本發(fā)明專利技術(shù)公開了一種鞘脂菌(Sphingobium?sp.)IBY及其在吸附降解疏水性有機物中的應(yīng)用。該菌于2015年7月1日保存于中國典型培養(yǎng)物保藏中心(CCTCC)，地址：中國武漢市武漢大學(xué)，保藏編號為CCTCC?NO：M?2015419。本發(fā)明專利技術(shù)提供了一種具有降解疏水性有機物能力的疏水細菌新種：鞘脂菌(Sphingobium?sp.)IBY，為疏水性有機物的環(huán)境污染治理提供了有效的降解菌種資源。
【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)屬于微生物
，具體涉及一種鞘脂菌（Sphingobiumsp.)IBY及其在 吸附降解疏水性有機物中的應(yīng)用。
技術(shù)介紹
細菌細胞的疏水相互作用是指疏水性較強的細胞能夠避開水而易與疏水性較強 的物質(zhì)發(fā)生作用。疏水性是決定細菌非特異性黏附到各種生物和非生物表面及界面的最重 要因素之一，也是影響細菌吸收和降解疏水性有機物的主要因素之一。在利用微生物降解 疏水性有機物的過程中，細胞表面疏水性影響細菌對污染物的黏附，能促進細菌對疏水性 有機物的吸附和降解。 結(jié)構(gòu)決定性質(zhì)，細菌細胞表面疏水性是菌體的表面性質(zhì)之一，也必定是菌體表面 結(jié)構(gòu)所決定的。研究表明，革蘭氏陰性菌的脂多糖和外膜蛋白與菌體表面疏水性具有一定 的關(guān)聯(lián)。鞘脂菌（Sphingobium)屬細菌屬于廣義上的鞘氨醇單胞菌（Sphingomonas)，其細 胞膜組成不同于一般的革蘭氏陰性菌特有的脂多糖，而取而代之的是鞘糖脂，因此推測廣 義鞘氨醇單胞菌比其他革蘭氏陰性菌具有更強的細胞表面疏水性。 雖然廣義鞘氨醇單胞菌被認為比其他革蘭氏陰性菌具有更強的細胞表面疏水性， 但目前所報道的廣義鞘氨醇單胞菌都是親水菌，它們細胞表面疏水性都不高，仍不屬于疏 水細菌，而且細胞表面疏水性隨著細菌生長狀態(tài)的不同而表現(xiàn)差異，并與培養(yǎng)過程添加的 碳源物質(zhì)和電子受體有關(guān)。一種性質(zhì)穩(wěn)定的真正意義上的疏水細菌的獲得，無疑將給疏水 性有機物的污染問題的解決帶來曙光。
技術(shù)實現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的第一個目的是提供一種疏水鞘脂菌（Sphingobiumsp. )IBY，該細菌于 2015年7月1日保存于中國典型培養(yǎng)物保藏中心（CCTCC)，地址：中國武漢市武漢大學(xué)，保 藏編號為CCTCCNO:M2015419。 本專利技術(shù)的鞘脂菌（Sphingobiumsp.)IBY是通過對廣東汕頭某電子垃圾集中處理 區(qū)的河床底泥進行富集培養(yǎng)、分離、純化，得到Sphingobium屬的一個新種。 鞘脂菌（Sphingobiumsp.)IBY的形態(tài)學(xué)和生理生化特征：該菌24h平板培養(yǎng)物菌 落圓形、黃色，突出培養(yǎng)基，透明，直徑0. 5-1. 0mm。菌體革蘭氏陰性，不形成芽孢，端生鞭毛。 菌體呈現(xiàn)長1. 0-3. 0ym寬0. 6-0. 9ym的長桿狀形態(tài)。氧化酶和過氧化氫酶陽性。該菌能 在好氧和兼性厭氧條件下生長，生長pH4. 0~9. 0。 鞘脂菌（Sphingobiumsp.)IBY的分子分類學(xué)地位：按照常規(guī)方法提取鞘脂菌 (Sphingobiumsp.)IBY的總DNA。采用16SrRNA通用引物8F和1492R利用高保真酶擴增其 16SrRNA基因，將PCR產(chǎn)物連接T載體后挑選陽性克隆進行測序，獲得其16SrRNA基因序 列，其序列如SEQIDNO. 1所示。將該序列與NCBI的GenBank中序列進行比對，進行BLAST 分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)鞘脂菌（Sphingobiumsp.)IBY的16SrRNA基因序列與Sphingobium屬的 已有模式菌株具有較高的相似性，其中與SphingobiumxenophagumBN6的序列相似性為 99 %。再擴增其gyrB基因，將PCR產(chǎn)物連接T載體后挑選陽性克隆進行測序，獲得的gyrB基 因序列，其序列如SEQIDNO. 2所示。經(jīng)BLAST分析，其與SphingobiumxenophagumBN6相 似度為96 %。采用復(fù)性速率液相雜交法測得鞘脂菌（Sphingobiumsp.)IBY與Sphingobium xenophagumBN6的全基因組DNA-DNA雜交率為54. 5%。 鞘脂菌（Sphingobiumsp. )IBY的細胞表面疏水性：通過微生物黏著碳氫化合物 (MATH)法測得該菌的細胞表面疏水性為58. 