一種豬苓硒化多糖的制備方法技術

本發明專利技術公開一種豬苓硒化多糖的制備方法，屬于中醫藥加工技術領域。該方法將豬苓粗多糖經木瓜蛋白酶水解、過氧化鋁純化柱純化得到精制豬苓純多糖，然后利用脫水吡啶為硒化反應的起始物，加入氧氯化硒，以氯化鋇為催化劑，硝酸鈉溶液為化學穩定劑，得到豬苓硒化多糖。本發明專利技術從豬苓粗多糖制備到硒化多糖的制備，操作快捷高效，產品純度高，硒化劑使用量較少、硒化反應時間較短、硒化多糖得率較高、穩定性高、生物學效價高。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術屬于中醫藥加工
，涉及一種砸化多糖的制備方法，具體地涉及一 種豬冬砸化多糖的制備方法。
技術介紹
[000引豬冬，俗稱"豬冬花"，在我國分布很廣。豬冬菌核是我國傳統的重要中藥之一，性 平，味甘、淡，利水滲濕，用于小便不利、水腫、泄瀉、帶下等?；瘜W成分含有類似巧冬多糖的 豬冬多糖、麥角醬醇、生物素等。近年研究表明，豬冬多糖是一種非特異性細胞免疫刺激劑， 能顯著加強網狀內皮系統吞瞻細胞的功能，是癌細胞的生長受到抑制；美國科學家做作了 大量研究，認為豬冬是一種抗艾滋病病毒的中藥。據有關預測，豬冬在未來幾年將會成為熱 點藥材之一。 豬冬多糖是豬冬的主要活性成分之一，具有很高的營養、醫療、保健價值，隨著人 民生活水平的提高和保健意識的增強，豬冬多糖產品開發和應用越來越多地受到人們的青 睞。 砸是人體必需的微量元素，而豬冬多糖又具有顯著的生物活性，從天然豬冬中提 取出的多糖含砸量很低砸，不能滿足人們的需求，通過人工將砸與豬冬多糖結合，更易于機 體吸收和利用，使砸和多糖的生理和藥理功能得到優化。 CN200910162003. 4公開了一種有機法制備砸化多糖的方法，該方法是W藤麻多 糖或沙嵩多糖為原料，利用亞砸酸和氯化亞諷合成的一種砸化試劑，制備砸化多糖的一種 方法。CN102276753B公開了一種豬冬砸多糖的制備方法，該方法利用HzSeOs、醋酸制成砸 化反應液，加入氯化頓為催化劑，制備砸化豬冬多糖。上述專利制備砸多糖的砸化劑使用量 較大，砸化反應時間較長，含砸量不高，制備的砸化豬冬多糖穩定性不高、生物學效價低。
技術實現思路
本專利技術所要解決的技術問題是針對現有技術的不足，提供一種豬冬砸化多糖的制 備方法，該方法砸化劑使用量較小、砸化反應時間較短、砸化多糖得率較高、穩定性高、生物 學效價高。 為了實現上述目的，本專利技術采用W下技術方案予W實現： -種豬冬砸化多糖的制備方法，包括W下步驟： (1)豬冬粗多糖制備 ①水提：選無雜質的干凈豬冬菌核，經微波干燥，粉碎機粉碎后，過40~60目篩， 加入20~40倍量的蒸傭水中，攬拌均勻，超聲處理5~lOmin，功率為600~700W，于抑 為中性、溫度為90~10(TC的條件下，浸提2. 5~3. 5h，過濾分離，得浸提濾液； ②濃縮醇析；將①的浸提濾液投入真空濃縮機中，濃縮為原體積的1/10~1/4,濃 縮液中加入無水己醇，使混合液中己醇濃度為70%~80%，靜置8~12h，離必分離，沉析物 干燥，制得豬冬粗多糖，備用； 口)豬冬粗多糖純化 ①除雜：將(1)-②所得豬冬粗多糖加入6~10倍量的蒸傭水中，離必10~20min， 除去少量不溶物；收集清液，邊攬拌邊向其中滴加料液量1. 5%~3%的2%躁酸溶液，煮沸 10~15min，除蛋白質；加入料液量1. 