本發明專利技術公開了一種GC-MS/MS測定水果和蔬菜中二溴氯丙烷殘留的方法，包括提取、凈化、標準工作溶液的配制和氣相色譜串聯質譜（GC-MS/MS）測定，將分散固相萃取前處理技術和GC-MS/MS檢測技術相結合，快速簡便，采用醋酸、乙腈作為溶劑，毒性小。檢出限低至0.76ug/kg，所以靈敏度高；回收率86.54-95.25%，所以選擇性強；RSD值2.44-5.79%，所以重現性好，有效的去除了基質的干擾，適用于各種蔬菜水果中二溴氯丙烷的檢測；在分散固相萃取前處理方法的凈化步驟中加入了甲苯，降低PSA對目標物的吸附，同一基質中使方法的回收率由不加甲苯時的72.03-75.88%，提高到86.54-94.29%。
【技術實現步驟摘要】
一種GC-MS/MS測定水果和蔬菜中二溴氯丙烷殘留的方法
本專利技術涉及一種二溴氯丙烷殘留量的檢測方法，更具體地說，涉及一種采用氣相色譜-串聯質譜法（GC-MS/MS）定性定量測定水果和蔬菜中二溴氯丙烷殘留量的方法，屬于農藥殘留的檢測
技術介紹
二溴氯丙烷，俗稱黑藥，學名1，2-二溴-3-氯丙烷，英文名稱1，2-Dibromo-3-chloropropane（簡稱：DBCP），CAS號為96-12-8，分子量236.3328，結構式為：二溴氯丙烷是液態熏蒸性殺線蟲劑的活性成份。它是一種農業上使用的土壤熏蒸劑，適用于蔬菜、花卉、煙草、草莓等作物的苗床和溫室大棚的熏蒸，防治根結線蟲、孢囊線蟲、短體線蟲、螺旋線蟲、紐帶線蟲、矮化線蟲等。眾多研究表明二溴氯丙烷對人體有劇毒，具有高殘留、致畸、致不育的特點。在發現它對人類健康造成不良影響之后，此化合物于1979年被禁止及限制使用。但仍有不法分子為取得高效的種植效果，暗地使用該農藥，為社會留下不少隱患。國內外對于水果和蔬菜中二溴氯丙烷的檢測研究開展的較少，且主要集中在上世紀80年代。已有的研究主要是針對花生上的二溴氯丙烷，采用氣相色譜技術進行其殘留量檢測，但前處理手段落后、過程繁瑣、檢測效率低，且溶劑多為毒性較大的苯、乙烷、濃硫酸等，對人體有較大危害，不適用于果蔬基質。另外，氣相色譜技術無法克服基質干擾、假陽性等問題，不能進行較復雜基質中二溴氯丙烷的檢測，限制了其使用范圍。因此，迫切需要建立一種操作簡單、回收率高、重復性好、檢出限低、選擇性好的方法，適用于各種蔬菜和水果中二溴氯丙烷的檢測。
技術實現思路
本專利技術要解決的問題是針對以上不足，提供一種GC-MS/MS測定水果和蔬菜中二溴氯丙烷殘留的方法，克服傳統技術檢測步驟繁瑣、溶劑毒性較大、靈敏度低、回收率低、重現性差、不適用于果蔬基質的缺陷，采用本專利技術的方法，具有檢測快速簡便、毒性小、靈敏度高、選擇性強、重現性好、回收率高的優點。為解決以上問題，本專利技術采取的技術方案是：一種GC-MS/MS測定水果和蔬菜中二溴氯丙烷殘留的方法，其特征在于，包括如下步驟：（1）提取：稱取粉碎好的樣品置于具塞離心管中，加入無水硫酸鎂、無水乙酸鈉和0.1%醋酸/乙腈溶液，立即用玻璃棒充分攪拌均勻，均質后離心得樣品提取液；（2）凈化：移取樣品提取液上清液于旋蒸瓶中，旋蒸至近干，用乙腈溶解殘渣，渦旋振蕩，溶解液轉入加有分散固相萃取劑和甲苯的離心管中，渦旋振蕩，離心，過膜得樣品液；（3）標準工作溶液的配制：采用樣品空白基質提取液配制不同濃度標準工作液，然后用標準溶液濃度-色譜峰面積作標準工作曲線；（4）氣相色譜串聯質譜（GC-MS/MS）測定將步驟（3）中的各濃度的標準工作液進行GC-MS/MS測定，用標準溶液濃度-色譜峰面積作出標準工作曲線；在相同條件下將步驟（2）中得到的樣品液進行GC-MS/MS測定，測得樣品中二溴氯丙烷的色譜峰面積，帶入標準曲線，得到樣品液中二溴氯丙烷的含量，然后根據樣品液所代表的質量計算得到樣品中二溴氯丙烷的殘留量。以下是對上述技術方案的進一步說明：步驟（1）中樣品若為脫水蔬菜和水果，稱樣量減為正常值的十分之一，然后加水至正常值，浸泡半小時，進行檢測。