含有CpG寡核苷酸的藥物組合物制造技術

本發明專利技術提供一種用于誘導受治者體內的免疫反應的藥物組合物，其包含：(a)1μg/ml-100μg/ml抗原，(b)25μg/ml-500μg/ml含有序列5’-tcgacgttcgtcgttcgtcgttc-3’的CpG寡核苷酸，和(c)25μg/ml-500μg/ml鋁佐劑。該藥物組合物可誘導或增強受治者體內針對抗原的免疫反應。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術總體上涉及一種含有CpG寡核苷酸的藥物組合物，具體而言，本專利技術涉及 基于CpG寡核苷酸與鋁佐劑的協同作用的用于加強針對抗原的免疫反應的藥物組合物。
技術介紹
乙型肝炎病毒（HBV)是危害公眾健康的全球性重大問題，使用疫苗能有效預防 HBV感染，降低慢性肝炎攜帶率，控制乙肝流行。據WT0報道，自1982年以來，全世界已經使 用了 10億劑量的乙型肝炎病毒疫苗，對預防和控制乙型肝炎病毒的傳播起到了非常重要 的作用。由于HBV采用的是易出錯的基于RNA的復制，從而導致乙肝表面抗原（HBsAg)改變 的HBV抗性逃避突變株的出現。目前市場上預防用乙型肝炎疫苗均用氫氧化鋁（A1(0H)3) 作為佐劑，其能夠增強Th2類免疫應答和體液免疫，可以誘導機體產生和分泌保護性抗體 IgGl，氫氧化鋁起貯藏作用且推遲抗原清除的時間，延長抗原暴露于免疫系統的時間；同時 活化補體，提高淋巴結誘捕能力和淋巴細胞的滯留時間；吸附抗原并轉運抗原至淋巴結，產 生免疫應答；包裹抗原并緩慢地釋放，起到抗原倉庫的作用。但近年隨著疫苗學及免疫學的 發展，已發現其局限性：氫氧化鋁主要刺激Th2相關抗體的產生（包括IgE)，但不能誘導產 生Thl細胞免疫反應，不能刺激Thl活性，也不能加強細胞免疫（CTL)，阻斷CD8+CTL的激 活。這種抗體雖能中和掉細胞外的病毒，但不能徹底清除掉潛伏在感染細胞中的乙型肝炎 病毒，往往導致患者體內乙型肝炎病毒的藏匿。而且人群中有10%左右的人對該疫苗反應 力低下或無反應。如何提高現有乙型肝炎病毒疫苗的免疫活性或研制出能有效激發清除藏 匿于細胞中的乙型肝炎病毒的疫苗尤為重要。
技術實現思路
本專利技術的目的之一在于提供一種用于誘導受治者體內的免疫反應的藥物 組合物，其包含：（a) 1iig/ml-100iig/ml抗原，（b) 25iig/ml-500iig/ml含有序列 5' -tcgacgttcgtcgttcgtcgttc-3' 的CpG寡核苷酸，和（c)25iig/ml-500iig/ml錯佐劑。 在本專利技術的一種實施方式中，所述CpG寡核苷酸的序列為 5' -tcgacgttcgtcgttcgtcgttc-3'，所述錯佐劑為氫氧化錯，所述抗原為與病毒相關的抗 原；優選地，所述病毒選自：肝炎病毒，例如，重組人乙型肝炎病毒，所述抗原為乙肝表面抗 原。 在本專利技術的藥物組合物中，所述鋁佐劑的濃度為：25iig/ml_125iig/ml，或 125ug/ml-500ug/ml，或 125ug/ml-400ug/ml，或 125ug/ml-300ug/ml，或 250ug/ ml-500ug/ml，或 300ug/ml-400ug/ml，或 400ug/ml-500ug/ml，或 300ug/ml-500ug/ ml。所述含有序列 5'-tcgacgttcgtcgttcgtcgttc-3' 的CpG寡核苷酸（CpG-ODN)的濃度 為：125ug/ml-500ug/ml，或 25ug/ml-125ug/ml，或 125ug/ml-250ug/ml，或 250ug/ ml-500iig/ml。所述抗原的濃度為：20iig/mL。 根據本專利技術的優選實施方式，本專利技術的藥物組合物中，所述抗原的濃度為：20ii g/ ml，所述鋁佐劑的濃度為：250ii g/ml-500ii g/ml或300ii g/ml-500ii g/ml，所述CpG-ODN的 濃度為：125 ii g/ml-500 ii g/ml。 