石膽酸作為活性成分在制備治療細(xì)粒棘球蚴病藥物中的應(yīng)用制造技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)公開(kāi)了石膽酸作為活性成分在制備治療細(xì)粒棘球蚴病藥物中的應(yīng)用，以石膽酸殺滅細(xì)粒棘球蚴病的病原-細(xì)粒棘球蚴絳蟲(chóng)，具有顯著的抑制和殺滅效果，可用于細(xì)粒棘球蚴病的治療。

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)涉及石膽酸的藥學(xué)應(yīng)用，屬于藥物化學(xué)領(lǐng)域。
技術(shù)介紹
細(xì)粒棘球蝴病(echinococcosis)又稱囊性包蟲(chóng)病(cysticechinococcosis,CE)，是由細(xì)粒棘球蝴絳蟲(chóng)(Echinococcus granulosus，Eg)的中絳期幼蟲(chóng)所致的一種嚴(yán)重危害人民健康和畜牧業(yè)發(fā)展的人獸共患寄生蟲(chóng)病。該病呈全球性分布，在我國(guó)主要流行于新疆、青海、內(nèi)蒙古、西藏等畜牧業(yè)發(fā)達(dá)的省區(qū)。囊性包蟲(chóng)病主要影響肝臟，也可以在肺中發(fā)展。目前，針對(duì)于該病的治療主要是外科手術(shù)的方法，即肝包蟲(chóng)外膜內(nèi)外囊完整切除術(shù)。近年來(lái)所采用的肝包蟲(chóng)外膜內(nèi)外囊完整摘除術(shù)盡管能大大降低包蟲(chóng)病的復(fù)發(fā)率，最大程度地減少手術(shù)對(duì)肝實(shí)質(zhì)的損傷，但當(dāng)包蟲(chóng)囊腫體積較大或貼近重要臟器或管道(肝門(mén)或膽管)時(shí)，則需要選擇開(kāi)放式外膜內(nèi)外囊完整摘除術(shù)。此種術(shù)式可能會(huì)有頭節(jié)的外漏和殘留，術(shù)中和術(shù)后需要藥物輔助治療預(yù)防包蟲(chóng)復(fù)發(fā)。因此總體來(lái)看，術(shù)中頭節(jié)外溢及頭節(jié)的處理不當(dāng)是手術(shù)治療囊性包蟲(chóng)病存在的難以克服的缺陷。針對(duì)上述問(wèn)題，本領(lǐng)域嘗試在體外采用高濃度酸性(HCl)和堿性溶液(KOH)，臨床常用的局部化療藥物有20%高滲鹽水，但對(duì)周?chē)８谓M織有一定的破壞作用；本領(lǐng)域也曾有研究發(fā)現(xiàn)膽汁可以抑制包蟲(chóng)囊腫的發(fā)育，但是膽汁成分復(fù)雜，作用目標(biāo)多，藥學(xué)效果多變，例如膽汁、膽汁酸在肝臟和血液中滯留會(huì)產(chǎn)生多種毒性作用，包括細(xì)胞毒作用及急、慢性毒性作用，造成肝損傷及全身多系統(tǒng)、多器官損害，最終導(dǎo)致肝硬化、肝功能衰竭和死亡；也曾有研究發(fā)現(xiàn)膽汁酸對(duì)胰腺腺泡細(xì)胞形成損傷等。因此，獲得一種作用確切、療效明確、能有效防治細(xì)粒棘球蝴病的藥物依舊是本領(lǐng)域亟待解決的課題。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
申請(qǐng)人在長(zhǎng)期研究過(guò)程中發(fā)現(xiàn)石膽酸(LCA)可以有效抑制和殺滅原頭節(jié)的生長(zhǎng)，從而可用于細(xì)粒棘球蝴病的臨床治療。在本專利技術(shù)中，石膽酸(LCA)，其化學(xué)名稱為3a_羥基-5 β -膽烷酸，是由鵝脫氧膽酸在腸內(nèi)通過(guò)細(xì)菌代謝產(chǎn)生的物質(zhì)。首先，本專利技術(shù)公開(kāi)了石膽酸作為活性成分在制備治療細(xì)粒棘球蝴病藥物中的應(yīng)用。上述的藥物，既可以是單純的活性成分原料，還可以是將石膽酸作為活性成分與其他輔料做成的各種制劑，例如常見(jiàn)的片劑、膠囊、滴丸、輸液、凍干粉針等，對(duì)于藥物劑型及其相應(yīng)輔料的選擇，本領(lǐng)域技術(shù)人員可根據(jù)需要進(jìn)行調(diào)整。上述的細(xì)粒棘球蝴病，既可以是動(dòng)物體上的，也可以是人體上的，根據(jù)該癥的臨床發(fā)病部位，通常指的是囊性肝包蟲(chóng)病。因此，本專利技術(shù)還公開(kāi)了石膽酸作為活性成分在制備治療囊性肝包蟲(chóng)病藥物中的應(yīng)用。根據(jù)需要，可使用不同濃度的石膽酸，一般來(lái)說(shuō)，為了有效的殺滅病原，石膽酸的濃度不低于500 μ mol/L。針對(duì)常見(jiàn)的原頭節(jié)生長(zhǎng)密度，優(yōu)選的，石膽酸的濃度為2000-3000 μ mol/L。