一種刺五加多糖的工業(yè)化生產(chǎn)方法及其應(yīng)用技術(shù)

本發(fā)明專(zhuān)利技術(shù)涉及一種刺五加多糖的工業(yè)化生產(chǎn)方法及其應(yīng)用，具體方法為：選取刺五加的根及根莖部分，粉碎后得到刺五加粉料，通過(guò)超臨界萃取，得刺五加萃余物；加水進(jìn)行連續(xù)逆流萃取，得到萃取液；經(jīng)非極性或弱極性大孔樹(shù)脂吸附，低度醇洗脫，水洗液過(guò)濾、濃縮干燥得刺五加多糖，低度醇洗脫液濃縮干燥刺五加苷E。本發(fā)明專(zhuān)利技術(shù)采用超臨界二氧化碳對(duì)刺五加原料進(jìn)行除雜，減輕了后續(xù)樹(shù)脂吸附過(guò)程的壓力；在提取刺五加多糖的同時(shí)，提取刺五加苷E，實(shí)現(xiàn)了原料的綜合利用，刺五加苷E總提取率達(dá)到90%以上，多糖含量得率95%以上；本發(fā)明專(zhuān)利技術(shù)得到的刺五加多糖在治療結(jié)核病方面有顯著的療效。

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
一種刺五加多糖的工業(yè)化生產(chǎn)方法及其應(yīng)用
本專(zhuān)利技術(shù)屬于植物提取
，具體涉及一種刺五加多糖的工業(yè)化生產(chǎn)方法及其應(yīng)用。
技術(shù)介紹
目前，對(duì)于臨床上結(jié)核桿菌呈陽(yáng)性患者始終貫徹和遵循直接監(jiān)督化療(DOTS)的原則，其合理的化療方案主要包括：以異煙肼、利福平、鏈霉素、對(duì)氨水楊酸、乙胺丁醇等為主要用藥的初治方案；以丙硫異煙胺、卡那霉素等為基礎(chǔ)的復(fù)治方案；以環(huán)丙沙星、氧氟沙星等為基礎(chǔ)的耐多藥結(jié)核病治療方案。上述臨床常用的抗結(jié)核藥物，其大部分本身均可引起機(jī)體肝功能異常，再加之長(zhǎng)時(shí)間的聯(lián)合用藥，更極大的增加了肝臟損傷的機(jī)會(huì)。一旦由于肝臟功能異常，而使抗結(jié)核藥物被迫降低劑量甚至停藥或換藥，其結(jié)核桿菌就很有可能產(chǎn)生耐藥性，最終導(dǎo)致整個(gè)化療方案的失敗。因此，如何獲得一種藥物，能夠種積極有效的輔助治療結(jié)核桿菌呈陽(yáng)性患者已成為提高抗結(jié)核藥物療效的關(guān)鍵和重中之重。刺五加中主要含有甙類(lèi)、苷類(lèi)、三萜類(lèi)、黃酮類(lèi)、多糖類(lèi)、氨基酸、有機(jī)酸、維生素和礦質(zhì)元素等多種活性成分，這些活性成分也表現(xiàn)出不同的藥理作用。目前，在我國(guó)除了中醫(yī)處方中應(yīng)用刺五加外，以刺五加為原料的藥物種類(lèi)也相對(duì)較多，如刺五加片、刺五加注射液、腦安片、安神補(bǔ)腦膠囊等。刺五加多糖(Acathopanassenticosuspolysacharides,ASPS)是從刺五加的根及根莖中所提取到的生物活性多糖。迄今為止，國(guó)內(nèi)、外學(xué)者已經(jīng)從剌五加中分離提取出了多種由果糖、葡萄糖、阿拉伯糖組成的多糖組分。刺五加多糖是刺五加活性成分中含量最高且作用最為廣泛的功能性因子之一，其具有增強(qiáng)免疫力、抗腫瘤、抗菌、抗病毒、抗衰老、降血糖和降血脂等作用，但尚未見(jiàn)關(guān)于刺五加多糖對(duì)于結(jié)核病有治療作用的報(bào)道。