提供了用于生產重配甲型流感病毒的新的流感供體毒株。
【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】【專利說明】流感病毒重配本申請部分是在生物醫(yī)學高級研究和開發(fā)機構(BARDA)授予的基金號HHS01002010006IC的政府支持下完成。政府對本專利技術享有某些權利。
本專利技術屬于甲型流感病毒重配領域。此外，其涉及制造用于保護抵御甲型流感病毒的疫苗。
技術介紹
針對流感感染的最有效保護是抗流行株的疫苗接種，且盡快生成用于疫苗生產的流感病毒是重要的。野生型流感病毒通常在雞蛋和細胞培養(yǎng)物內生長達到低效價。為了獲得生長更好的毒株用于疫苗生產，目前常見的做法是用快速生長的高產供體毒株重配流行疫苗株。這可以通過以下方法完成:用所述流行流感毒株(所述疫苗毒株)和所述高產供體毒株共同感染培養(yǎng)宿主，并選擇含有來自所述疫苗毒株的血凝素(HA)和神經氨酸酶(NA)區(qū)段和來自所述供體毒株的其它病毒區(qū)段(即，編碼PBU PB2、PA、NP、M1' M2、NS1^P NS 2的那些)的重配病毒。另一個方法是通過反向遺傳重配流感病毒(參見，例如參考文獻I和2)。參考文獻3報道，含有來自A/Texas/1/77的PBl基因區(qū)段、來自A/NewCaledonia/20/99的HA和NA區(qū)段、源自A/Puerto Rico/8/34的經修飾PA區(qū)段和來自A/Puerto Rico/8/34的其余病毒區(qū)段的重配流感病毒顯示增加的細胞中生長。目前，就重配流感病毒而言僅有有限數量的供體毒株用于疫苗生產，而最常用的毒株是A/Puerto Rico/8/34 (A/PR/8/34)毒株。然而，包含A/PR/8/34主鏈區(qū)段的重配流感病毒常常不能充分良好生長以確保有效疫苗生產。因此，本領域需要提供進一步和改善的供體毒株用于流感病毒重配。【具體實施方式】專利技術人目前驚奇地發(fā)現，與包含來自相同供體毒株的全部主鏈區(qū)段的重配甲型流感病毒相比，包含來自兩種或多種流感供體毒株的主鏈區(qū)段的流感病毒能在培養(yǎng)宿主(特別是細胞培養(yǎng)物)內更快生長。具體而言，專利技術人已發(fā)現，包含源自兩種不同高產供體毒株的主鏈區(qū)段的流感病毒能用靶標疫苗相關HA/NA基因產出重配株的得率高于單獨使用兩種原始供體毒株中任一種所得重配株。具有來自兩種或多種流感供體毒株的主鏈區(qū)段的重配甲型流感病毒可包含來自不同甲型流感病毒的HA區(qū)段和PBl區(qū)段。在這些重配流感病毒中，PBl區(qū)段優(yōu)選來自與疫苗毒株具有相同流感病毒HA亞型的供體病毒。例如，PBl區(qū)段和HA區(qū)段可以都來自具有Hl亞型的流感病毒。重配甲型流感病毒還可包含來自具有不同流感病毒HA亞型的不同甲型流感病毒株的HA區(qū)段和PBl區(qū)段，其中PBl區(qū)段不是來自具有H3HA亞型的流感病毒和/或HA區(qū)段不是來自具有Hl或H5HA亞型的流感病毒。例如，PBl區(qū)段可來自Hl病毒和/或HA區(qū)段可來自H3流感病毒。本專利技術還提供了主鏈片段來自兩種或多種流感供體毒株的重配甲型流感病毒，其中PBl區(qū)段來自A/California/07/09流感毒株。該區(qū)段可與SEQ ID N0:22的序列具有至少95%相同性或100%相同性。重配甲型流感病毒可具有HlHA亞型。應理解，本專利技術該方面所述的重配流感病毒將不包含來自A/California/07/09的HA和/或NA區(qū)段。當所述重配甲型流感病毒包含來自兩種或三種供體毒株的主鏈區(qū)段時，各供體毒株可提供多于一種的所述重配甲型流感病毒主鏈區(qū)段，但所述供體毒株中的一或兩種也可僅提供單一主鏈區(qū)段。當所述重配甲型流感病毒包含來自二、三、四或五種供體毒株的主鏈區(qū)段時，這些供體毒株中的一種或兩種可提供多于一種的所述重配甲型流感病毒主鏈區(qū)段。通常，重配甲型流感病毒不可包含超過六種主鏈區(qū)段。因此，例如，若這些供體毒株之一提供五種病毒區(qū)段，則該重配甲型流感病毒僅能包含來自總共兩種不同供體毒株的主鏈區(qū)段。當重配甲型流感病毒包含來自A/Texas/1/77的PBl區(qū)段時，其優(yōu)選不包含來自A/Puerto Rico/8/34的PA、NP或M區(qū)段。