基因突變體及其應用制造技術

提供了分離的核酸、分離的多肽、篩選易感青年人中的成年發病型糖尿病的生物樣品的方法、篩選易感青年人中的成年發病型糖尿病的生物樣品的系統以及用于篩選易感青年人中的成年發病型糖尿病的生物樣品的試劑盒。其中，該分離的核酸，與SEQ?ID?NO：1相比具有c.703C>T突變，或者與SEQ?ID?NO：3相比具有選自下列的至少一種突變：c.338G>T和c.358A>G。

【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】基因突變體及其應用優先權信息無
本專利技術涉及基因突變體及其應用。具體地，本專利技術涉及分離的核酸、分離的多肽、篩選易感青年人中的成年發病型糖尿病的生物樣品的方法、篩選易感青年人中的成年發病型糖尿病的生物樣品的系統以及用于篩選易感青年人中的成年發病型糖尿病的生物樣品的試劑盒。
技術介紹
青年人中的成年發病型糖尿病(maturityonsetdiabetesoftheyoung，MODY)，是一組具有高度遺傳及臨床表型異質性的單基因疾病。1975年由Fajans和Tattersall依據1950年以來系列報道分析并命名，并總結其以下臨床特征：(1)累及3代或以上家族成員，呈常染色體顯性遺傳，而與人類白細胞抗原(HLA)無關；(2)家族中一般有2個以上患者在25歲以前發病；(3)外顯率高，可超過90％；(4)病程進展緩慢，在青年期可以無癥狀或僅表現為糖耐量減低；(5)一般無酮癥酸中毒，至少在發病2年內不依賴胰島素治療。現階段，尋找致病基因對疾病診斷或治療意義重大。雖然目前已發現一些青年人中的成年發病型糖尿病的致病基因，例如GCK、HNF1A、HNF4A、HNF1B基因，但仍存在著相當一部分未知致病基因位點。因而，目前對青年人中的成年發病型糖尿病的研究仍有待深入。
技術實現思路
本專利技術旨在至少解決現有技術中存在的技術問題之一。為此，本專利技術的一個目的在于提出一種能夠有效篩選易感青年人中的成年發病型糖尿病的生物樣品的方法。本專利技術是基于專利技術人的下列工作而完成的：專利技術人通過高通量外顯子組測序聯合候選基因突變驗證的方法確定了青年人中的成年發病型糖尿病的致病基因上的新突變。根據本專利技術的第一方面，本專利技術提出了一種分離的核酸。根據本專利技術的實施例，與SEQIDNO：1相比，該核酸具有c.703C＞T突變；或者與SEQIDNO：3相比，該核酸具有選自下列的至少一種突變：c.338G＞T和c.358A＞G。根據本專利技術的實施例，專利技術人確定了HNF1B和HNF1A基因突變體，這些新突變體與青年人中的成年發病型糖尿病的發病密切相關，從而通過檢測這些新突變體在生物樣品中是否存在，可以有效地檢測生物樣品是否易感青年人中的成年發病型糖尿病。根據本專利技術的第二方面，本專利技術提出了一種分離的多肽。根據本專利技術的實施例，與SEQIDNO：2相比，該分離的多肽具有p.Arg235Trp突變；或者與SEQIDNO：4相比，該分離的多肽具有選自下列的至少一種突變：p.Trp113Leu和p.Lys120Glu。通過檢測生物樣品中是否表達該多肽，可以有效地檢測生物樣品是否易感青年人中的成年發病型糖尿病。根據本專利技術的第三方面，本專利技術提出了一種篩選易感青年人中的成年發病型糖尿病的生物樣品的方法。根據本專利技術的實施例，該方法包括以下步驟：從生物樣品提取核酸樣本；確定所述核酸樣本的核酸序列；所述核酸樣本的核酸序列或其互補序列，與SEQIDNO：1相比具有選自c.703C＞T突變，或者與SEQIDNO：3相比具有選自c.338G＞T和c.358A＞G的至少一種突變，是所述生物樣品易感青年人中的成年發病型糖尿病的指示。通過根據本專利技術實施例的篩選易感青年人中的成年發病型糖尿病的生物樣品的方法，可以有效地篩選易感青年人中的成年發病型糖尿病的生物樣品。根據本專利技術的第四方面，本專利技術提出了一種篩選易感青年人中的成年發病型糖尿病的生物樣品的系統。根據本專利技術的實施例，該系統包括：核酸提取裝置，所述核酸提取裝置用于從所述生物樣品提取核酸樣本；核酸序列確定裝置，所述核酸序列確定裝置與所述核酸提取裝置相連，用于對所述核酸樣本進行分析，以便確定所述核酸樣本的核酸序列；判斷裝置，所述判斷裝置與所述核酸序列確定裝置相連，以便基于所述核酸樣本的核酸序列或其互補序列，與SEQIDNO：1相比具有c.703C＞T突變，或者與SEQIDNO：3相比具有選自c.338G＞T和c.358A＞G的至少一種突變，判斷所述生物樣品是否易感青年人中的成年發病型糖尿病。