步驟（2）中分散固相萃取劑由PSA和C18組成，加入量分別為150mg和200mg，甲苯為100ul。步驟（4）中色譜條件為：色譜柱HP-5MS毛細管色譜柱，30*0.25*0.25；進樣口溫度250℃；載氣：He氣，不分流模式進樣，進樣量1ul；恒流模式，柱流量1.0ml/min；程序升溫：初溫50℃保持2min，以每分鐘5℃的速度升至180℃，保持5min，然后以每分鐘20℃的速度升至210℃，保持5min；傳輸線溫度250℃。質譜條件為：離子源溫度：250℃；電離模式：EI；碰撞氣：高純氬；多反應監測掃描模式SRM，二溴氯丙烷的母離子為156.8-157.2，子離子分別為74.8-75.2和76.8-77.2。步驟（4）中測定樣品和標準工作溶液時，若兩者相應農藥的保留時間一致，并且在扣除背景后的樣品質譜圖中所選擇的離子均出現，且離子豐度比與標準溶液一致，則可判斷樣品中殘留此種農藥，若不能同時滿足上述兩個條件，則判斷不含該種農藥?；厥章蕿?6.54-95.25%，檢出限為0.76ug/kg，RSD為2.44-5.79%。本專利技術采用以上技術方案，與傳統技術相比，具有以下優點：將分散固相萃取前處理技術和GC-MS/MS檢測技術相結合，快速簡便，采用醋酸、乙腈作為溶劑，毒性小。檢出限低至0.76ug/kg，所以靈敏度高。回收率86.54-95.25%，所以選擇性強。RSD值2.44-5.79%，所以重現性好，有效的去除了基質的干擾，適用于各種蔬菜水果中二溴氯丙烷的檢測。在分散固相萃取前處理方法的凈化步驟中加入了甲苯，降低PSA對目標物的吸附，同一基質中使方法的回收率由不加甲苯時的72.03-75.88%，提高到86.54-94.29%。下面結合附圖和實施例對本專利技術作詳細說明。附圖說明附圖1為添加在空白蘋果基質中的二溴氯丙烷標液的選擇離子色譜圖；附圖2為空白蘋果樣品的選擇離子色譜圖；附圖3為添加在空白蘋果基質中的二溴氯丙烷標液的質譜圖。具體實施方式現以以下實施實例來說明本專利技術，但并不是限制本專利技術的范圍。實施例1：下面以蘋果為例，說明GC-MS/MS測定二溴氯丙烷殘留的方法，包括如下步驟：（1）樣品前處理稱取粉碎并充分混勻的蘋果15g，置于100mL塑料離心管中，加入0.1%醋酸/乙腈溶液15mL，無水硫酸鎂6.0g，無水乙酸鈉1.5g，用玻璃棒充分攪拌均勻，于均質器上高速均質2min，10000r/min，4℃高速離心10min；取10mL上清液于250mL旋蒸瓶中，旋蒸至近干，準確加入乙腈2mL溶解殘渣，1400r/min渦混2min，溶解液轉移入盛有150mgPSA、200mgC18和100uL甲苯的離心管中，1400r/min渦混2min，凈化液4000r/min，離心10min后用0.45um濾膜過濾，供GC-MS/MS分析。（2）氣相色譜串聯質譜（GC-MS/MS）測定將不同濃度的標準工作液進行GC-MS/MS測定，用標準溶液濃度-色譜峰面積作出標準工作曲線；在相同條件下將樣品液進行GC-MS/MS測定，測得樣品中二溴氯丙烷的色譜峰面積，帶入標準曲線，得到樣品液中二溴氯丙烷的含量，然后根據樣品液所代表的質量計算得到樣品中二溴氯丙烷的殘留量。（3）色譜條件和質譜條件色譜條件：色譜柱HP-5MS毛細管色譜柱，30*0.25*0.25；進樣口溫度250℃；載氣：He氣，不分流模式進樣，進樣量1uL；恒流模式，柱流量1.0mL/min；程序升溫：初溫50℃保持2min，以每分鐘5℃的速度升至180℃，保持5min，然后以每分鐘20℃的速度升至210℃，保持5min；傳輸線溫度250℃。質譜條件：離子源溫度：250℃；電離模式：EI；碰撞氣：高純氬；多反應監測掃描模式SRM，二溴氯丙烷的母離子為156.8-157.2，子離子分別為74.8-75.2和76.8-77.2。表1MRM檢測參數*為定量離子對。（4）基質標準工作曲線分別用蘋果空白基質提取液配制標準工作本文檔來自技高網...
