具有防控土傳植物病害功能的生物有機肥的制備方法，包括堆肥發酵的步驟，所述堆肥原料中接種地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、熱球狀尿素芽孢桿菌和蘇云金芽孢桿菌四種拮抗菌的混合菌液；堆肥發酵結束后，向發酵產物中添加聚γ谷氨酸。本發明專利技術所制備得到的生物有機肥對植物土傳真菌疾病具有顯著的防控效果。本發明專利技術產品的生產工藝簡單，原料來源廣泛，生產成本低，適合大規模生產具有防控土傳植物病害功能的生物有機肥。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及一種具有防控土傳植物病害功能的生物有機肥及其制備方法，屬于農業生物
技術介紹
隨著我國養殖業與種植業分離，沒有足夠的農田來消納規模化、集約化養殖業所產生大量的養殖業廢棄物，對生態環境造成嚴重影響。而農田的化學肥料施用量逐年遞增，對作物產量的貢獻瓶頸日益凸顯。我國農業生產施肥特點為偏施化肥，化學肥料的大量長期施用使得農作物品質降低，引起土壤板結、有機質下降、土壤及作物根系微生態結構被破壞，更是導致了土傳植物病害泛濫的。常見的土傳植物病害有小麥和水稻的紋枯病、玉米的絲黑穗病和大豆疫病以及瓜豆的枯萎病和灰霉病等。當前的病害防控主要依靠化學防控，但是長期施用化學藥劑亦會造成藥劑殘留和環境污染等問題；在農業常規管理中，植物病菌可在土壤中存在數年之久，病害爆發時輪作手段大受局限，嫁接等方式更是大大提高了防控成本。因此，結合抗病品種的選育及具備拮抗功能的有益菌的生物防控等防控方法將是未來土傳植物病害的防控趨勢。生物有機肥的使用能夠改良土壤、提高作物品質并能通過增強作物抗病性、利用微生物多樣性抑制病原菌等防控控制土傳植物病害，而且可以為拮抗菌提供營養，通過拮抗菌自身及其代謝產物對病原菌的抑制達到很好的防治效果。其中，許多芽孢桿菌產生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短桿菌肽等活性物質對多種致病菌有明顯的抑制作用。生物有機肥與拮抗菌的綜合利用是植物病害防控的可持續手段。
技術實現思路
r>本專利技術的目的之一，首先在于提供一種具有防控土傳植物病害功能的生物有機肥的制備方法。所述方法包括堆肥發酵的步驟，堆肥原料中接種地衣芽孢桿菌(ABTNL-1,Baclicuslincheniformis)、枯草芽孢桿菌(ABTNL-2,Bacillussubtilis)、熱球狀尿素芽孢桿菌(ABTNL-3,Ureibacillusthermosphaericus)和蘇云金芽孢桿菌(ABTNL-4,Bacillusthuringiensis)四種拮抗菌的混合菌液；堆肥發酵結束后，向堆肥發酵產物中添加聚γ谷氨酸。本專利技術的另一目的，在于提供由上述本專利技術的方法所制備的具有防控土傳植物病害功能的生物有機肥。通過本專利技術的上述方法所制備的有機肥其有效活菌數>5×108CFUg-1，有機質含量>45％，含水率為15～30％。再一方面，本專利技術旨在提供一種防控土傳植物病害的方法，所述方法是使用上文所述的本專利技術的具有防控土傳植物病害功能的生物有機肥。本專利技術所述的生物有機肥的制備方法選配四種拮抗菌參與堆肥發酵過程，這些菌能夠對土傳植物病原菌有競爭營養拮抗作用、并且在發酵過程中能產生多種對土傳植物病原菌有明顯的抑制作用的代謝產物，所制備的生物有機肥對小麥紋枯病、甜瓜灰霉病、玉米絲黑穗病、大豆疫病、黃瓜枯萎病等多種土傳植物病原菌有明顯的抑制作用，可用于防控植物病害，減少農藥施用，促進生物原料的可持續利用。同時，本專利技術利所制備的生物有機肥可提高土壤肥力，有利于土壤形成團粒結構從而改良土壤性狀，促進植物種子萌發及生長，增強植物抗逆能力，改善產品品質，使產品達到綠色或有機標準。具體實施方式如無特殊說明，本專利技術中所涉及的生物材料樣品包括：ABTNL-1：地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis)，CGMCCNO.10037。ABTNL-2：枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)，CGMCCNO.10038。ABTNL-3：熱球狀尿素芽孢桿菌(Ureibacillusthermosphaericus)，CGMCCNO.10039。ABTNL-4：蘇云金芽孢桿菌(Bacillusthuringiensis)，CGMCCNO.10036。本專利技術首先提供一種具有防控土傳植物病害功能的生物有機肥的制備方法。所述方法包括堆肥發酵的步驟，堆肥原料中接種四種拮抗菌的混合菌液；堆肥發酵結束后，向堆肥發酵產物中添加聚γ谷氨酸。