三氧化二砷在制備治療細粒棘球蚴病藥物中的應用制造技術

本發(fā)明專利技術公開了三氧化二砷在制備治療細粒棘球蚴病藥物中的應用，以三氧化二砷殺滅細粒棘球蚴病的病原-細粒棘球蚴絳蟲，具有顯著的抑制和殺滅效果，可用于對細粒棘球蚴病的治療。

【技術實現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術涉及三氧化二砷的藥學應用，屬于藥物化學領域。
技術介紹
細粒棘球蝴病(echinococcosisof the liver)，亦稱囊性包蟲病(cysticechinococcosis，CE)，是由細粒棘球蝴絳蟲(echinococcosis granulosus,Eg)的中絳期幼蟲所致的一種人畜共患寄生蟲病。全身各個臟器均可發(fā)病，其目前臨床上最常見的發(fā)病部位以肝臟為主，其次肺包蟲病。在我國以新疆、青海、甘肅、寧夏、西藏、內蒙、陜西和四川西部多見，隨著人口流動性增加，其余各省均有散發(fā)病例。針對上述疾病，目前尚無特效治療藥物，手術仍為唯一有效的治療方法，主要表現(xiàn)為彭心宇等提出的肝包蟲外膜內外囊完整摘除術，該術式沿外膜及外囊間隙進行分離，術中無需阻斷血流，也不會發(fā)生大出血。可將外囊完整摘除，不僅能降低了包蟲病的復發(fā)率，并能最大程度地保護正常的肝組織，術后無殘腔感染等并發(fā)癥。但當包蟲囊腫位于肝臟重要管道周圍或體積較大時，無法使用上述手術方案，需要選擇其他術式，容易造成囊液外溢，原頭節(jié)殘留，導致疾病復發(fā)，甚至導致腹膜內包蟲病的二次感染。針對上述問題，需要在術中局部使用化療藥物殺死殘留頭節(jié)，目前常用的輔助化學藥物有20 %的食鹽水，10 %過氧化氫，1.5 %西曲溴銨，0.15 %氯己定，95 %乙醇，10 %聚乙烯吡咯烷酮-碘(聚維酮碘)及阿苯達唑等，這些藥物對殺死原頭節(jié)具有一定的效果，但是大量研究顯示此類藥物存在著很多缺點，主要表現(xiàn)在生效時間太長，穩(wěn)定性較差。
技術實現(xiàn)思路
申請人在長期研究過程中驚喜地發(fā)現(xiàn)將三氧化二砷As2O3用作治療細粒棘球蝴病藥物可以有效抑制和殺滅原頭節(jié)的生長，從而可用于細粒棘球蝴病的臨床治療。首先，本專利技術公開了三氧化二砷在制備治療細粒棘球蝴病藥物中的應用。細粒棘球蝴病，既可以是動物體上的，也可以是人體上的，根據該癥的臨床發(fā)病部位，通常指的是囊性肝包蟲病。因此相應的，本專利技術還公開了三氧化二砷在制備治療囊性肝包蟲病藥物中的應用。上述的藥物，既可以是單純的活性成分原料，還可以是將三氧化二砷作為活性成分與其他輔料做成的各種制劑，例如常見的片劑、膠囊、注射液等，對于藥物劑型及其相應輔料的選擇，本領域技術人員可根據需要進行調整。根據需要，在安全劑量范圍內(折合As 0.llmg/m3)，可使用不同濃度的三氧化二砷，一般來說，為了有效的殺滅病原，三氧化二砷的濃度不低于2 μπιοΙ/L;優(yōu)選的，三氧化二砷的濃度為6-8 μ mol/Lo優(yōu)選的，連續(xù)用藥時間不低于5天。在上述濃度下，對細粒棘球蝴原頭節(jié)具有比較理想的抑制和殺滅效果。在此基礎上，本專利技術還公開了三氧化二砷細粒棘球蝴原頭節(jié)抑制劑的應用。本領域技術人員可以理解，在多種實驗環(huán)境下，尤其是動物離體實驗情況下，為了防止由于動物體內的細粒棘球蝴原頭節(jié)在體外的生長和頭節(jié)外溢，需要加入必要的抑制劑，例如20%高滲鹽水等。與上述類似，三氧化二砷的濃度不低于2 ymol/L，優(yōu)選的，三氧化二砷的濃度為6-8 μmol/L0【附圖說明】圖1為三氧化二砷對細粒棘球蝴原頭節(jié)形態(tài)的影響，其中，A:對照組原頭節(jié)；B:2 ymol/L三氧化二砷作用5d的原頭節(jié)；C:4 ymol/L三氧化二砷作用3d的原頭節(jié)；D:4 ymol/L三氧化二砷作用5d的原頭節(jié)；E:6 ymol/L三氧化二砷作用3d的原頭節(jié)；F:6 ymol/L三氧化二砷作用5d的原頭節(jié)；G:8 ymol/L三氧化二砷作用3d的原頭節(jié)；H:8 μ mol/L三氧化二砷作用5d的原頭節(jié)。