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專(zhuān)利技術(shù)要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種刺五加多糖的工業(yè)化生產(chǎn)方法及其應(yīng)用。該方法操作簡(jiǎn)單，得率高，適用于工業(yè)化大生產(chǎn)。本專(zhuān)利技術(shù)的目的之一是提供一種刺五加多糖的制備方法，采用下述工藝步驟：（1）預(yù)處理：選取刺五加的根及根莖部分，粉碎后得到刺五加粉料，備用；（2）除雜：所述刺五加粉料通過(guò)超臨界萃取，去除小分子雜質(zhì)，得到刺五加萃余物；（3）提取：所述刺五加萃余物用等質(zhì)量的水浸泡，水中添加原料質(zhì)量0.01-0.05%的混合酶；然后用水進(jìn)行連續(xù)逆流萃取，得到萃取液；所述的萃取條件為：料液質(zhì)量比1:16～20，萃取溫度68～86℃，萃取時(shí)間2～4h；（4）吸附：所述萃取液粗過(guò)濾除雜后，經(jīng)非極性或弱極性大孔樹(shù)脂吸附，然后依次用1～2BV的水和1～3BV低度醇洗脫，得到水洗液以及低度醇洗脫液兩部分；所述水洗液通過(guò)0.22μm的濾膜過(guò)濾得到透過(guò)液，將透過(guò)液通過(guò)0.01μm的濾膜，得到截留液；所述截留液、低度醇洗脫液分別濃縮至固含量15-30%，得截留濃縮液、刺五加低度醇濃縮液；（5）干燥：所述刺五加低度醇濃縮液干燥，得到刺五加苷E；所述截留濃縮液干燥，得到刺五加多糖。本專(zhuān)利技術(shù)所述步驟（2）中的超臨界萃取條件為CO2流量1200～1400L/h、萃取壓力20～28MPa、萃取溫度43～65℃、萃取時(shí)間0.5～3h，分離壓力7～11MPa、分離溫度22～37℃、分離時(shí)間0.5～3h。本專(zhuān)利技術(shù)所述步驟（1）中的粉碎指20目篩通過(guò)率90%以上、80目篩通過(guò)率10%以下；刺五加的根及根莖的含水量在8-16wt%。本專(zhuān)利技術(shù)所述步驟（3）中刺五加萃余物浸泡溫度20～35℃，時(shí)間2～4h；所述混合酶中各組分比例為蛋白酶：纖維素酶：果膠酶=2～4:1～2:0～0.5。本專(zhuān)利技術(shù)所述步驟（3）中連續(xù)逆流萃取用水pH值為4～7，料液質(zhì)量比為1:16～18,萃取溫度72～81℃。本專(zhuān)利技術(shù)所述步驟（4）中的粗過(guò)濾是指萃取液降溫后加入萃取液重量0.5～3%的硅藻土或珍珠巖，攪拌均勻后，將萃取液通過(guò)300～500目的板式過(guò)濾機(jī)過(guò)濾，得到澄清透明的萃取液。本專(zhuān)利技術(shù)所述步驟（4）中的樹(shù)脂為D130、D101和AB-8中的一種或幾種；低度醇為濃度5～10wt%的乙醇溶液。本專(zhuān)利技術(shù)所述步驟（5）中干燥方法為噴霧干燥或冷凍干燥中的任意一種。本專(zhuān)利技術(shù)所述刺五加多糖平均分子量為10～30KD；阿拉伯糖：木糖：葡萄糖：甘露糖=6～9:20～25:6～9:0.5～2。本專(zhuān)利技術(shù)的另一目的是提供刺五加多糖用于制備治療結(jié)核病藥物方面的應(yīng)用，尤其是刺五加多糖用于制備治療結(jié)核病口服藥物方面的應(yīng)用。本專(zhuān)利技術(shù)所述刺五加多糖含量檢測(cè)方法為苯酚-硫酸法，刺五加苷E檢測(cè)方法參考胡廣東在《黑龍江醫(yī)藥科學(xué)》（2009年第5期）期刊上發(fā)表的《刺五加中刺五加苷E的含量測(cè)定》中的方法。