所述的四種拮抗菌分別是：地衣芽孢桿菌(ABTNL-1,Baclicuslincheniformis)、枯草芽孢桿菌(ABTNL-2,Bacillussubtilis)、熱球狀尿素芽孢桿菌(ABTNL-3,Ureibacillusthermosphaericus)和蘇云金芽孢桿菌(ABTNL-4,Bacillusthuringiensis)。具體實施方式中，所述的混合菌液通過以下方法制備：以預培養基分別活化培養四種拮抗菌，獲得菌體濃度均為108～109CFU·ml-1的預培養物；然后按等體積比例混合所得的四種拮抗菌的預培養物；所述的預培養基以蒸餾水配制，含氯化鈉10.0g·L-1、胰蛋白胨10.0g·L-1和酵母粉5.0g·L-1，經121℃滅菌20分鐘所得。上述生物有機肥的制備方法中，所述堆肥原料中混合菌液的接種比例為0.01～0.05L·kg-1(每公斤堆肥原料中所接種的混合菌液的體積)。其中，尤其優選0.03L·kg-1。優選的具體實施方式中，所述的生物有機肥的制備方法中還包括向堆肥發酵產物中按照0.08～0.12L·kg-1的比例添加混合菌液的步驟。上述生物有機肥的制備方法中，所述的聚γ谷氨酸優選以蒸餾水預配為200mg·L-1的聚γ谷氨酸溶液，添加量為0.03～0.05L·kg-1(每公斤發酵產物中所添加的聚γ谷氨酸-蒸餾水溶液的體積)。另一具體實施方式中，本專利技術優選堆肥原料是動物糞便與植物殘體按質量比3～4.5:1～1.5的混合物，含水率為55～65％。尤為優選地，所述動物糞便選自豬糞、雞糞、牛糞或其混合物，含水率為70～80％(質量比率)；植物殘體選自枯草、樹枝、秸稈或其混合物，含水率為5～10％(質量比率)。再一具體的實施方式中，所述的堆肥發酵的條件控制包括:在堆肥容器中分層放置堆肥原料，并均勻潑灑混合菌液后充分混合后進行好氧發酵；隨發酵進行，堆體溫度上升，當堆體溫度達到45℃時即進入高溫期，每五天翻堆一次并補充水分；堆體溫度達到60℃以上并維持5-7天；隨后溫度開始緩慢下降，當堆料溫度接近室溫時結束發酵。更為具體的實施方式中，本專利技術所述的生物有機肥的制備方法包括如下步驟：(1)制備堆肥原料：將動物糞便與植物殘體粉碎后，按質量比3～4.5:1～1.5的混合，控制混合物含水率為55～65％，得堆肥原料；其中動物糞便優選含水率為70～80％的豬糞、雞糞、牛糞或其混合物；植物殘體優選含水率為5～10％的枯草、樹枝、秸稈或其混合物；兩類原料粉碎本文檔來自技高網...
【技術保護點】
具有防控土傳植物病害功能的生物有機肥的制備方法，包括堆肥發酵的步驟，其特征在于，堆肥原料中接種地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、熱球狀尿素芽孢桿菌和蘇云金芽孢桿菌四種拮抗菌的混合菌液；堆肥發酵結束后，向堆肥發酵產物中添加聚γ谷氨酸。
【技術特征摘要】
1.具有防控土傳植物病害功能的生物有機肥的制備方法，包括堆肥發酵的
步驟，其特征在于，堆肥原料中接種地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、熱球狀尿素
芽孢桿菌和蘇云金芽孢桿菌四種拮抗菌的混合菌液；堆肥發酵結束后，向堆肥發
酵產物中添加聚γ谷氨酸。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的混合菌液通過以下方
法制備：以預培養基分別活化培養四種拮抗菌，獲得菌體濃度均為108～109CFU·ml-1的預培養物；然后按等體積比例混合所得的四種拮抗菌的預培養物；
所述的預培養基以蒸餾水配制，含氯化鈉10.0g·L-1、胰蛋白胨10.0g·L-1和
酵母粉5.0g·L-1，經121℃滅菌20分鐘所得。
3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，所述的堆肥原料中混合菌液
的接種比例為0.01～0.05L·kg-1。
4.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，還包括向堆肥發酵產物中按
照0.08～0.12L·kg-1的比例添加混合菌液的步驟。
5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的聚γ谷氨酸預配為200
mg·L-1的聚γ谷氨酸溶液，添加量為0.03～0.05L·kg-1。
6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的堆肥原料是動物糞便
與植物殘體按質量比3～4.5:1～1.5的混合物，含水率為55～65％。
7.根據權利要求1所述的方法，包括如下步驟：
(1)制備堆肥原料：將動物糞便與植物殘體粉碎后，按質量比3～...
【專利技術屬性】
技術研發人員：徐永平，王佳寧，續彥龍，龔改林，王麗麗，李曉宇，
申請(專利權)人：大連理工大學，
類型：發明
國別省市：遼寧;21
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