在本專利技術更為優選的實施方式中，所述抗原的濃度為：20ii g/ml，所述鋁佐劑的濃 度為：125 y g/ml、250 y g/ml、300 y g/ml、400 y g/ml或00 y g/ml，所述CpG-〇DN的濃度為： 125 u g/ml、250 u g/ml或500 u g/ml。 在本專利技術尤為優選的實施方式中，所述抗原的濃度為20 ii g/ml，所述鋁佐劑的濃 度為25 ii g/ml，所述CpG-ODN的濃度為500 ii g/ml ;或者所述抗原的濃度為20 ii g/ml，所 述鋁佐劑的濃度為25 ii g/ml，所述CpG-ODN的濃度為125 ii g/ml;或者所述抗原的濃度為 20 ii g/ml，所述鋁佐劑的濃度為125 ii g/ml，所述CpG-ODN的濃度為25 ii g/ml;或者所述抗 原的濃度為20 ii g/ml，所述鋁佐劑的濃度為300 ii g/ml，所述CpG-〇DN的濃度為125 ii g/ ml;或者所述抗原的濃度為20 ii g/ml，所述鋁佐劑的濃度為400 ii g/ml，所述CpG-〇DN的濃 度為125ii g/ml;或者所述抗原的濃度為20ii g/ml，所述鋁佐劑的濃度為125ii g/ml，所述 CpG-〇DN的濃度為500 y g/ml。 本專利技術的藥物組合物還包含藥學上可接受的賦形劑，所述賦形劑選自：溶劑、分散 介質、包被劑、表面活性劑、抗氧化劑、防腐劑（例如，抗菌劑、抗真菌劑），等滲劑、延遲吸收 劑、鹽、藥物穩定劑、粘合劑、崩解劑、潤滑劑、甜味劑、調味劑、顏料，以及它們的組合或類似 物。 本專利技術的另一目的在于提供本專利技術的藥物組合物在制備用于誘導受治者體內針 對抗原的免疫反應的藥物中的應用。通過使用藥物領域常用的賦形劑可將本專利技術的藥物組 合物配制為用于腸胃外給藥的劑型，例如，注射劑型；用于口服給藥的劑型，例如，片劑、藥 丸、膠囊、凝膠、糖漿、漿狀物和懸浮液，或用于透皮給藥的劑型，或者其他本領域常用的劑 型。在本專利技術的一種實施方式中，通過本專利技術的藥物組合物配制的用于誘導受治者體內針 對抗原的免疫反應的藥物可為乙肝疫苗或丙肝疫苗，可選地，通過本專利技術的藥物組合物配 制的用于誘導受治者體內針對抗原的免疫反應的藥物為基因工程乙肝疫苗，包括重組酵母 乙肝疫苗和重組CH0乙肝疫苗。 本專利技術的又一目的在于提供一種誘導受治者體內針對抗原的免疫反應的方法，所 述方法包括：將有效量的本專利技術的藥物組合物給藥于所述受治者。所述方法還可包括將有 效量的本專利技術的藥物組合物再次給藥于所述受治者。其中，所述再次給藥的時間間隔為2 周至12周。在本專利技術的一種實施方式中，所述再次給藥的時間間隔為4周。通過向受治者 給藥兩次本專利技術的藥物組合物即可誘導受治者體內針對抗原的免疫反應，產生保護性抗體 應答水平，這相對于目前給藥三次來誘導免疫反應的方法而言，減少了給藥次數，縮短了誘 導受治者體內的免疫反應的全程免疫時間。【附圖說明】 圖1表示聯合使用不同濃度的CpG和不同濃度的鋁佐劑誘導HBsAg產生IgG的總 量的變化； 圖2表示使用不同濃度的CpG和不同濃度的鋁佐劑聯合誘導HBsAg產生IgG2a亞 型的量的變化； 圖3表示使用不同濃度的CpG和不同濃度的鋁佐劑聯合誘導HBsAg產生IgG2a與 IgGl的比值的變化； 圖4表示使用不同濃度的CpG和不同濃度的鋁佐劑聯合在小鼠體內誘導HBsAg產 生抗-HBs抗體滴度的變化； 圖5表示使用不同濃度的CpG和不同濃度的鋁佐劑聯合在小鼠體內誘導IFN-Y 產生的量的變化。【具體實施方式】 以下將結合實施例對本專利技術涉及的本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種用于誘導受治者體內的免疫反應的藥物組合物，其包含：(a)1μg/ml?100μg/ml抗原，(b)25μg/ml?500μg/ml含有序列5’?tcgacgttcgtcgttcgtcgttc?3’的CpG寡核苷酸，和(c)25μg/ml?500μg/ml鋁佐劑。

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：王立公，錢大鵬，
申請(專利權)人：長春華普生物技術有限公司，
類型：發明
國別省市：吉林;22