，混合均勻，均勻黏于雙面膠的一面，上面覆蓋一層無紡布，切割成ScmXScm的方塊，貼于已印好公司標和方形的底片(1cmXlOcm)正中間。配2X大腸桿菌培養基分數點均勻滴加與無紡布上方，平方晾干。用可寫字的防水彩色膠帶(1.5cm寬)將菲林片(1cmXlOcm)固定于底板的一邊，菲林片固定邊的對邊多出底板邊的0.5cm。將做好的快速測試片裝于自封袋中，先不封口，采用50°C氣體滅菌5h。封好口后置于冰箱保存。實施例4:大腸桿菌快速測試片的測試取幾種菌株稀釋液接種到菌落總數快速測試片上，接種量為lmL，37°C培養15h，大腸桿菌都呈現藍至紫色菌落，其他菌落為無色或粉紅色。【主權項】1.一種微生物快速檢測測試片的制作，包括以下步驟: (1)微生物快速檢測測試片的制作所需材料:底板、雙面膠、無紡布、透明薄膜、標簽、冷水可溶性凝膠、培養基； (2)冷水可溶性凝膠均勻黏于雙面膠的一面； (3)在黏有冷水可溶性凝膠的另一面覆蓋一層無紡布； (4)將黏有冷水可溶性凝膠的雙面膠貼于檢測底片的正中央； (5)在無紡布上方滴加培養基，晾干； (6)上面覆蓋一層透明薄膜，一邊用標簽固定于底片上； (7)包裝，滅菌。2.根據權利要求1所述的一種微生物快速檢測測試片的制作，其特征在于:底板材料為銅版紙或合成材料，大小不小于9cmX9cm，一面印有公司標，另一面的正中間印有不小于7cm X 7cm大小的方格。3.根據權利要求1所述的一種微生物快速檢測試紙片的制作，其特征在于:培養基區域的大小不小于7cmX7cm.。4.根據權利要求1所述的一種微生物快速檢測測試片的制作，其特征在于:透明薄膜的材料為菲林片，上方印有IcmXlcm的方格線。5.根據權利要求1所述的一種微生物快速檢測測試片的制作，其特征在于:標簽的顏色為單色，不同的顏色代表不同的微生物試紙片。6.根據權利要求1所述的一種微生物快速檢測測試片的制作，其特征在于:冷水可溶性凝膠的組成為吸液量大的冷水可溶性凝膠和吸液量快且易形成凝膠網絡結構的冷水可溶性凝膠。7.根據權利要求1所述的一種微生物快速檢測測試片的制作，其特征在于:冷水可本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種微生物快速檢測測試片的制作，包括以下步驟：(1)微生物快速檢測測試片的制作所需材料：底板、雙面膠、無紡布、透明薄膜、標簽、冷水可溶性凝膠、培養基；(2)冷水可溶性凝膠均勻黏于雙面膠的一面；(3)在黏有冷水可溶性凝膠的另一面覆蓋一層無紡布；(4)將黏有冷水可溶性凝膠的雙面膠貼于檢測底片的正中央；(5)在無紡布上方滴加培養基，晾干；(6)上面覆蓋一層透明薄膜，一邊用標簽固定于底片上；(7)包裝，滅菌。

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：許文濤，黃昆侖，何景，翟百強，徐瑗聰，董凱，
申請(專利權)人：北京福德安科技有限公司，中國農業大學，
類型：發明
國別省市：北京;11