一種尿液單羥酚類代謝物檢測試劑的制備方法技術

本發明專利技術涉及檢測試劑領域，具體涉及一種尿液單羥酚類代謝物檢測試劑的制備方法，包括如下步驟：制備0.2-1g/ml的硫酸鐵溶液，作為A溶液；制備0.1-1g/ml的硫酸汞溶液，作為B溶液；制備0.15-1g/ml的硝酸銅溶液，作為C溶液；制備0.15-1g/ml的硝酸鐵溶液，作為D溶液；將A溶液、B溶液、C溶液、D溶液以質量比為1:（1-2）:（1.5-2）：1混合后，加入防腐劑，攪拌均勻并制成淡綠色的尿液單羥酚類代謝物檢測試劑；其中，A溶液、B溶液、C溶液、D溶液以及A溶液、B溶液、C溶液和D溶液的混合液的溫度均為30-35攝氏度之間。本發明專利技術采用A溶液、B溶液、C溶液、D溶液以最優質量比和最佳濃度混合以制成檢測試劑，靈敏度高，假陽性率和假陰性率低，且操作簡單成本低。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及檢測試劑領域，具體涉及一種尿液單羥酚類代謝物檢測試劑的制備方 法。
技術介紹
目前，國內外用于診斷腫瘤的方法很多，常見的是檢測各種腫瘤標志物如血PSA、 AFP、CEA、鐵蛋白、CA125和脂蛋白等，盡管這些標志物的檢出率較高，但大多都是有損傷性 的檢測，且操作復雜、價格昂貴，不宜于大規模人群篩查。通過尿液來檢測腫瘤避免了抽血 這項容易引起感染的環節，國內外亦有許多方法如：高效液相色譜法測定尿多胺，ELISA法 測定尿鐵蛋白和測定尿液中的絡氨酸及其代謝物和蛋白芯片檢測腫瘤標志物等。其方法各 有利弊，如HPLC法測定尿多胺，雖然靈敏度高，選擇性好，但操作復雜不易在臨床開展。
技術實現思路
本專利技術針對現有技術的不足，提供了一種靈敏度高、操作簡單、準確度高、成本較 低的尿液單羥酚類代謝物檢測試劑的制備方法。 本專利技術采用以下技術方案：，其特 征在于，包括如下步驟： (1)制備0· 2-lg/ml的硫酸鐵溶液，作為A溶液； (2)制備0· Ι-lg/ml的硫酸汞溶液，作為B溶液； (3)制備0· 15-lg/ml的硝酸銅溶液，作為C溶液； (4)制備0· 15-lg/ml的硝酸鐵溶液，作為D溶液； (5)將A溶液、B溶液、C溶液、D溶液以質量比為1: (1-2) : (1. 5-2) : 1 混合后，加入防腐劑，攪拌均勻并制成淡綠色的尿液單羥酚類代謝物檢測試劑； 其中，A溶液、B溶液、C溶液、D溶液以及A溶液、B溶液、C溶液和D溶液 的混合液的溫度均為30-35攝氏度之間。 所述的A溶液的制備過程如下：將20-25g鐵溶于245-250ml的2-3M的硫酸溶液 中，待鐵完全溶解后，制成A溶液。 所述的B溶液的制備過程如下：將10-25g汞溶于245-250ml的2-3M的硫酸溶液 中，待萊完全洛解后，制成B ?谷液。 所述的C溶液的制備過程如下：將15-25g銅溶于245-250ml的2-3Μ的硝酸溶液 中，待銅完全洛解后，制成C ?谷液。 所述的D溶液的制備過程如下：將15-25g鐵溶于245-250ml的2-3Μ的硝酸溶液 中，待鐵完全溶解后，制成D溶液。 在步驟（5)中，防腐劑為苯甲酸鈉、山梨酸鉀、脫氫乙酸鈉、丙酸鈣、雙乙酸鈉、乳 酸鈉或對羥基苯甲酸丙酯的一種或幾種。 在步驟（5)中，A溶液、B溶液、C溶液、D溶液以質量比為1:1-2:1. 5 :1混合。 本專利技術采用A溶液、B溶液、C溶液、D溶液以最優質量比和最佳濃度混合以制成檢 測試劑，靈敏度高，假陽性率和假陰性率低，且操作簡單成本低。【具體實施方式】 下面結合具體實施例對本專利技術作進一步詳細介紹。 制備實施例1 (1)制備硫酸鐵溶液，作為A溶液；將20g鐵溶于250ml的2M的硫酸溶液中，待鐵 完全溶解后，制成A溶液 (2)制備硫酸汞溶液，作為B溶液；將15g汞溶于250ml的2M的硫酸溶液中，待汞 完全溶解后，制成B溶液； (3)制備硝酸銅溶液，作為C溶液；將15g銅溶于250ml的2M的硝酸溶液中，待銅 完全溶解后，制成C溶液。 (4)制備硝酸鐵溶液，作為D溶液；將20g鐵溶于250ml的2M的硝酸溶液中，待鐵 完全溶解后，制成D溶液。 (5)將A溶液、B溶液、C溶液、D溶液以質量比為1:2:1. 5 :1混合后，加入防腐劑， 攪拌均勻并制成淡綠色的尿液單羥酚類代謝物檢測試劑； A溶液、B溶液、C溶液、D溶液以及A溶液、B溶液、C溶液和D溶液的混合液的溫 度均為30 - 35攝氏度之間。 