利用該系統，能夠有效地實施前述篩選易感青年人中的成年發病型糖尿病的生物樣品的方法，從而可以有效地篩選易感青年人中的成年發病型糖尿病的生物樣品。根據本專利技術的第五方面，本專利技術提出了一種用于篩選易感青年人中的成年發病型糖尿病的生物樣品的試劑盒。根據本專利技術的實施例，該試劑盒含有：適于檢測HNF1B和HNF1A基因突變體的至少一種的試劑，其中與SEQIDNO：1相比，所述HNF1B基因突變體具有c.703C＞T突變；與SEQIDNO：3相比，所述HNF1A基因突變體具有選自下列的至少一種突變：c.338G＞T和c.358A＞G。利用根據本專利技術的實施例的試劑盒，能夠有效地篩選易感青年人中的成年發病型糖尿病的生物樣品。本專利技術的附加方面和優點將在下面的描述中部分給出，部分將從下面的描述中變得明顯，或通過本專利技術的實踐了解到。附圖說明本專利技術的上述和/或附加的方面和優點從結合下面附圖對實施例的描述中將變得明顯和容易理解，其中：圖1：顯示了根據本專利技術一個實施例的篩選易感青年人中的成年發病型糖尿病的生物樣品的系統及其組成部分的示意圖，其中，A為根據本專利技術實施例的篩選易感青年人中的成年發病型糖尿病的生物樣品的系統的示意圖，B為根據本專利技術實施例的核酸提取裝置的示意圖，C為根據本專利技術實施例的核酸序列確定裝置的示意圖；圖2：顯示了根據本專利技術一個實施例的MODY患者家系CZ01和CZ02的家系圖譜，其中，A為根據本專利技術實施例的CZ01家系的家系圖譜，B為根據本專利技術實施例的CZ02家系的家系圖譜；圖3：顯示了根據本專利技術一個實施例，MODY患者家系CZ01家系內的患者及正常人的HNF1B基因突變位點的Sanger測序驗證峰圖；圖4：顯示了根據本專利技術一個實施例，MODY患者家系CZ02家系內的患者及正常人的HNF1A基因突變位點的Sanger測序驗證峰圖；圖5：顯示了根據本專利技術一個實施例，MODY散發患者及家系外正常人的HNF1A基因突變位點的Sanger測序驗證峰圖。專利技術詳細描述下面詳細描述本專利技術的實施例，所述實施例的示例在附圖中示出。下面通過參考附圖描述的實施例是示例性的，僅用于解釋本專利技術，而不能理解為對本專利技術的限制。HNF1B及HNF1A基因突變體根據本專利技術的第一方面，本專利技術提出了一種分離的核酸。根據本專利技術的實施例，與SEQIDNO：1相比，該核酸具有c.703C＞T突變；或者與SEQIDNO：3相比，該核酸具有選自下列的至少一種突變：c.338G＞T和c.358A＞G。需要說明的是，本專利技術的分離的核酸編碼HNF1B或者HNF1A突變體，也可以稱為“編碼HNF1B或者HNF1A突變體的核酸”，即該核酸可以理解為與編碼HNF1B或者HNF1A突變體的基因相對應的核酸物質，即核酸的類型不受特別限制，可以是任何包含與HNF1B和HNF1A的編碼基因相對應的脫氧核糖核苷酸和/或核糖核苷酸的聚合物，包括但不限于DNA、RNA或cDNA。根據本專利技術的一個具體示例，前面所述的編碼HNF1B和HNF1A突變體的核酸為DNA。根據本專利技術的實施例，專利技術人確定了HNF1B和HNF1A基因的新突變體，該突變體與青年人中的成年發病型糖尿病的發病密切相關，從而通過檢測該突變體在生物樣品中是否存在，可以有效地檢測生物樣本文檔來自技高網...

【技術保護點】
PCT國內申請，權利要求書已公開。

【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】1.一種分離的核酸，其特征在于，所述核酸編碼肝細胞核因子1α，與SEQIDNO：3相比，所述核酸具有選自下列的至少一種突變：c.338G>T和c.358A>G。2.根據權利要求1所述的核酸，其特征在于，所述核酸為DNA。3.一種分離的多肽，其特征在于，所述分離的多肽表達肝細胞核因子1α，與SEQIDNO：4相比，所述分離的多肽具有選自下列的至...

【專利技術屬性】
技術研發人員：張建國，方明艷，王海榮，杜薩特科瓦·佩特拉，王威，王俊，
申請(專利權)人：深圳華大基因股份有限公司，
類型：發明
國別省市：廣東;44