一種富含甾醇的熱帶假絲酵母的培養方法技術

本發明專利技術涉及一種富含甾醇的熱帶假絲酵母培養方法，具體方法為，首先配制以游離脂肪酸或脂肪為唯一碳源的培養基。將配制好的培養基進行高溫滅菌，冷卻后，接種熱帶假絲酵母進行通氣好氧發酵。發酵結束后，離心收集菌體，即獲得富含甾醇的熱帶假絲酵母細胞。所獲得的酵母細胞中甾醇含量可達到6.23％～7.12％，遠高于普通方法，所產生的甾醇以谷甾醇和菜油甾醇為主，同麥角甾醇相比，谷甾醇和菜油甾醇用途更加廣泛。

【技術實現步驟摘要】

【技術保護點】
一種富含甾醇的熱帶假絲酵母的培養方法，其特征是，包括以下步驟：a、種子培養基的配制及滅菌：按配比在1L水中，加入20～30g葡萄糖、10～20g蛋白胨、5～10g酵母粉,按照所述配比，將各種成分稱重后加入三角瓶中，室溫下攪拌均勻，制得種子培養基；用8層紗布密封后放入高壓滅菌鍋中，于115℃～121℃滅菌15～20min，滅菌后把三角瓶冷卻至室溫；b、種子液的制備：挑取熱帶假絲酵母的斜面保藏菌種2～3環，接種到步驟a中所述的種子培養基中，于30℃、180～200rpm搖床振蕩培養48h，備用；c、發酵培養基的配制及滅菌：于1L水中，加入40～50g游離脂肪酸或油脂(所述油脂為大豆油、花生油、菜籽油、棉籽油等)、1.0～2.0g酵母粉、0.1～0.2g硫酸鎂、0.1～0.2g磷酸氫二鉀、0.1～0.2g磷酸二氫鉀；按照所述配比，將各種成分稱重后加入機械攪拌式發酵罐中，室溫下攪拌均勻，并用0.5M氫氧化鈉溶液調節pH值6.8～7.0，制得發酵培養基；然后向發酵罐通入蒸汽開始滅菌，待罐溫上升到115℃～121℃，保溫30min，滅菌結束后，引入冷卻水將發酵培養基溫度降至25℃～30℃；d、發酵：將步驟b所述熱帶假絲酵母菌種子液以8％～10％接種量接種到步驟c所述發酵罐中的培養基之中，控制發酵溫度28℃～30℃，機械攪拌轉速220rpm～240rpm，通氣量1.0～1.2vvm，pH值6.8～7.0,發酵96～108h。e、離心、洗滌：將步驟d所述的發酵液放置于離心機中，5000～5500rpm離心15～20min，棄上層殘存的游離脂肪酸或油脂及清液，收集沉淀在離心機底部的菌泥(濕菌體)，按照1:50～1:80的比例加入50℃～60℃去離子水制成菌懸液，攪拌5～8min，然后再次進行離心，如此洗滌3次，得到熱帶假絲酵母濕菌體；f、干燥：將步驟e所述的熱帶假絲酵母濕菌體進行40℃～50℃冷風干燥，即獲得富含甾醇的熱帶假絲酵母干菌體。...

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：趙國群，劉金龍，
申請(專利權)人：河北科技大學，
類型：發明
國別省市：河北;13