制備實施例2 (1)制備硫酸鐵溶液，作為A溶液；將25g鐵溶于250ml的3M的硫酸溶液中，待 鐵完全溶解后，制成A溶液 ⑵制備硫酸汞溶液，作為B溶液；將20g汞溶于250ml的3M的硫酸溶液中，待汞 完全溶解后，制成B溶液； (3)制備硝酸銅溶液，作為C溶液；將20g銅溶于250ml的2M的硝酸溶液中，待銅 完全溶解后，制成C溶液。 (4)制備硝酸鐵溶液，作為D溶液；將20g鐵溶于250ml的2M的硝酸溶液中，待鐵 完全溶解后，制成D溶液。 (5)將A溶液、B溶液、C溶液、D溶液以質量比為1:1. 5:2 :1混合后，加入防腐劑， 攪拌均勻并制成淡綠色的尿液單羥酚類代謝物檢測試劑； A溶液、B溶液、C溶液、D溶液以及A溶液、B溶液、C溶液和D溶液的混合液的溫 度均為30 - 35攝氏度之間。 制備實施例3 (1)制備硫酸鐵溶液，作為A溶液；將20g鐵溶于250ml的2M的硫酸溶液中，待鐵 完全溶解后，制成A溶液 (2)制備硫酸汞溶液，作為B溶液；將15g汞溶于250ml的2M的硫酸溶液中，待汞 完全溶解后，制成B溶液； (3)制備硝酸銅溶液，作為C溶液；將25g銅溶于250ml的2M的硝酸溶液中，待銅 完全溶解后，制成C溶液。 (4)制備硝酸鐵溶液，作為D溶液；將25g鐵溶于250ml的2M的硝酸溶液中，待鐵 完全溶解后，制成D溶液。 (5)將A溶液、B溶液、C溶液、D溶液以質量比為1:2:1. 5 :1混合后，加入防腐劑， 攪拌均勻并制成淡綠色的尿液單羥酚類代謝物檢測試劑； A溶液、B溶液、C溶液、D溶液以及A溶液、B溶液、C溶液和D溶液的混合液的溫 度均為30 - 35攝氏度之間。 對比例1 (1)制備硫酸汞溶液，作為A溶液；將15g汞溶于250ml的2M的硫酸溶液中，待汞 完全溶解后，制成A溶液； (2)制備硝酸鎳溶液，作為B溶液；將25g銅溶于250ml的2M的硝酸溶液中，待銅 完全溶解后，制成B溶液。 (3)制備硝酸汞溶液，作為C溶液；將25g鐵溶于250ml的2M的硝酸溶液中，待鐵 完全溶解后，制成C溶液。 (4)將A溶液、B溶液、C溶液以質量比為1:2:1. 5 :1混合后，加入防腐劑，攪拌均 勻并制成淡綠色的尿液單羥酚類代謝物檢測試劑； A溶液、B溶液、C溶液以及A溶液、B溶液、C溶液的混合液的溫度均為30 - 35攝 氏度之間。 對比例2 (1)制備硫酸鐵溶液，作為A溶液；將20g鐵溶于250ml的2M的硫酸溶液中，待鐵 完全溶解后，制成A溶液 ⑵制備硫酸汞溶液，作為B溶液；將15g汞溶于250ml的2M的硫酸溶液中，待汞 完全溶解后，制成B溶液； (3)制備硝酸銅溶液，作為C溶液；將25g銅溶于250ml的2M的硝酸溶液中，待銅 完全溶解后，制成C溶液。 (4)制備硝酸鐵溶液，作為D溶液；將25g鐵溶于250ml的2M的硝酸溶液中，待鐵 完全溶解后，制成D溶液。 (5)將A溶液、B溶液、C溶液、D溶液以質量比為1:2:1. 5 :1混合后，加入防腐劑， 攪拌均勻并制成淡綠色的尿液單羥酚類代謝物檢測試劑； A溶液、B溶液、C溶液、D溶液以及A溶液、B溶液、C溶液和D溶液的混合液的溫 度均為25攝氏度。 取100個確診的肝癌病人尿液樣本、以及10個無癌癥樣本（即陰性樣本），分別用 制備實施例1 - 3和對比例1 - 2進行尿液單羥酚類代謝物檢測，檢測結果如下表1和表2。 檢測方法為：取被檢者尿液3ml，滴入0. 5ml的檢測試劑中，搖勻，靜置3min，檢測 標準是：出現白色/黃色沉淀或者不出現沉淀者，為陰性，出現灰色/黑色沉淀者為陽性，對 由灰色到黑色的不同顏色可以設置比色板，顏色越深說明單羥酚類代謝物含量本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種尿液單羥酚類代謝物檢測試劑的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：（1）制備0.2?1g/ml的硫酸鐵溶液，作為A溶液；（2）制備0.1?1g/ml的硫酸汞溶液，作為B溶液；（3）制備0.15?1g/ml的硝酸銅溶液，作為C溶液；（4）制備0.15?1g/ml的硝酸鐵溶液，作為D溶液；（5）將A溶液、B溶液、C溶液、D溶液以質量比為1:（1?2）:（1.5?2）：1混合后，加入防腐劑，攪拌均勻并制成淡綠色的尿液單羥酚類代謝物檢測試劑；其中，A溶液、B溶液、C溶液、D溶液以及A溶液、B溶液、C溶液和D溶液的混合液的溫度均為30?35攝氏度之間。

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：扈曉佳，梅宗泉，梅春華，
申請(專利權)人：蘇州銳霖生物科技有限公司，
類型：發明
國別省市：江蘇;32