當重配甲型流感病毒包含來自A/Puerto Rico/8/34的PA、NP或M區(qū)段時，其優(yōu)選不包含來自A/Texas/1/77的PBl區(qū)段。在一些實施方式中，本專利技術不涵蓋具有來自A/Texas/1/77的PBl區(qū)段和來自A/Puerto Rico/8/34的PA、NP和M區(qū)段的重配甲型流感病毒。來自A/Texas/1/77的PBl區(qū)段可具有SEQ ID NO:27的序列且來自A/Puerto Rico/8/34的PA、NP或M區(qū)段可分別具有SEQ ID NO 28、29或30的序列。與包含來自相同流感供體毒株的所有主鏈區(qū)段的重配流感毒株相比，本專利技術的甲型流感病毒可在相同時間內并在相同生長條件下在MDCK細胞和/或雞蛋中生長至較高的病毒效價。本專利技術還提供了一種重配甲型流感病毒，其包含來自供體毒株的至少一種主鏈病毒區(qū)段，該供體毒株是A/California/07/09流感毒株。當所述至少一種主鏈病毒區(qū)段是PA區(qū)段時，其序列可與SEQ ID NO: 15的序列具有至少95%或至少99%相同性。當所述至少一種主鏈病毒區(qū)段是PBl區(qū)段時，其序列可與SEQ ID NO: 16的序列具有至少95%或至少99%相同性。當所述至少一種主鏈病毒區(qū)段是PB2區(qū)段時，其序列可與SEQ ID N0:17的序列具有至少95%或至少99%相同性。當所述至少一種主鏈病毒區(qū)段是NP區(qū)段時，其序列可與SEQ ID NO: 18的序列具有至少95%或至少99%相同性。當所述至少一種主鏈病毒區(qū)段是M區(qū)段時，其序列可與SEQ ID NO: 19的序列具有至少95%或至少99%相同性。當所述至少一種主鏈病毒區(qū)段是NS區(qū)段時，其序列可與SEQ ID N0:20的序列具有至少95%或至少99%相同性。至少一種主鏈區(qū)段可來源于A/California/07/09流感毒株，如先前段落中所述。優(yōu)選的重配甲型流感病毒包含來自A/California/07/09流感毒株的PBl區(qū)段。專利技術人已表明，包含該主鏈區(qū)段的重配甲型流感病毒在培養(yǎng)宿主中生長良好。重配甲型流感病毒可包含來自不是A/California/07/09的流感病毒的所有其他主鏈區(qū)段。重配甲型流感病毒可包含來自A/California/07/09的PBl區(qū)段和來自流感毒株PR8-X 的所有其他主鏈區(qū)段。PR8-X 的區(qū)段具有 SEQ ID NO:1 (PA), SEQ ID NO: 2 (PBl) ,SEQID N0:3(PB2)、SEQ ID NO:4(NP)^SEQ ID NO:5(M)^SEQ ID NO:6(NS)^SEQ ID NO:7(HA)或SEQ ID N0:8(NA)的序列。因此，本專利技術的流感病毒可包含選自下組的一種或多種基因組區(qū)段:與SEQ ID NO:1的序列具有至少95%或99%相同性的PA區(qū)段、與SEQ ID NO: 3的序列具有至少95%或99%相同性的PB2區(qū)段、與SEQ ID NO:5的序列具有至少95%或99%相同性的M區(qū)段、與SEQ ID N0:4的序列具有至少95%或99%相同性的NP區(qū)段，和/SSEQID NO:6的序列具有至少95%或99%相同性的NS區(qū)段。該重配甲型流感病毒還可包含具有SEQ ID N0:1和/或3-6的序列的一種或多種病毒區(qū)段。在本文檔來自技高網...
【技術保護點】
一種重配甲型流感病毒，其包含來自兩種或多種供體毒株的主鏈區(qū)段，其中，HA區(qū)段和PB1區(qū)段來自具有相同流感病毒HA亞型的不同甲型流感毒株。
【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】...
【專利技術屬性】
技術研發(fā)人員：P·梅森，P·R·道米策，H·特魯賽姆，P·蘇帕菲帕特，
申請(專利權)人：諾華股份有限公司，合成基因組疫苗股份有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：瑞士;CH
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