【技術保護點】
一種GC?MS/MS測定水果和蔬菜中二溴氯丙烷殘留的方法，其特征在于，包括如下步驟：（1）提取：稱取粉碎好的樣品置于具塞離心管中，加入無水硫酸鎂、無水乙酸鈉和0.1%醋酸/乙腈溶液，立即用玻璃棒充分攪拌均勻，均質后離心得樣品提取液；（2）凈化：移取樣品提取液上清液于旋蒸瓶中，旋蒸至近干，用乙腈溶解殘渣，渦旋振蕩，溶解液轉入加有分散固相萃取劑和甲苯的離心管中，渦旋振蕩，離心，過膜得樣品液；（3）標準工作溶液的配制：采用樣品空白基質提取液配制不同濃度標準工作液，然后用標準溶液濃度?色譜峰面積作標準工作曲線；（4）氣相色譜串聯質譜（GC?MS/MS）測定將步驟（3）中的各濃度的標準工作液進行GC?MS/MS測定，用標準溶液濃度?色譜峰面積作出標準工作曲線；在相同條件下將步驟（2）中得到的樣品液進行GC?MS/MS測定，測得樣品中二溴氯丙烷的色譜峰面積，帶入標準曲線，得到樣品液中二溴氯丙烷的含量，然后根據樣品液所代表的質量計算得到樣品中二溴氯丙烷的殘留量。
【技術特征摘要】
1.一種GC-MS/MS測定水果中二溴氯丙烷殘留的方法，其特征在于，包括如下步驟：（1）樣品前處理稱取粉碎并充分混勻的蘋果15g，置于100mL塑料離心管中，加入0.1%醋酸/乙腈溶液15mL，無水硫酸鎂6.0g，無水乙酸鈉1.5g，用玻璃棒充分攪拌均勻，于均質器上高速均質2min，10000r/min，4℃高速離心10min；取10mL上清液于250mL旋蒸瓶中，旋蒸至近干，準確加入乙腈2mL溶解殘渣，1400r/min渦混2min，溶解液轉移入盛有150mgPSA、200mgC18和100μL甲苯的離心管中，1400r/min渦混2min，凈化液4000r/min，離心10min后用0.45μm濾膜過濾，供GC-MS/MS分析；（2）氣相色譜串聯質譜（GC-MS/MS）測定將不同濃度的標準工作液進行GC-MS/MS測定，用標準溶液濃度-色譜峰面積作出標準工作曲線；在相同條件下將樣品液進行GC-MS/MS測定，測得樣品中二溴氯丙烷的色譜峰面積，帶入標準曲線，得到樣品液中二溴氯丙烷的含量，然后根據樣品液所代表的質量計算得到樣品中二溴氯丙烷的殘留量；（3）色譜...
【專利技術屬性】
技術研發人員：許文娟，劉永強，孫軍，郭禮強，
申請(專利權)人：許文娟，
類型：發明
國別省市：山東;37
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