B-細胞CLL/淋巴瘤11A(BCL11A)的寡核苷酸調節劑及其用途制造技術

本發明專利技術提供B細胞淋巴瘤/白血病11A(BCL11A)的寡核苷酸調節劑(例如，抑制劑)和基于這樣的調節劑治療BCL11A-相關疾病、病癥或病況的改善的方法和組合物，以及其它事物。

【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】【專利說明】B-細胞CLL/淋巴瘤11A(BCL11A)的寡核苷酸調節劑及其 用途 背景 血紅蛋白病是與血紅蛋白機能障礙相關的疾病。通常，這些疾病涉及血紅蛋白的 缺失或出現功能障礙的血紅蛋白，其源自球蛋白基因（例如，α，β，等；圖1)的遺傳突變。 血紅蛋白病是一組廣譜的紅血細胞相關病癥，特征為在多數情況下為常染色體顯性遺傳的 單基因遺傳病癥。據估計，約7%的世界人口是攜帶者。遺傳的血紅蛋白病以三種形式之一 顯現：地中海貧血（α，β，δ)、鐮狀細胞病和遺傳性胎兒血紅蛋白持續存在癥（HbF)。鐮 狀細胞病（SCD)和β-地中海貧血是血紅蛋白病的最常見形式并且是世界范圍內發病和死 亡的主要原因。SCD，如名稱暗示的，涉及由突變形成的球蛋白結構的改變并且導致出現功 能障礙的血紅蛋白，而地中海貧血與導致正常球蛋白生產不足的球蛋白基因突變相關。這 可以經由調節蛋白的突變發生。貧血，在一些情況下是血紅蛋白機能障礙的常見結果。 隨時間，已經開發了血紅蛋白病的各種治療。主要焦點通常是在恢復血紅蛋白功 能，例如，通過增加胎兒血紅蛋白（HbF)的水平。然而，尚未成功開發出很多有效的治療。近 來，關于調節HbF的機制的理解已經成為很多研究的領域。據報道，BCL11A在骨髓中成人 紅細胞前體細胞中表達并行使功能，以抑制y-球蛋白產生（Sankaran等人2008Science 第 322 卷，第 1839-1842 頁）。W0 2010/030963描述了使用針對4條靶序列的siRNA樣品池（pool)調節BCL11A。 關于個體靶序列是否能夠下調BCL11A，沒有表明。W0 2012/079046描述了靶向BCL11A基因的雙鏈核糖核酸（dsRNA)組合物。 概述 本專利技術提供BCL11A的反義寡核苷酸調節劑（例如，抑制劑）和基于這樣的調節劑 治療BCL11A-相關疾病、病癥或病況的方法和組合物，以及其它事項。考慮到的是，本專利技術 提供的反義寡核苷酸對于治療血紅蛋白病、如鐮狀細胞病和β-地中海貧血特別有用。 在一個方面，本專利技術提供一種能夠下調或減少人BCL11A表達的反義寡核苷酸，其 具有與選自SEQIDNO1的人BCL11A基因或BCL11A的信使RNA(mRNA)同種型的核苷酸410 至450的區域內的連續序列的反向互補物至少80% (例如至少約85%，90%，95%，96%， 97%，98%，或99% )相同的序列，其中所述反義寡核苷酸是gapmer。在一些實施方案中， 本專利技術的反義寡核苷酸長度小于19個核苷酸。在一些實施方案中，本專利技術的反義寡核苷酸 長度小于18個核苷酸。 在一個方面，本專利技術提供一種能夠下調或減少人BCL11A的表達的反義寡核苷酸， 其具有小于18個核苷酸（例如，小于17,16,15,14,13,或12)的長度并且具有與選自SEQ IDNO1的人BCL11A基因或BCL11A的信使RNA(mRNA)同種型的核苷酸410至450的區域 內的連續序列的反向互補物至少約80% (例如，至少約85%，90%，95%，96%，97%，98%， 或99% )相同的序列。 在一個方面，本專利技術提供一種能夠下調或減少人BCL11A表達的反義寡核苷酸，所 述反義寡核苷酸具有與選自SEQIDNO1的人BCL11A基因或BCL11A的信使RNA(mRNA) 同種型的核苷酸410至450的區域內的連續序列的反向互補物至少約80% (例如，至少約 85%，90%，95%，96%，97%，98%，或99%)相同的序列并且由式乂3^,表示，其中父是 核苷酸類似物；Y是連續的DNA序列；a是1，2,3,4或5 ;a'是1，2,3,4或5 ;并且b是5和 15之間的整數。在一些實施方案中，所述核苷酸類似物是鎖定核酸（LNA)。 