采用上述技術(shù)方案所產(chǎn)生的有益效果在于：1、本專(zhuān)利技術(shù)采用超臨界二氧化碳對(duì)刺五加原料進(jìn)行除雜，去除了黃酮類(lèi)、香豆素類(lèi)等小分子非極性或弱極性物質(zhì)，避免了有效成分提取環(huán)節(jié)后的除雜工序，減輕了后續(xù)樹(shù)脂吸附過(guò)程的壓力，延長(zhǎng)了樹(shù)脂的使用壽命，提高了生產(chǎn)效率；2、本專(zhuān)利技術(shù)同時(shí)得到刺五加苷E，實(shí)現(xiàn)了原料的綜合利用，有效的避免了資源的浪費(fèi)，刺五加苷E總提取率達(dá)到90%以上；3、本專(zhuān)利技術(shù)運(yùn)用連續(xù)逆流提取，選用較大的料液比，保證了提取率，同時(shí)選用樹(shù)脂吸附，摒棄了傳統(tǒng)工藝濃縮醇沉的步驟，極大的降低了能耗；4、選用膜過(guò)濾方式，截留目標(biāo)平均分子量的刺五加多糖，無(wú)需使用昂貴的凝膠樹(shù)脂，得率高，能耗低，成本小，適合工業(yè)化規(guī)模生產(chǎn)，多糖含量得率95%以上；5、本專(zhuān)利技術(shù)生產(chǎn)的刺五加多糖，經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明，在治療結(jié)核病方面有顯著的療效，具有較好的藥用前景。具體實(shí)施方式下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本專(zhuān)利技術(shù)作進(jìn)一步詳細(xì)的說(shuō)明。實(shí)施例1本刺五加多糖的工業(yè)化生產(chǎn)方法采用下述具體工藝。（1）預(yù)處理：選取刺五加的根及根莖部分，含水量在8wt%，粉碎至20目篩通過(guò)率90%以上、80目篩通過(guò)率10%以下，得到刺五加粉料，備用。（2）除雜：所述刺五加粉料通過(guò)超臨界萃取，去除小分子雜質(zhì)，得到刺五加萃余物；超臨界萃取條件為CO2流量1200L/h、萃取壓力28MPa、萃取溫度43℃、萃取時(shí)間0.5h，分離壓力7MPa、分離溫度22℃、分離時(shí)間0.5h。（3）提取：所述刺五加萃余物用等質(zhì)量的水35℃浸泡2h，水中添加原料質(zhì)量0.01%的混合酶；混合酶中各組分比例為蛋白酶：纖維素酶：果膠酶=3:1.5:0.2。然后用pH值為6.2的水進(jìn)行連續(xù)逆流萃取，料液質(zhì)量比為1:16,萃取溫度86℃，萃取時(shí)間3h。（4）吸附：所述萃取液粗過(guò)濾除雜后，經(jīng)D130樹(shù)脂吸附，然后依次用1BV的水和3BV濃度5wt%的乙醇溶液洗脫，得到水洗液以及低度醇洗脫液兩部分；所述水洗液通過(guò)0.22μm的濾膜過(guò)濾得到透過(guò)液，將透過(guò)液通過(guò)0.01μm的濾膜，得到截留液；所述截留液、低度醇洗脫液分別濃縮至固含量15%，得截留濃縮液、刺五加低度醇濃縮液；粗過(guò)濾是指萃取液降溫后加入萃取液重量0.5%的硅藻土，攪拌均勻后，將萃取液通過(guò)300目的板式過(guò)濾機(jī)過(guò)濾，得到澄清透明的萃取液。（5）干燥：所述刺五加低度醇濃縮液噴霧干燥，得到刺五加苷E；所述截留濃縮液噴霧干燥，得到刺五加多糖。本方法所述刺五加苷E得率為90.7%；刺五加多糖得率為96.1%，平均分子量為20KD；阿拉伯糖：木糖：葡萄糖：甘露糖=7.1:22.3:7.6:1.0。實(shí)施例2本刺五加多糖的工業(yè)化生產(chǎn)方法采用下述具體工藝。（1）預(yù)處理：選取刺五加的根及根莖部分，含水量在16wt%，粉碎至本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