9%;水相接觸角測量（CAM)法測得該菌的水相 接觸角為60. 4°。上述兩種結(jié)果均遠遠大于同屬親緣性最高的Sphingobiumxenophagum BN6,并且屬于疏水細菌范疇。 綜合上述形態(tài)學(xué)、生理生化特征和分子分類學(xué)結(jié)果，認為（Sphingobiumsp.)IBY 屬于Sphingobium屬的一個新種，于2015年7月1日保存于中國典型培養(yǎng)物保藏中心 (CCTCC)，地址：中國武漢市武漢大學(xué)，保藏編號為CCTCCNO:M2015419。 本專利技術(shù)的第二個目的是提供鞘脂菌（Sphingobiumsp.)IBY在吸附降解疏水性有 機物中的應(yīng)用，優(yōu)選為在吸附降解多溴聯(lián)苯醚或苯系物中的應(yīng)用，更優(yōu)選的為在吸附降解 十溴二苯醚中的應(yīng)用。 本專利技術(shù)的鞘脂菌（Sphingobiumsp.)IBY具有很強的細胞表面疏水性，在純有機溶 劑十六烷烴中能較長時間保持較高存活率，能有效地吸附十溴二苯醚、苯系多種疏水性有 機物，在疏水有機物（比如十溴二苯醚）為碳源的培養(yǎng)基中能較快降解多種疏水性有機污 染物。 本專利技術(shù)提供了 一種具有降解疏水性有機物能力的疏水細菌新種一一鞘脂菌 (Sphingobiumsp.)IBY，為疏水性有機污染物的環(huán)境污染治理提供了有效的降解菌種資 源。 本專利技術(shù)的Sphingobiumsp.IBY已于2015年7月1日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏 中心（CCTCC)，地址：中國武漢市武漢大學(xué)，保藏編號為CCTCCNO:M2015419。【附圖說明】 圖1是鞘脂菌（Sphingobiumsp.)IBY在水相/十六烷烴兩相系統(tǒng)中分離不同時 間的照片。圖中分別表示SphingobiumxenophagumBN6(B)和鞘脂菌（Sphingobiumsp.) IBY(Cl)在水相/十六烷烴兩相系統(tǒng)中20min和18h的存活情況。 圖2是鞘脂菌（Sphingobiumsp.)IBY的水相接觸角照片。其中，B為Sphingobium xenophagumBN6的水相接觸角，Cl為鞘脂菌（Sphingobiumsp.)IBY的水相接觸角。【具體實施方式】 以下實施例是對本專利技術(shù)的進一步說明，而不是對本專利技術(shù)的限制。 實施例1 :鞘脂菌（Sphingobiumsp.)IBY的分離和鑒定 取20g廣東汕頭某電子垃圾集中處理區(qū)的河床底泥，加入80mL無菌水?dāng)噭虼蛏?后，過篩去掉植物殘渣及大顆粒物；濾液再經(jīng)過2000Xg，常溫，離心2min，去掉小顆粒物； 得到的上清液經(jīng)過6000Xg，常溫，離心lOmin，收集沉淀物；沉淀物加入80mL無菌水，洗 滌、離心處理三次。最后獲得的沉淀物作為種源，接種到無機鹽培養(yǎng)基中（Na2HP045. 7mM，KH2P043. 3mM，NH4C1 18.OmM，酵母抽提物0? 2g/L，0 _環(huán)糊精10mM)，培養(yǎng)基中同時加入1yM 的BDE209和2.8g/L的零價鐵粉。固體培養(yǎng)基中加入20g/L瓊脂。培養(yǎng)物置于30°C靜置避 光培養(yǎng)，每月經(jīng)過6000Xg，常溫，離心lOmin，收集沉淀物，重新轉(zhuǎn)入新的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 連續(xù)培養(yǎng)12個月以后，將富集培養(yǎng)物在固體培養(yǎng)基上劃線培養(yǎng)，得到單菌落。由此獲得菌 株IBY。 將菌株IBY進行形態(tài)學(xué)和生理生化鑒定，其形態(tài)學(xué)和生理生化特征如下：該菌24h 平板培養(yǎng)物菌落圓形、黃色，突出培養(yǎng)基，透明，直徑〇. 5-1.Omm。菌體革蘭氏陰性，不形成芽 孢，端生鞭毛。菌體呈現(xiàn)長1. 0-本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護點】
一種鞘脂菌(Sphingobium?sp.)IBY，其保藏編號為CCTCC?NO：M?2015419。
【技術(shù)特征摘要】
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：陳杏娟，許玫英，宋達，徐婧婧，李建軍，孫國萍，
申請(專利權(quán))人：廣東省微生物研究所，
類型：發(fā)明
國別省市：廣東;44
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