優(yōu)選的，連續(xù)用藥時(shí)間不低于2天。在上述濃度下，對(duì)細(xì)粒棘球蝴原頭節(jié)具有比較理想的抑制和殺滅效果。在此基礎(chǔ)上，本專利技術(shù)還公開(kāi)了石膽酸作為細(xì)粒棘球蝴原頭節(jié)抑制劑的應(yīng)用。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解，在多種實(shí)驗(yàn)環(huán)境下，尤其是動(dòng)物離體實(shí)驗(yàn)情況下，為了防止由于動(dòng)物體內(nèi)的細(xì)粒棘球蝴原頭節(jié)在體外的生長(zhǎng)和頭節(jié)外溢，需要加入必要的抑制劑，例如20%高滲鹽水等。與上述類似，石膽酸的濃度不低于500 ymol/L，優(yōu)選的，石膽酸的濃度為2000-3000 μmol/L。【附圖說(shuō)明】圖1石膽酸對(duì)細(xì)粒棘球蝴原頭節(jié)形態(tài)的影響，其中，A:對(duì)照組原頭節(jié)；B:500 μ mol/L LCA 作用 3d 的原頭節(jié)；C:1000 μ mol/L LCA 作用 3d 的原頭節(jié);D:2000 μ mol/LLCA作用3d的原頭節(jié)；E:3000 μ mol/L LCA作用3d的原頭節(jié)。圖2為不同濃度的石膽酸對(duì)細(xì)粒棘球蝴原頭節(jié)活力的影響。圖3為石膽酸對(duì)細(xì)粒棘球蝴原頭節(jié)表面超微結(jié)構(gòu)的影響，其中，A:對(duì)照組原頭節(jié)；B、C:2000 μ mol/L石膽酸作用Id原頭節(jié)。 圖4為石膽酸對(duì)細(xì)粒棘球蝴原頭節(jié)內(nèi)部超微結(jié)構(gòu)的影響，其中，A:對(duì)照組原頭節(jié)；B、C:2000 μ mol/L石膽酸作用Id原頭節(jié)。【具體實(shí)施方式】為了說(shuō)明石膽酸(LCA)的應(yīng)用效果，申請(qǐng)人進(jìn)行了體外實(shí)驗(yàn)說(shuō)明石膽酸對(duì)細(xì)粒棘球蝴原頭節(jié)的殺滅效果。實(shí)驗(yàn)1:LCA體外作用于細(xì)粒棘球蝴原頭節(jié)的效果取新鮮的自然感染細(xì)粒棘球蝴的綿羊肝臟，清潔羊肝表面，用75%酒精消毒表面，無(wú)菌條件下抽取含原頭節(jié)的囊液，移入無(wú)菌瓶中。用PBS (PH = 7.2)清洗原頭節(jié)3次至澄清，用0.1%伊紅染液做染色排斥實(shí)驗(yàn)，98%以上拒染。肉眼觀察原頭節(jié)呈細(xì)白沙樣均勻顆粒，活性好的原頭節(jié)沉降速率快，活性不好的或者死亡的原頭節(jié)沉降速率相對(duì)比較慢。倒置顯微鏡下觀察原頭節(jié)蟲(chóng)體呈內(nèi)陷型，散在密布，蟲(chóng)體結(jié)構(gòu)飽滿，呈橢圓形，結(jié)構(gòu)清晰完整，鈣顆粒清亮而明顯。然后將原頭節(jié)分裝至含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中(青霉素100U/mL，鏈霉素100U/mL)，置37°C、5% C02培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)分組:DMS0對(duì)照組、500 μ mol/L LCA 組、1000 ymol/L LCA 組、2000 ymol/LLCA組、3000 μ mol/L LCA。取六孔板，每孔設(shè)5mL體系，按以上分組，配好相應(yīng)的培養(yǎng)液。將在體外培養(yǎng)5天后的細(xì)粒棘球蝴原頭節(jié)用PBS (pH = 7.2)清洗3遍，每組培養(yǎng)液中加入約2000個(gè)原頭節(jié)，置37°C，5% C0J?育箱內(nèi)培養(yǎng)，在倒置顯微鏡下觀察LCA對(duì)細(xì)粒棘球蝴原頭節(jié)形態(tài)和活力的影響當(dāng)前第1頁(yè)1 2 本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
石膽酸作為活性成分在制備治療細(xì)粒棘球蚴病藥物中的應(yīng)用。

【技術(shù)特征摘要】

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：李思源，姜玉峰，呂海龍，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：李思源，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：新疆;65