5%~3%的糖用脫色活性炭，攬勻，脫色10~15min， 趁熱過濾，得脫色液； ②酶解過柱；在45C~55C的條件下，向脫色液中加入脫色液量1. 5%~3%的 木瓜蛋白酶，酶解30~45min，迅速升溫至98°C滅酶，保溫10~15min，冷卻至室溫，離必 5~lOmin，除去變性酶，得清液；取清液加入2~4倍量的20 %~30 %己醇熱溶液中，通過 中性氧化鉛純化柱，檢測多糖洗脫峰，收集洗脫液，加入無水己醇，使混合液中己醇濃度為 70 %~80 %，靜置8~12h，離必分離，沉析物蒸發干燥，制得豬冬多糖純品，備用； 樹豬冬純多糖砸化 ①試劑合成；利用亞砸酸和氯化亞諷合成砸含量為2~4%的含砸試劑氧氯化 砸； ②砸化反應；定量稱取口)-②的豬冬純多糖若干克，加入脫水化巧3. 5~5. 5ml/ g，攬拌均勻，然后滴入氧氯化砸0. 8~1. 5ml/g，氯化頓0. 1~0. 3g/g，充分攬拌后加入質 量濃度3~4. 5 %的硝酸鋼溶液0. 5~0. 8ml/g，在常溫下，砸化反應8~lOh，再加入質量 濃度1~1. 5%的醋酸3~4. 5ml/g，攬拌4. 5~5.化，加入無水己醇，使混合液中己醇濃度 為70 %~80 %，靜置8~12h，離必分離，得沉析物； ⑨透析干燥：用蒸傭水溶解沉析物后，透析6~化；至透析液中無頓離子檢出，再 用無水己醇醇析透析液，沉淀離必，真空冷凍，用四氯化碳干燥，得粉末狀豬冬砸化多糖。 所述步驟(1)-①中，一種優選技術方案是：干凈豬冬粉碎成60目，加入30倍量的 蒸傭水中，攬拌均勻，超聲處理8min，功率為650W，于抑為中性、溫度為95C的條件下，浸提 化。 所述步驟(1)-②中，一種優選技術方案是；原液濃縮為原體積的1/5,加入無水己 醇，使混合液中己醇濃度為75%，靜置lOh。 所述步驟口)-①中，一種優選技術方案是：豬冬粗多糖加入8倍量的蒸傭水中，離 必15min ;收集清液，邊攬拌邊向其中滴加料液量2%的2%躁酸溶液，煮沸12min ;加入料 液量2%的糖用脫色活性炭，攬勻，脫色12min。 所述步驟口)-②中，一種優選技術方案是：在50°C的條件下，向脫色液中加入 2. 5%的木瓜蛋白酶，酶解40min，迅速升溫至98°C滅酶，保溫12min，冷卻至室溫，離必 8min;取清液加入3倍量的25%己醇熱溶液中，通過中性氧化鉛純化柱，檢測多糖洗脫峰， 收集洗脫液，加入無水己醇，使混合液中己醇濃度為75%，靜置lOh。 所述步驟口)-①中，一種優選技術方案是；合成砸含量為3 %的含砸試劑氧氯化 砸。 所述步驟口)-②中，一種優選技術方案是：定量稱取口)-②的豬冬純多糖若干克， 加入脫水化巧4. 5ml/g，攬拌均勻，然后滴入氧氯化砸Iml/g，氯化頓0. 2g/g，充分攬拌后加 入質量濃度4%的硝酸鋼溶液0. 6ml/g，在常溫下，砸化反應化，再加入質量濃度1. 2%的醋 酸4ml/g，攬拌化，加入無水己醇，使混合液中己醇濃度為75%，靜置lOh。所述步驟口)-⑨中，一種優選技術方案是；用蒸傭水溶解沉析物后透析化。 所述步驟口)-②中，脫水化巧為砸化反應的起始物，氯化頓為砸化反應的催化劑， 硝酸鋼溶液為豬冬砸化多糖的化學穩定劑。 本專利技術的有益效果是：與現有技術相比，本專利技術從豬冬粗多糖制備到砸化多糖的 制備，操作快捷高效，產品純度高，砸化劑使用量較少、砸化反應時間較短、砸化多糖得率較 高、穩定性高、生物學效價高?！