圖2為不同濃度的三氧化二砷對細粒棘球蝴原頭節(jié)活力的影響。圖3為三氧化二砷對細粒棘球蝴原頭節(jié)表面超微結構的影響，其中，A:對照組原頭節(jié)；Β:2 μ mol/L三氧化二砷作用5d的原頭節(jié)；C:4 ymol/L三氧化二砷作用3d的原頭節(jié)；D:4 μ mol/L三氧化二砷作用5d的原頭節(jié)；Ε:6 μ mol/L三氧化二砷作用3d的原頭節(jié)；F:6 μ mol/L三氧化二砷作用5d的原頭節(jié)；G:8 μ mol/L三氧化二砷作用3d的原頭節(jié)；H:8 μ mol/L三氧化二砷作用5d的原頭節(jié)。圖4為三氧化二砷對細粒棘球蝴原頭節(jié)內部超微結構的影響，其中，A:對照組原頭節(jié)；Β:2 μ mol/L三氧化二砷作用5d的原頭節(jié)；C:4 ymol/L三氧化二砷作用3d的原頭節(jié)；D:4 μ mol/L三氧化二砷作用5d的原頭節(jié)；Ε:6 μ mol/L三氧化二砷作用3d的原頭節(jié)；F:6 μ mol/L三氧化二砷作用5d的原頭節(jié)；G:8 μ mol/L三氧化二砷作用3d的原頭節(jié)；H:8 μ mol/L三氧化二砷作用5d的原頭節(jié)。【具體實施方式】為了說明三氧化二砷的應用效果，申請人進行了體外實驗說明三氧化二砷對細粒棘球蝴原頭節(jié)的殺滅效果，申請人進行了下述實驗。實驗1:三氧化二砷體外作用于細粒棘球蝴原頭節(jié)的效果取新鮮的自然感染細粒棘球蝴的綿羊肝臟，清潔羊肝表面，用75%酒精消毒表面，無菌條件下抽取含原頭節(jié)的囊液，移入無菌瓶中。用PBS (PH = 7.2)清洗原頭節(jié)3次至澄清，用0.1%伊紅染液做染色排斥實驗，98%以上拒染。肉眼觀察原頭節(jié)呈細白沙樣均勻顆粒，活性好的原頭節(jié)沉降速率快，活性不好的或者死亡的原頭節(jié)沉降速率相對比較慢。倒置顯微鏡下觀察原頭節(jié)，蟲體呈內陷型，蟲體結構飽滿，呈橢圓形，結構清晰完整，鈣顆粒清亮而明顯。然后將原頭節(jié)分裝至含10%小牛血清的RPMI 1640培養(yǎng)基中(青霉素100U/mL，鏈霉素100U/mL)，置37°C、5% C02培養(yǎng)箱內培養(yǎng)。實驗分組:RMP1-1640培養(yǎng)基空白對照組、2 μ mol/L三氧化二砷組、4 μ mol/L三氧化二砷組、6 μ mol/L三氧化二砷組、8 μ mol/L三氧化二砷組。取六孔板，每孔設5mL體系，按以上分組，配好相應的培養(yǎng)液。將在體外培養(yǎng)5天后的細粒棘球蝴原頭節(jié)用PBS (pH = 7.2)清洗3遍，每組培養(yǎng)液中加入約2000個原頭節(jié)，置37°C，5% CO2孵育箱內培養(yǎng)，在倒置顯微鏡下觀察三氧化二砷對細粒棘球蝴原頭節(jié)形態(tài)和活力的影響。數據統(tǒng)計方法:加藥后24h開始，每組每天均勻抽取200 μ L培養(yǎng)液(平均含原頭節(jié)約90-120個)，用0.1 %伊紅染色15min，倒置顯微鏡下觀察原頭節(jié)的活力。活頭節(jié)拒染、不著色，且有活動性；死亡或活力減弱的原頭節(jié)紅染著色，伴有結構破壞。計算每組每天平均死亡率。每隔4d換液當前第1頁1 2 本文檔來自技高網...

【技術保護點】
三氧化二砷在制備治療細粒棘球蚴病藥物中的應用。

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發(fā)人員：姜玉峰，呂海龍，賀艷，
申請(專利權)人：姜玉峰，
類型：發(fā)明
國別省市：新疆;65