在一些實施方案中，a和V不同。在一些實施方案中，a和V相同。在一些實 施方案中，a和/或V是1。在一些實施方案中，a和/或V是2。在一些實施方案中，a 和/或V是3。在一些實施方案中，a和/或V是4。在一些實施方案中，a和/或V 是5。 在一些實施方案中，b是包括5和15之間的整數。在一些實施方案中，b是包括5 至10的整數。在一些實施方案中，b是包括7至11的整數。在一些實施方案中，b是選自 由以下各項組成的組的整數：5,6, 7,8,9,10,11，12,13,14和15。在一些實施方案中，BCL11A的同種型選自由以下各項組成的組：XL，L，M，S和XS或其同源物或直向同源物。在一些實施方案中，本專利技術的反義寡核苷酸能夠下調或減少小 鼠BCL11A基因的表達。在一些實施方案中，本專利技術的反義寡核苷酸包含或含有至少一個，至少兩個，至少 三個，至少四個，至少五個，至少六個，至少七個，至少八個或更多個核苷類似物。在一些實 施方案中，本專利技術的反義寡核苷酸包含3-8個核苷酸類似物，例如6或7個核苷酸類似物。 在一些實施方案中，至少一個所述核苷酸類似物是鎖定核酸（LNA);例如至少3或至少4,或 至少5,或至少6,或至少7,或8個核苷酸類似物可以是LNA。在一些實施方案中，所有的核 苷酸類似物可以是LNA。在一些實施方案中，本專利技術的寡核苷酸包含或含有至少一個，至少兩個，至少三 個，至少四個，至少五個，至少六個，至少七個，至少八個或更多個LNA單元。在一些實施方 案中，所述一個或多個LNA單元位于反義寡核苷酸的5'和/或'3末端。在一些實施方案 中，本專利技術的反義寡核苷酸在5'和/或'3末端包含至少一個，至少兩個或至少三個LNA單 元。在一些實施方案中，本專利技術的反義寡核苷酸在內部包含至少一個，至少兩個或至少三個 LNA單元。在一些實施方案中，所述一個或多個LNA單元是β-D-氧基-LNA核苷酸。在一些 實施方案中，本專利技術的反義寡核苷酸包含一種以上另外的化學修飾。在一些實施方案中，本 專利技術的反義寡核苷酸包含一種以上另外的化學修飾，所述化學修飾包括2'0_甲基修飾和/ 或硫代磷酸酯鍵。在一些實施方案中，本專利技術的反義寡核苷酸包含至少一個LNA單元，所述 LNA單元是LNA5-甲基胞嘧啶核苷酸。 在一些實施方案中，本專利技術的反義寡核苷酸具有10-17,10-16,10-15,10-14， 10-13,10-12,11-17,11-16,11-15,11-14,11-13,12-17,12-16,12-15,或 12-14 個核苷酸 的長度。在一些實施方案中，本專利技術的反義寡核苷酸具有12-16個核苷酸的長度。在一些實施方案中，本專利技術的反義寡核苷酸具有與選自SEQIDNO1的人BCL11A基因或人BCL11A的信使RNA(mRNA)同種型的核苷酸410至450的區域內的連續序列的反 向互補相同的序列。本專利技術的一個備選方面是一種能夠減少人BCL11A表達的反義寡核苷酸，所述反 義寡核苷酸包含與選自人BCL11A基因的核苷酸1-283 (外顯子1)，核苷酸284-613 (外顯 子2)，或核苷酸614-715 (外顯子3)的區域內的連續序列的反向互補物至少80%相同的序 列。 在一些實施方案中，根據本專利技術的連續序列在人BCL11AmRNA同種型XL的核苷酸 410-450 內。 在一些實施方案中，根據本專利技術的連續序列在人BCL11A本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種能夠減少人BCL11A表達的反義寡核苷酸，所述反義寡核苷酸包含與選自SEQ?ID?NO?1的人BCL11A基因或BCL11A的信使RNA(mRNA)同種型的核苷酸410至450的區域內連續序列的反向互補物至少80％相同的序列，其中所述反義寡核苷酸是gapmer。

【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】...

【專利技術屬性】
技術研發人員：馬伊·黑特耶恩，尼爾斯·菲斯克爾·尼爾森，
申請(專利權)人：羅氏創新中心哥本哈根有限公司，
類型：發明
國別省市：丹麥;DK