揪唧w實施方式】 結合實施例及相應檢測結果進一步對本專利技術作闡述，不構成對本專利技術的限制。 實施例1 豬冬粗多糖制備；選無雜質的干凈豬冬菌核，稱取化g，經微波干燥，粉碎機粉碎 后，過40目篩，加入20L的蒸傭水中，攬拌均勻，超聲處理5min，功率為600W，于抑為中性、 溫度為9(TC的條件下，浸提2.化，過濾分離，將浸提濾液投入真空濃縮機中，濃縮為化，濃 縮液中加入4.化無水己醇，靜置化，離必分離，沉析物干燥，即得豬冬粗多糖312. 4邑。 豬冬粗多糖純化：將所得豬冬粗多糖加入1.化的蒸傭水中，離必lOmin，收集清 液，邊攬拌邊向其中滴加2%躁酸溶液28. 5ml，煮沸lOmin，加入28. 5g的糖用脫色活性炭， 攬勻，脫色lOmin，趁熱過濾，在45C的條件下，向脫色液中加入28. 5g的木瓜蛋白酶，酶解 30min,迅速升溫至98°C本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種豬苓硒化多糖的制備方法，其特征在于：包括以下步驟：⑴豬苓粗多糖制備①水提：選無雜質的干凈豬苓菌核，經微波干燥，粉碎機粉碎后，過40～60目篩，加入20～40倍量的蒸餾水中，攪拌均勻，超聲處理5～10min，功率為600～700W，于pH為中性、溫度為90～100℃的條件下，浸提2.5～3.5h，過濾分離，得浸提濾液；②濃縮醇析：將①的浸提濾液投入真空濃縮機中，濃縮為原體積的1/10～1/4，濃縮液中加入無水乙醇，使混合液中乙醇濃度為70％～80％，靜置8～12h，離心分離，沉析物干燥，制得豬苓粗多糖，備用；⑵豬苓粗多糖純化①除雜：將⑴?②所得豬苓粗多糖加入6～10倍量的蒸餾水中，離心10～20min，除去少量不溶物；收集清液，邊攪拌邊向其中滴加料液量1.5％～3％的2％鞣酸溶液，煮沸10～15min，除蛋白質；加入料液量1.5％～3％的糖用脫色活性炭，攪勻，脫色10～15min，趁熱過濾，得脫色液；②酶解過柱：在45℃～55℃的條件下，向脫色液中加入脫色液量1.5％～3％的木瓜蛋白酶，酶解30～45min，迅速升溫至98℃滅酶，保溫10～15min，冷卻至室溫，離心5～10min，除去變性酶，得清液；取清液加入2～4倍量的20％～30％乙醇熱溶液中，通過中性氧化鋁純化柱，檢測多糖洗脫峰，收集洗脫液，加入無水乙醇，使混合液中乙醇濃度為70％～80％，靜置8～12h，離心分離，沉析物蒸發干燥，制得豬苓多糖純品，備用；⑶豬苓純多糖硒化①試劑合成：利用亞硒酸和氯化亞砜合成硒含量為2～4％的含硒試劑氧氯化硒；②硒化反應：定量稱?、?②的豬苓純多糖若干克，加入脫水吡啶3.5～5.5ml/g，攪拌均勻，然后滴入氧氯化硒0.8～1.5ml/g，氯化鋇0.1～0.3g/g，充分攪拌后加入質量濃度3～4.5％的硝酸鈉溶液0.5～0.8ml/g，在常溫下，硒化反應8～10h，再加入質量濃度1～1.5％的醋酸3～4.5ml/g，攪拌4.5～5.5h，加入無水乙醇，使混合液中乙醇濃度為70％～80％，靜置8～12h，離心分離，得沉析物；③透析干燥:用蒸餾水溶解沉析物后，透析6～8h；至透析液中無鋇離子檢出，再用無水乙醇醇析透析液，沉淀離心，真空冷凍，用四氯化碳干燥，得粉末狀豬苓硒化多糖。...

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：劉瑛，
申請(專利權)人：劉瑛，
類型：發明
國別省市：甘肅;62