刺五加多糖的工業(yè)化生產(chǎn)方法，其特征在于，其采用下述工藝步驟：（1）預(yù)處理：選取刺五加的根及根莖部分，粉碎后得到刺五加粉料，備用；（2）除雜：所述刺五加粉料通過(guò)超臨界萃取，去除小分子雜質(zhì)，得到刺五加萃余物；（3）提取：所述刺五加萃余物用等質(zhì)量的水浸泡，水中添加原料質(zhì)量0.01?0.05%的混合酶；然后用水進(jìn)行連續(xù)逆流萃取，得到萃取液；所述的萃取條件為：料液質(zhì)量比1:16～20，萃取溫度68～86℃，萃取時(shí)間2～4h；（4）吸附：所述萃取液粗過(guò)濾除雜后，經(jīng)非極性或弱極性大孔樹(shù)脂吸附，然后依次用1～2BV的水和1～3BV低度醇洗脫，得到水洗液以及低度醇洗脫液兩部分；所述水洗液通過(guò)0.22μm的濾膜過(guò)濾得到透過(guò)液，將透過(guò)液通過(guò)0.01μm的濾膜，得到截留液；所述截留液、低度醇洗脫液分別濃縮至固含量15?30%，得截留濃縮液、刺五加低度醇濃縮液；（5）干燥：所述刺五加低度醇濃縮液干燥，得到刺五加苷E；所述截留濃縮液干燥，得到刺五加多糖。

【技術(shù)特征摘要】
1.刺五加多糖的工業(yè)化生產(chǎn)方法，其特征在于，其采用下述工藝步驟：（1）預(yù)處理：選取刺五加的根及根莖部分，粉碎后得到刺五加粉料，備用；（2）除雜：所述刺五加粉料通過(guò)超臨界萃取，去除小分子雜質(zhì)，得到刺五加萃余物；（3）提取：所述刺五加萃余物用等質(zhì)量的水浸泡，水中添加原料質(zhì)量0.01-0.05%的混合酶；然后用水進(jìn)行連續(xù)逆流萃取，得到萃取液；所述的萃取條件為：料液質(zhì)量比1:16～20，萃取溫度68～86℃，萃取時(shí)間2～4h；（4）吸附：所述萃取液粗過(guò)濾除雜后，經(jīng)非極性或弱極性大孔樹(shù)脂吸附，然后依次用1～2BV的水和1～3BV低度醇洗脫，得到水洗液以及低度醇洗脫液兩部分；所述水洗液通過(guò)0.22μm的濾膜過(guò)濾得到透過(guò)液，將透過(guò)液通過(guò)0.01μm的濾膜，得到截留液；所述截留液、低度醇洗脫液分別濃縮至固含量15-30%，得截留濃縮液、刺五加低度醇濃縮液；（5）干燥：所述刺五加低度醇濃縮液干燥，得到刺五加苷E；所述截留濃縮液干燥，得到刺五加多糖。2.根據(jù)權(quán)利要求１所述的刺五加多糖的工業(yè)化生產(chǎn)方法，其特征在于：所述步驟（2）中的超臨界萃取條件為CO2流量1200～1400L/h、萃取壓力20～28MPa、萃取溫度43～65℃、萃取時(shí)間0.5～3h，分離壓力7～11MPa、分離溫度22～37℃、分離時(shí)間0.5～3h。3.根據(jù)權(quán)利要求１所述的刺五加多糖的工業(yè)化生產(chǎn)方法，其特征在于：所述步驟（1）中的粉碎指20目篩通過(guò)率90%以上、80目篩通過(guò)率10%以下；刺五加的根...

【專(zhuān)利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：潘景芝，孟慶龍，劉雅靜，陳麗，任躍英，崔文玉，張健，
申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人：長(zhǎng)春市傳染病醫(yī)院，
類(lèi)型：發(fā)明
國(guó)別省市：吉林;22